химический каталог




Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 1

Автор Д.Мецлер

ктериальной клетки, скажем Е. coli, можно получить целых 10 ультратонких продольных срезов (рис. 1-2), а из клетки эукариот диаметром 10 мкм —до 100 срезов. Только с такими ультратонкими срезами получаются четко сфокусированные изображения. Для изучения трехмерных структур используют серийные срезы3.

Частицы небольшого размера, в том числе макромолекулы, выявляют методом напыления. Для этого металл — хром или платину—испаряют в вакууме и напыляют под определенным углом на поверхность исследуемого образца. Так можно «увидеть» отдельные молекулы ДНК, хотя и при сравнительно низкой разрешающей способности. Собственно, видны не сами молекулы, а только их «тени», которые в 2—3 раза шире. При исследовании белков часто применяют метод негативного контрастирования. Суть метода состоит в следующем: тонкий слой раствора, содержащего исследуемые белки и электроноплотное вещество (например, фосфоволь-фрамовокислый натрий в концентрации 1%), наносят на углеродную пленку-подложку и высушивают. Образуется однородный электроноплотный слой, характеризующийся тем, что в местах локализации молекул белка отсутствует соль фос-фовольфрамовой кислоты; отсюда и термин «негативный контраст».

Если поверхность клетки, срез или бактерию покрыть слоем платины или углерода, а затем отделить это покрытие, мы получим негативный слепок — реплику, которую можно исследовать под электронным микроскопом. Изготовляют также тонкие реплики из пластмассы, которые дополнительно напыляют (оттеняют).

К числу важнейших методов получения реплик относится метод замораживания—скалывания и замораживания—травления. Свежую ткань (которую можно предварительно обработать глицерином, чтобы предотвратить образование больших кристаллов льда) быстро замораживают. Поскольку такие замороженные клетки нередко удается потом оживить, их можно рассматривать как живые. Замороженную ткань помещают в вакуумную камеру, где делают сколы или срезы охлажденным ножом. Иногда образец какое-то время выдерживают в вакууме при —100 °С, чтобы дать испариться молекулам воды с поверхности. В результате такого травления под вакуумом выявляется в виде четкого рельефа тонкая структура клеточных органелл и мембран. После травления тем или иным методом снимается реплика, которую и исследуют под микроскопом (рис. 1-11). Последние работы свидетельствуют, что скол проходит большей частью по липидному слою клеточных мембран.

Каждый биохимик должен обязательно ознакомиться с прекрасными электронными микрофотографиями, которые помещены в основных книгах по данном тематике б_ж, а так

же в ряде журналов: «Journal of Cell Biology», «Journal of Ultrastructure Research* и «Journal of Bacteriology*.

a Сравнительно недавно опубликованная работа по этому вопросу: Hoffmann Н. P., Avers С. L, Science, 181, 749—751 (1973).

6 Ledbetter М. С, Porter К. R., Introduction to the Fine Structure of Plant Cells, Springer-Verlag, Berlin and New York, 1970.

B Fawcett D. W.} An Atlas of Fine Structure, The Cell, its Organelles, and Inclusions, Saunders, Philadelphia, Pennsylvania, 1966.

r Haggis G. H., The Electron Microscope in Molecular Biology, Wiley (In-terscience), New York, 1967.

д Porter K. R., Bonneville M. A., The Fine Structure of Cells and Tissues, 3rd ed., Lea & Febiger, Philadelphia, Pennsylvania, 1968.

e Wischnitzer S., Introduction to Electron Microscopy, 2nd ed., Pergamon, New York, 1970.

ж Hayat M. A., Basic Electron Microscopy Techniques, 2 vols., Van Nost-rand-Reinhold, Princeton, New Jersey, 1972.

5. Мембраны и клеточные стенки

Подобно микоплазмам, клетки Е. coli окружены гонкой (~8 нм) мембраной, в состав которой входят белки (~50%) и липиды (/"-'50%)lr Под электронным микроскопом окрашенная (например, пермангаиатом) мембрана имеет вид двух тончайших (~2,0 нм) темных линий, разделенных неокрашиваемым слоем (~3,5 нм) (рис. 1-2, В). Мембраны примерно такой толщины и таким же образом прокрашивающиеся имеются во всех клетках, как у бактерий, так и у эукариот.

Клеточная мембрана — это не просто мешок. Она регулирует перенос низкомолекулярных веществ в клетку и из клетки. У бактерий с внутренней поверхностью мембраны связаны ферменты, катализирующие процессы окисления. Нередко бактериальные мембраны образуют складчатые участки, имеющие в разрезе вид многослойных структур.; это так называемые мезосомы (рис. 1-1 и 1-2,Г). Предполагается, что в мезосомах протекают специализированные процессы обмена веществ и репликация ДНК. В клетках Е. coli мезосомы выявляются не всегда, и все же, видимо, репликация ДНК у этого организма происходит на определенных участках поверхности мембраны и регулируется связанными с мембраной ферментами. Образование новой мембраны (перегородки) между делящимися клетками происходит синхронно с синтезом ДНК.

1 Мембраны истинных бактерий не содержат холестерина, но, как нн парадоксально, в мембранах большинства микоплазм, как и у человека, холестерин присутствует. Представители рода Mycoplasma ведут паразитический образ жизнн н получают необходимый холе

страница 8
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176

Скачать книгу "Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 1" (5.5Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
купить железную этажерку
ремонт кузова после града в электростали цена
набор кастрюль недорого
Интернет-магазин КНС Нева предлагает W4N47EA - отправка товаров из Санкт-Петербурга во все населенные пункты северо-запада России.

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)