химический каталог




Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 2

Автор Д.Мецлер

тации данных, получаемых в лабораторных условиях, необходимо соблюдать известную осторожность. В настоящее время разработаны методы анализа кинетических данных для случая, когда концентрация фермента превышает /См [28]; использование же обычных уравнений приводит к недопустимо большим ошибкам.

11. Кинетика быстрых реакций

Обычные методы исследования стационарной кинетики не позволяют наблюдать за самыми быстрыми стадиями ферментативного процесса — они применимы только в том случае, когда время полупревращения для реакции превышает 10 с. Поэтому для измерения скоростей реакций со временами полупревращения от Ю-13 до 1 с был разработан целый ряд новых методов [10, 28—30] !>.

а. Струевые методы

Один из первых методов изучения кинетики быстрых реакций основывается на быстром смешивании реагентов, осуществляемом слиянием-потоков двух растворов в специальном смесителе. Далее смесь пропускают через прямую трубку со скоростью несколько метров в секунду. Если скорость составляет 10 м*с-1, то струя проходит 1 см за Ю-3 с. Наблюдать за смесью можно на подходящем расстоянии от места смешивания (например, на расстоянии 1 см) и при различных скоростях струи. Для регистрации образования продукта или расходования субстрата используют спектрофотометрические или другие методы. Достоинством метода является то обстоятельство, что он не требует быст1-рой регистрации, однако его использование сопряжено с расходом больших количеств дефицитных реагентов и прежде всего очищенных ферментов.

Широко применяемый метод остановленной струи основан на быстром смешивании двух растворов за интервал времени, составляющий? всего 1—2 мс (или даже меньше). Струю создают и останавливают посредством плунжера, который приводит в движение два медицинских шприца. Оба раствора поступают в смеситель и далее в кювету, где после остановки струи измеряются поглощение света, э. д. с, электропроводность и т. д. Метод требует быстрой регистрации. Если, например, измеряется поглощение света, то используют фотоумножитель,, подсоединенный к осциллографу. Изменения поглощения, происходящие за доли секунды, регистрируют на экране осциллографа и получен» ный «след» кривой фотографируют. Таким путем можно измерить времена релаксации до нескольких миллисекунд.

б. Релаксационные методы

Кинетические измерения в интервалах времени, составляющих десяти ки микросекунд и менее, проводят с помощью кратковременного возмущения системы, приводящего к небольшому смещению положения, равновесия реакции (или серии реакций), и дальнейшего наблюдения за скоростью достижения нового равновесия (т. е. за процессом релаксации). Наиболее широко применяется метод температурного скачка,, предложенный Эйгеном (Eigen) и его сотрудниками. Между электродами, помещенными в исследуемый раствор, за ^10-6 с создают разность-потенциалов —100 кВ. Быстрый электрический разряд от группы конденсаторов, проходя через раствор (и не приводя при этом к образованию искр), повышает его температуру на 2—10°. Равновесие всех химических реакций, для которых АНФ0, смещается. Измеряя какой-либо параметр системы (например, оптическую плотность при определенной длине волны или электропроводность раствора), можно регистрировать» очень малые времена релаксации.

Хотя это и не очевидно, но, когда смещение положения равновесия мало, установление нового равновесного состояния всегда можно представить как процесс первого порядка [см., например, уравнение (6-13)].

" Можно рекомендовать также сборник Molecular biology, biochemistry and biophysics, v. 24, Chemical relaxation in molecular biology, I. Pecht and R. Rigler (Eds.),. Springer-Verlag, Berlin, 1977, и вышедшую не так давно кингу «Методы исследования' быстрых реакций», Г. Хеммис (ред.) —М.: Мнр, 1977. — Прим. перев.

Если в процессе восстановления равновесия участвует более чем одна химическая реакция, каждой из них соответствует свое характерное ©ремя релаксации. Когда эти времена примерно одинаковы, определить их по отдельности довольно трудно, однако, как правило, времена релаксации разных химических реакций различаются на порядок и даже •более. Таким образом, для исследуемой системы часто удается измерить два и больше времен релаксации. В отдельных случаях эти времена можно прямо связать с константами скорости отдельных стадий. Например, Эйген наблюдал за скоростью взаимодействия Н+ с ОН-, регистрируя изменение электропроводности воды вслед за температурным скачком [10]. При 23 °С величина т составляла 37*10-6 с. Константа скорости процесса

Н++ОН" *Н20 (6.41)

«была рассчитана при помощи следующего соотношения:

^аон-/^]^1-3-'"'-0"1- (6-42)

Скачки давления или напряженности электрического поля могут использоваться в режиме, приводящем к периодическому изменению некоторого параметра системы. Например, поглощение ультразвука .вызывает периодическое изменение давления в системе.

в. Импульсный фотолиз (флеш-фотолиз)

Еще один широко используемый метод — это импульсный фотолиз. Световой импульс, возникающий при разрядке конденсатора импул

страница 11
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266 267

Скачать книгу "Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 2" (6.26Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
чехол укрытие от дождя на качели монако
курсы бухгалтеров бучение в коломне
пламегасители варшавское шоссе
Электрические котлы Savitr Monoblock N 12

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)