химический каталог




Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 1

Автор Д.Мецлер

ИС. 2-39. А. Оценка молекулярного веса азоферредоксина в «нативном» состоянии с помощью фильтрации через сефадекс G-200. Черные кружки указывают положение средней точки пика для белков известного молекулярного веса. Стрелкой отмечено положение азоферредоксина, Материал пика для каждого из белков элюирован в 5— 7 пробирок. Скорость элюции составляла 3,2 мл-час™'. Элюат в коллекторе фракций распределяли по фракциям объемом в 1,6 мл. Б, Оценка молекулярного веса полипептидной цели азоферредоксина с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, содержащем додецилсульфат натрия. Каждая точка получена из четырех стандартных кривых. Маркерными белками служили каталаза (1), фумараза (2), альдолаза (3), глицеральдегидфосфатдегидрогеназа (4), а-химотрипсиноген А (5) и миоглобин (6). Светлый кружок указывает положение азоферредоксина (Nakos G., Mortenson L.,

R."r,^hpmi4f rv 10 4o7. 197П.

детергента додецилсульфата натрия. Под действием этого соединения •белки не только денатурируют, но и покрываются более или менее ровным слоем детергента [155]. Для получающихся в результате палочковидных молекул обычно характерна примерно одинаковая зависимость электрофоретической подвижности от молекулярного веса. Один из примеров такого рода приведен «а рис. 2-39, Б. Здесь тоже молекулярный вес исследуемого белка определяется из сравнения скорости его перемещения со скоростями для ряда белков с известным молекулярным весом [153, 156].

7. Конформация макромолекул

Многие физические методы, упоминавшиеся в предыдущем разделе, сводятся к измерению величин, зависящих как от молекулярного веса, так и от формы молекул. Следовательно, те же методы могут использоваться и для определения конформации. Однако намного более ценными в этом отношении являются два других метода: рентгеноструктур-ный анализ кристаллических соединений и получение спектров ядерного магнитного резонанса (ЯМР) соединений, находящихся в растворе.

•а. Рентгеноструктурный анализ

Вскоре после открытия рентгеновых лучей по дифракционным картинам, получаемым при прохождении через кристалл рентгеновского пучка, стали определять межатомные расстояния и устанавливать структуру кристалла. Этот метод был настолько усовершенствован, что позволял устанавливать структуру довольно сложных органических соединений, затрачивая на эксперимент всего несколько дней. При этом наиболее серьезной проблемой, затрудняющей применение рентге-иоструктурного метода, часто оказывалось приготовление достаточно ?крупных и совершенных кристаллов.

В последние годы рентгеноструктурный анализ широко применяется для определения структуры молекул белков и нуклеиновых кислот. Длины и углы связей, точно установленные для малых молекул, ис-. пользуются как стандартные значения в предположении, что они сохраняются такими же и в более сложных полимерных структурах. Одним «з этапов определения структуры белков и нуклеиновых кислот является построение молекулярных моделей полимеров, согласующихся с рентгеновскими данными и сохраняющих стандартные значения длин связей и валентных углов (рис. 4-19, Б) [71].

6. Ядерный магнитный резонанс (ЯМР) [157—162]

В основе ЯМР-спектроскопии лежит поглощение электромагнитных волн в радиочастотном диапазоне ядрами, обладающими магнитным моментом. Все ядра с нечетными массовыми числами (например, *Н, t3C, 15N, 170, 19F и 31Р), равно как и ядра с четным массовым числом, но нечетным атомным номером, обладают магнитными свойствами, в то время как 12С и 160 немагнитны. Поглощение кванта энергии E = hv происходит лишь в том случае, когда ядра находятся в сильном магнитном поле ЯМР-опектрометра. В спектрометре с рабочей частотой 100 МГц (v=100 МГц) энергия кванта составляет всего ? = 6,625* • Ю-34-108 = 0,04 Дж-моль-1, что на лять порядков ниже среднего значения энергии теплового движения молекул (3,7 кДж-моль-1). Таким образом, спиновый переход, индуцированный в ЯМР-спектрометре, не оказывает заметного влияния на химические свойства молекул.

Резонансная частота v, при которой в спектрометре происходит поглощение энергии, есть

v=\xHjh, (2-32)

где Но — напряженность внешнего магнитного поля, ц. — магнитный момент исследуемых ядер, h — постоянная Планка.

В принципе спектр ЯМР можно получить, поддерживая магнитное поле Но постоянным и определяя, при какой частоте произойдет поглощение, как это делается при снятии ультрафиолетовых, видимых и инфракрасных спектров (гл. 13). Однако ЯМ-Р-спектрометры работают

285

'Н2НО

1 1 i I I I ; I I I ; I I I ? I I j I I I I I ' I I ! I I I I I 1 I I I I I 1 I i I 1 I I I 1 1 ..L h

10,0 8,0 6,0 4,0 2,0 0,0

S, м, ь.

РИС. 2-40. Спектр ПМР для пиридоксаль-5'-фосфата; спектр снят при 60 МГц; pD = = 7,05. Внутренним эталоном служит соль Тьера. Над каждым пиком указана величина химического сдвига в герцах, внизу изображена шкала б. Для усреднения неодно-родностей магнитного поля ампула с

страница 74
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176

Скачать книгу "Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 1" (5.5Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
цветы в голубых коробках
пониженный ачтв что это такое
жаровня с крышкой
обеденная группа стол ordt-d6060 и 4 стула 391ab4-s

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(04.12.2016)