химический каталог




Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 1

Автор Д.Мецлер

ротинов). Пропуская пигменты, растворенные

ч неяолярн , к растворителях (например, гсксй*, J , и<.>\ . 4 колени \ ?

окисью алюминия иди другими адсорбентами, М. Цвет обнаружил, чт<-смесь разделяется на окрашенные полосы, которые перемещаюгсп вдоль колонки по мере прохождении растворителя. Непрерывно пропуская растворитель чере~< колонку, мижио эл тировать отдельные нш менты п

4 II ',' 34 П- - t^it г-г* нчи -огрлфпп (г *н.ж г - ) а жен фляшшок,

'.I'V.V'iibJiuunMH при |(0.]\чрнир WKdVHJia рнС'^фллtinia ТЪ-яьдоии" светлых пятен по '-nrwi.f г,уоп« 'П^цч[0 фл}орсгцснц1а'(1 соединений в w u/rpафшетоьим свете К1,«№-т s-wm>ii;cT~,o р^офчг-и-пт сочрэттло» l перрьнача ьпим виде ртцтп, обозиячгнно*-'.'Г) Стрг.г;1л _,f,i .тл-.aitiT vecro нг)негеиин сЛра.чг> Для разделения в первом ни up и? vr, и u'ui ?••та - г «; } kcj сна я киспг>тч/2 бут.-.нин^'стгно.'! С синил, во ^т-'^ом с »vl г Оутаноч/м ejeuaj' киелгчл/голя [147]

чнегим виде. Описанный метод широко применяется н сейчас н noon 11л ^апне адсорбционной хроматографии При .-лом пигменты не растно ряючея н твердим материале, а адсорбируются на его поверхности.

Часто в качестве материала, которым нынешня ют колонки, исполо yioi енлнкагель. содержащий большое киличеепш воды; разделено', компинентон в 5*том случае происходит :>и счет их распределения между в» дной joh, иммобилизованной сил и'нагелем, и нядий, протекающей ц рс от<к}' Для разделения липидов применяют колонки с обращенной фазой; их наполняют силикагелем. икисью алюминия или другим инертным материалом, пропитанным кеполирной яащкостыо. В роль лидвижном фдзы ->?? м к учт* м.'ступист белее поляоп й pat творите ль.

Хроматографии на бумаге основана на использовании в качестье гтммибилпзованной фаны высококачественной фильтровальной бумаги,

й л сорбирующей воду. В последнее время широкое распространение подучила тонкослойная хроматографии; вместо бум игл злесь используется тонкий слой енлнкагедя, нанесенный на стеклянную пластинку. Этот

"(?точ Iора до удобнее хромаю!рафии на бумаге, поскольку дает б лее Гллстрие и качественное разделение (рис. 2 34). Для разделения летучих всцеств применяется газовая хроматография, основанная ня

Молекулвг, из которых мы состоим 16 1

установлении динамического равновесия между газовой и неподвижной фазами при сравнительно высоких температурах; область применения этого метода расширяется в связи с возможностью образования летучих производных разделяемых соединений (например, метиловых эфи-ров или триметилсилильных производных сахаров).

Весьма важное место принадлежит аффинной хроматографии [116, 117]. Она основана на использовании особых адсорбентов, специфически взаимодействующих с макромолекулами и избирательно удерживающих данный вид макромолекул (отсюда и название метода). Примером, о котором уже говорилось в разд. Г.10, служит адсорбция комплементарных фрагментов молекулы нуклеиновой кислоты на иммобилизованной ДНК. Аффинная хроматография используется также для очистки ферментов, антител и других белков, способных прочно связываться со специфическими малыми молекулами.

Открытый характер структуры в гелях (рис. 2-18), образуемых производными агарозы, делает крупнозернистые порошки этих гелей удобной твердой основой для приготовления адсорбентов. Гидроксильные группы агарозы часто модифицируют присоединением к ним аминов. Вначале агарозу обрабатывают бромцианом (Br—C = N) в щелочной среде, «активируя» тем самым углеводную цепь (химическая сторона этого вопроса обсуждается в работе [118]), а затем добавляют амины. Полная реакция описывается следующим уравнением:

Вг~

Агароза—ОН + BrCN-f R—NH2 >

NH О

i! II

Агароза—О—С—NH—R 4-Агароза—О—С—NH—R + Другие продукты. (2-17)

Таким образом можно приготовить адсорбенты, содержащие множество разных R-групп. Кроме того, присоединив к активированной агарозе диамин [R=(CH2)n—NH2], с полученной в результате со-аминоалкил-агарозой можно далее связать другие соединения. Для этого используется реакция с растворимым в воде карбодиимидом:

О

(( Растворимый в воде

Агароза—О—С—NH—СН2—СН2—NH2 + R—СООН ~

карбодиимид

О о

II Н ||

»- Агароза—О—С—NH—СН2—СН2—N—С—R. (2-18)

Карбодиимиды широко применяются в лабораторной практике для образования амидных и фосфодиэфирных связей. Процесс образования амида, фигурирующего в уравнении (2-18), можно изобразить в виде схемы (2-19). Для реакций, протекающих в неводной среде, часто используют дициклогексилкарбодиимид ^"=циклогексил; см схему), однако для последующего присоединения каких-либо групп к сахарозе лучше брать растворимый в воде реагент, например 1-этил-3-(диметил-аминопропил)-карбодиимид [119].

Помимо описанных выше, известно также много других способов приготовления адсорбентов для аффинной хроматографии.

Примером применения аффинной хроматографии для очистки ферментов может служить выделение стафилококковой нуклеазы (фермен<

С

N

О

R"

R"

Н

,N—R"

\

R—С — N—R' Н

(

страница 64
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176

Скачать книгу "Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 1" (5.5Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
курсы adobe flash
продаю дом в коттеджном поселке новая рига
дефлекторы для opel mokka
изготовить скамейку на заказ

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(05.12.2016)