химический каталог




Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 1

Автор Д.Мецлер

в этом положении в количестве 0,17%,

* Matwiyoff N. Л., Ott D. G., Science, 181, 1125—1132 (1973).

6 Wang С. Н., Willis D. L., Loveland W. D., Radiotracer Methodology in the Biological, Environmental and Physical Sciences, Prentice-Hall, En-glewood Cliffs, New Jersey, 1975.

E Wang Y. ed., Handbook of Radioactive Nuclides, The Chemical Rubber Co., Cleveland, Ohio, 1969.

r Thornburn С. C, Isotopes and Radiation in Biology, Butterworth, London, 1972.

» O'Farrell P. H., JBC, 250, 4007—4021 (1975). e Cornforth J. W., Science, 193, 121 — 125 (1976).

ж Bransome E. D., Jr. ed., Liquid Scintillation Counting, Grune and Strat-ton, New York, 1970.

Методы определения нуклеотидных последовательностей ДНК разрабатывались медленнее, и тем не менее к настоящему времени они уже достаточно хорошо освоены [134а]. Разрыв молекулы ДНК вблизи участка с определенной последовательностью (обычно палиндром-ной, разд. Г.11) осуществляют с помощью специфических эндонуклеаз рестрикции (гл. 15, разд. ЕЛ). Полученные фрагменты далее подвергают депуринизации или обрабатывают экзонуклеазами [135]. Отличные результаты дает электрофорез на ацетате целлюлозы с последующим применением особой тонкослойной «гомохроматографии»1 на ДЭАЭ-целлюлозе [136]. Если олигонуклеотиды несут радиоактивную метку на одном конце, последовательность можно определить, частично тидролизуя их с помощью экзонуклеазы (см. следующие параграфы) и лроводя затем электрофорез и гомохроматографию (рис. 2-37). Наименьший по длине олигонуклеотид в ходе гомохроматографии продвигается дальше всех; каждое из следующих расположенных ниже пятен отвечает соединению, содержащему на один нуклеотид больше, чем предыдущее. По смещению одного пятна относительно другого в ходе электрофореза можно восстановить примерную нуклеотидную последовательность [137, 137а]. Так, на рис. 2-37 самое верхнее пятно отвечает олигонуклеотиду неизвестного состава, а нуклеотид, находящийся непосредственно ниже его, содержит на один остаток тимина больше, о чем ясно свидетельствует его более высокая электрофоретическая подвижность при рН 3,5. Присоединение гуанина увеличивает электрофорети-ческую подвижность не так сильно, а присоединение аденина почти совсем на нее не влияет. Присутствие лишнего цитозина, напротив, снижает электрофоретическую подвижность. Последовательность может быть прямо считана с нуклеотидной карты: (5') -TTATTAGCCAGAAGT--(3'). Эти данные были подтверждены дальнейшими исследованиями, R ходе которых проводилось отщепление пуринов и определение ближайших соседей. Другой недавно разработанный метод быстрого определения последовательности ДНК описай в работе [137Ь].

1 Разделение меченых олигонуклеотидов проводят в растворителе, содержащем произвольную смесь немеченых нуклеотидов (продукты гидролиза РНК). В ходе проявления пластинки немеченые нуклеотиды становятся на место исследуемых меченых нуклеотидов и перемещаются вдоль пластинки на расстояния, примерно соответствующие их размерам.

Существует целая группа специфических ферментов, расщепляющих полисахариды. Обычно эти ферменты специфичны по отношению к какому-то конкретному сахару, встроенному в цепь с помощью определенного типа гликозидной связи. Примерами такого типа являются ферменты, расщепляющие крахмал. а-Амилазы из слюны и поджелудочной железы разрывают молекулы крахмала случайным образом, тогда как растительные р-амялазы последовательно отщепляют мальтозу с концов нера^етзлеиных цепей (гл. 7, ря.чд. В.6).

Сложные липиды расщепляются липазами. Панкреатическая липаза удаляет 1- и 3-ацильные группы триглицеридов с образованием 2-моно-глнцеридов. Фосфолипаза А, присутствующая в различных тканях л бактериях, а также входящая в состав змеиного яда, избирательно отw т А,

о:

В-о

cl

«\>

О

е

I

РИС. 2-37. Двумерная нуклеотиднля карта, полученная к результате частичного гидролиза ЭДРолигонуклеотнда, отщепленного от

кольцевой копнн ДНК, евнтезкроланиой на деля глобннопой мРМК

(гл. 15, разд. )К 4). Олигоиуклсотнд обрабатывали зкзоиуклеалой

i» змеиного «да (фосфодиэстсразоП. табл, 2-11), отщепляющей

нуклеотиды последовательно с 3'коныа. Самос верхнее пятно соотпететиует нуклеотиду неизвестного состава; каждое следующее

расположенное ниже пятно (одержит на одно иуклеотндное звено

больше По относительной подвижности промежуточных продуктов

(см текст) била noteггноплена

последовательность: (5'}~

'П ATTAGCCAGAAGT- (3') [137|

Электрофорез при рНЗ»5

тепляет от фоефолипидов ацильную группу, стоящую в 1 м или 2-м положении. В бактериях и растительных тканях присутствуют фосфоди-эстеразы, известные под названием фосфолипаз С и Г) соответственно;

они разрывают цепь по разные стороны от фосфодиэфирной связи, как

о

показано ниже.

А,

о.

СНа—0-+-С— R.

I

щ—Т.-тО-СН

| ? ||

СП,—O-t-P-tOАа

:нг—сн,—N—сн»

сн.

С' D

Для избирательного расщепления карбоксилатных эфирЧв (в положениях, обозначенных на схеме через At и Л2) используется мягкий гидролиз в присутствии основных кат

страница 69
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176

Скачать книгу "Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 1" (5.5Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
kv.rezac в тольятти купить
пламегаситель вместо катализатора mercedes
сантехника lineatre купить
элитное такси москвы

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(05.12.2016)