химический каталог




Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 2

Автор Д.Мецлер

род располагается позади плоскости листа бумаги. Данатан избрал для исследования пиридоксамин : пируват — аминотрансферазу, фермент родственный PLP-зависимым аминотрансферазам, но для которого субстратами являются пиридоксамин и пиридоксаль0:

Пиридоксамин + Пируват <; > Пиридоксаль -f- L-алаиии. (8-26)

Используя в качестве субстратов пиридоксаль и L-аланин, содержащий дейтерий (^Н) в а-положеиии, он доказал наличие прямого переноса а-водорода аминокислоты в ^-положение образующегося пири-доксамина (на рис. 8-8 отмечено звездочками). Далее было показано» что 2Н включался избирательно в npo-S-положение 4'-углерода пири-доксамина. Эти результаты позволяют предположить, что какая-то группа белка отрывает протон из| а-положения аминокислоты и переносит его по той же поверхности я-еистемы (сип-перенос), присоединяя его к si-стороне С = ЭД-группы. Данатан сделал вывод, что ориентация аминокислотного субстрата совпадает с изображенной на рис. 8-8.

Согласно другим экспериментам, восстановление натрийбортрити-дом (NaB3H4) как альдимина, так и кетимина, образованных субстратами этого фермента, также происходит с si-стороны, свидетельствуя, по-видимому, о том, что данная сторона обращена к доступной взаимодействиям поверхности.

Декарбоксилирование аминокислот в 2Н20 приводит к включению 2Н в про-R-положение — положение, первоначально занимаемое кар-1 боксильной группой (рис. 8-8). Расщепление серина " сериноксиме-тилазой в воде, содержащей 3Н, приводит к включению 3Н в npo-S-положение. Отмечено также стереоспецифическое введение 2Н или 3Н в (3-положение а-кетобутирата, получаемого в реакциях fj- или у-элй-минирования. Превращение серина в триптофан, катализируемое трип-тофансинтетазой, происходит без инверсии при С-3 [49].

6. Наблюдаемые изменения оптических свойств кофермента

Примечательно, что многие коферменты обладают способностью к поглощению света (см. гл. 13). Это свойство проявляется в виде спектра поглощения и может также сопровождаться круговым дихроизмом и флуоресценцией. Оптические свойства коферментных форм витамина В6 особенно чувствительны к изменениям окружающей среды и состояния ионизации различных групп в молекуле. Так, например, РМР в нейтральной биполярной ионной форме, которая преобладает при рН 7, имеет три полосы сильного поглощения света, центры которых находятся при 327, 253 и 217 нм [50].

Большинство различных ионных форм производных витамина В& имеет три полосы поглощения, расположенные примерно в одних и тех же областях, однако положение и интенсивность полос для отдельных форм различны. Например, минорный таутомер РМР, содержащий незаряженное кольцо, имеет низкоэнергетическую (длинноволновую) полосу при 283 нм [уравнение (8-27)]:

?> Реакция (8-26) каталязируется также апофермеитом аспартатаминотраисферазьц причем наблюдается такой же прямой стереоспецифическнй перенос протона, кйк и в случае пиридоксамишпнруват аминотрансферазы [47]. Предполагается, что те же результаты могли бы быть получены и с пиридоксальфосфатом.

IS*

NH

+

сн, О оН3С N'

Н+

Биполярная ионная форма

327нм (30,6 х \&см 253 нм (39,6 х 103 см -») 217 //Af (46,2 X 103 ел* -1)

(8-27)

сн2 О оо

Н—О^ ^СН2 рх

V чон

283 *м (35,3 х 103 см -1)

* Положения полос поглощения даны и в нанометрах н в волновых числах. Волновое число Jy) в см-1 равно 107, деленному иа длину волны в нанометрах (см. гл. 13).

Когда протежированы и азот кольца, и фенольный кислород, полоса поглощения смещается к 294 нм (34,0-103 см-1), а если обе группы депротонированы, то образующийся анион поглощает при 312 нм (21,ЫО3 см-1). Таким образом, изучение спектра поглощения кофер-мента, связанного в комплексе с ферментом, может дать ответ на вопрос о том, протонированы или депротонированы те или иные группы. Например, пик связанного РМР при 330 нм в аспартатаминотрансфе-разе (рис. 8-9) указывает на присутствие биполярной ионной формы [уравнение (8-27) ]•>.

Пиридоксальфосфат представлен равновесной смесью альдегидной и гидратированной альдегидной форм [как в уравнении (7-35)]. Альдегид имеет желтую окраску и поглощает при 390 нм (25,6-103 см-1, рис. 8-9), тогда как гидрат альдегида поглощает примерно в той же области, что и РМР. Полосы поглощения шиффовых оснований PLP еще больше сдвинуты в длинноволновую область, причем N-протони-рованные формы поглощают при 415—430 нм [(23—24) • 103 см-1], тогда как формы с депротонированной C=N-rpynnoft поглощают при более коротких волнах.

а. Иминные группы в свободных ферментах

Исследуя впервые высокоочищенный препарат аспартатамино-трансферазы (в 1957 г.), Дженкинс отметил удивительный факт: связанный кофермент (при рН~5) поглощал не при 390 нм, как PLP, а при 430 нм, подобно шиффову основанию (рис. 8-9). Кроме того, при повышении рН полоса поглощения сдвигалась к 363 нм. Этот результат указывает, по-видимому, на диссоциацию протона (ср/Са~6,3) с разрывом водородной связи в шиффовом основании того же типа, что и на рис. 8-5. Вскоре для этого фермента и для ряд

страница 101
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266 267

Скачать книгу "Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 2" (6.26Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
цветы на стол гостей
Фирма Ренессанс: винтовые металлические лестницы - цена ниже, качество выше!
кресло ch 797
Интернет-магазин КНС Нева предлагает W4N47EA - отправка товаров из Санкт-Петербурга во все населенные пункты северо-запада России.

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)