химический каталог




Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 1

Автор Д.Мецлер

ереходов, которую легко измерить [157—161].

Константа спин-спинового взаимодействия / представляет собой расстояние в герцах между соседними пиками мультиплета. Эта величина не зависит от напряженности поля, а следовательно,.и от частоты спектрометра. Представленный на рис. 2-40 сигнал от 5'-метиленовых протонов расщепляется вследствие 1Н-31Р-в1заимодействия с / с^'7 Гц. Чем ближе расположены ядра друг к другу, тем сильнее спин-спиновое взаимодействие, однако иногда оно может проявляться и на расстоянии пяти ковалентных связей.

При наличии подозрения на взаимодействие часто применяют технику двойного облучения, или спиновой развязки. Образец облучают при резонансной частоте одного из участвующих в спин-спиновом взаимодействии ядер, а спектр снимают в интервале резонансных частот другого ядра пары. При этих условиях мультиплет вырождается в синг-лет, что и свидетельствует о взаимной связи двух ядер.

Константа спин-спинового взаимодействия между двумя протонами, связанными с соседними атомами углерода (или другими атомами)» зависит от торсионного угла ф [уравнение (2-35) j1.

Н Н'

V > У ?

/н.н' ~ A cos2 <р + В cos <р + С (2-35)

Уравнение Карплуса (2-35) получено теоретическим путем, но константы А, В и С подбираются эмпирически [164]. В выписанных ниже приближенных уравнениях (2-36) — (2-38) [164] средний член уравнения (2-35) опущен:

Н—С—С—Н' J ~ 17cos3Н— С—N—Н' J= 12cos2

Н—С—О—Н' J = 10 cos2 ф — 1,0 (2-38)

Поскольку второй член в этих уравнениях равен 1 Гц или меньше, часто используют одночленное уравнение Карплуса.

1 Уравнение можно записать и в таком виде: / яа Л'+B'cos cp+C'cos 2<р (М. Каг-plus, JACS, 85, 2870—2871, 1963). Поскольку cos 22. Если ф (разд. Б.3) = 180°, ф'^гг-1200.

Спектры ЯМР позволяют определять торсионный угол между атомами водорода при «-углероде аминокислотного остатка и соседнем атоме азота пептидной связи (q/, но не (р)2; это позволяет установить,

s какой конфигурации находится пептидная группа — цис или транс.

| = 8,5 cos2 ф', если q>' лежит между 0 и 90°

\=9,5со52ф', если ф' лежит между 90 и 180°

Метод ЯМР использовался для определения конформации малых пептидов и полиэфиров [165—167] и структуры углеводов [168] и нуклео-тидов.

присут-(Eu) и

Весьма ценную информацию дают спектры ЯМР, снятые в ствии парамагнитных ионов лантанидов, таких, как европий празеодим (Рг) [169, 169а]. Эти ионы индуцируют существенные сдвиги многих сигналов ЯМР, что при наличии определенных эмпирических соотношений помогает определить структуру того пли иного соединения.

10

Спектры ПМР белков чрезвычайно сложны, однако в их расшифровке достигнуты весьма значительные успехи [170—175]. На рис. 2-41 приведены спектры ПМР фермента рибонуклеазы, полученные при 60 и 220 МГц. Как легко видеть, при более высокой частоте разрешение выше. Обращает на себя взимание и тот факт, что после тепловой денатурации фермента (до 72,5°С) многие сигналы спектра, снятого лри 220 МГц, оказываются более узкими. Это означает, что в результате денатурации все однотипные боковые группы белка попадают в примерно эквивалентное окружение. Кроме того, было показано, что спектры ПМР для белков, находящихся в конформации статистического клубка, хорошо соответствуют спектрам, которые мож'но получить, исходя из стандартных химических сдвигов отдельных аминокислот [171], что согласуется с изложенным выше.

Как правило, спектры ПМР снимают в D20, поскольку сигнал Н20 накладывается на большую часть спектра. Все же при снятии спектров в Н20 на далеком слабопольном конце спектра (б> 10) видны слабые пики от

NH-протонов имидазольных боковых цепей (рис. 2-42). Спектры, снятые при трех разных значениях рН, показывают, что при повышении рН от 4,4 до 8,9 сигнал, соответствующий наименьшей энергии, смещается от 12,9 до 11,1 м. д. При промежуточном значении рН (5,31) пик

занимает промежуточное положение, довольно близкое к положению-пика при рН 4,4. Снимая зависимость химического сдвига от рН, получают S-образную кривую титрования (гл. 4, разд. В), по которой можно оценить значение рКа диссоциирующих групп. Для гистидина (кото_J 1 1 I I 1 | L

13 12 11 ю

S, м. ь.

РИС. 2-42. Спектр ПМР для рибонуклеазы А в растворе 0,1 М NaCl при температуре 22°. Три спектра соответствуют трем значениям рН: 4,4; 5,3 и 8,9. Каждый спектр-есть результат усреднения нескольких измерений; операция усреднения проводилась, на ЭВМ Varian С1024 (Griffen J. H. et al, Biochemistry, 12, 2097, 1973).

рый считается функциональной группой активного центра фермента;. см. гл. 7, разд. Д. 2) полученное таким образом рК& равно 5,8.

В протонных спектрах ЯМР (до 360 мгц) молекул тРНК удалось-идентифицировать 26 резонансных линий, соответствующих двадцати: протонам, участвующим в образовании водородных связей между парами оснований (N—Н—N,

страница 76
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176

Скачать книгу "Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 1" (5.5Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
melodia фурнитура италия
Подарочный сертификат Боулинг для компании
речевое оповещение проект
такси комфорт марки

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(15.12.2017)