химический каталог




Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 1

Автор Д.Мецлер

д. Б.4.д) обусловлен стэкинг-взаимодействием между основаниями, плотно уложенными стопками в структуре нативной молекулы. Температура плавления, Тпл, — это точка, при которой прирост поглощения составляет половину максимального (рис. 2-28). Чем выше GC-содер-жание нуклеиновой кислоты, тем более устойчива она к денатурации, причем зависимость Тпл от GC-содержания почти линейна. Для раствора, содержащего 0,15 М NaCl + 0,015 М цитрата натрия, рН 7,0, справедливо уравнение (2-15). Точное соотношение между GC-содержани-ем ДНК и Тпл очень сильно зависит от ионного состава и рН среды [87, 88].

GC-содержание (%) =2,44 (Т^— 69,3) Х.1 (2-15)

Полная денатурация молекулы ДНК приводит к расхождению комплементарных цепей. При быстром охлаждении раствора денатурированной ДНК цепи остаются в разделенном состоянии. Однако, если в течение какого-то времени поддерживать температуру чуть ниже значения Тпл (этот процесс называют отжигом), может вновь восстановиться на-тивная структура. Этот факт дает в руки ученым очень важный метод

МОЛеКуЛЫ, ИЗ КОТОРЫХ МЫ UOUIU11M 110

5 1,48 ? 1.44

I 1,36 о>

| 1,32 щ

3- 1,28

о

5 1,24

8 1,20

1 1Д6

11Д2

I 1,08 Е

^ 1,04 1,00

исследования нуклеиновых кислот, основанный на образовании гибридных дуплексов [89, 90].

Одним из типов двойных спиралей, которые получают искусственным путем, является гибрид ДНК—РНК. Оказалось, что молекулы информационной (матричной) РНК (мРНК) гибридизуются только с одной из двух разделившихся цепей ДНК, несущей участки, комплементарные мРНК. Метод гибридизации используется также для получения гетеродуплексов ДНК, в которых две цепи молекулы происходят от двух разных генетических линий одного и того же вида организмов. Известно, что некоторые мутации состоят в делеции (выпадении) или вставке одного или нескольких оснований в цепь ДНК- Гетеродуплексы, в которых одна из цепей нативная, а другая — со вставкой или делеци-ей, имеют по всей своей длине нормальную структуру по Уотсону—Крику, за исключением тех участков, где делеции или вставки нарушают комплементарность и образуются одноцепочечные петли (рис. 15-24).

Опыты по гибридизации позволили исследовать гомологичность нуклеиновых кислот из разных источников. Вначале молекулы расщепляют (например, с помощью ультразвука) на фрагменты длиной ~ 1000 нуклеотидов и подвергают денатурации. Фрагменты денатурированной ДНК смешивают с денатурированной ДНК из другого источника. Участки ДНК разных видов, имеющие близкие нуклеотидиые последовательности, в той или иной степени гибридизуются, тогда как участки с сильно различающимися последовательностями гибридизации не поддаются. Рассмотрим один из вариантов постановки таких экспериментов. Денатурированную ДНК определенного организма, не подвергавшуюся деградации, заключают в агаровый гель [90] или наносят на нитроцеллюлозный фильтр [91]. Фрагменты ДНК из другого источника пропускают через колонку с ДНК-содержащим агаром или через фильтр с абсорбированной ДНК. Комплементарное спаривание соответствующих фрагментов задерживает их на колонке или фильтре, тогда как фрагменты, не нашедшие себе «партнеров», свободно проходят дальше.

l\ 10 ш2 ю3|ю4 105 106ll07 108 1 оЧ 10

I 1 1 f—=—I 1 1—ч—\ 1 и—

ю

Очень ценным является изучение кинетики реассоциации фрагменти-рованной денатурированной ДНК [92—95]. Этот процесс подчиняется кинетике второго порядка (гл. 6, разд. А.З), описываемой уравнением (2-16). Его легко получить, проинтегрировав уравнение (6-8) в интервале от 0 до t при [А] = [В] =С.

С/С0= 1/(1 (2-16)

Это соотношение связывает начальную концентрацию денатурированной ДНК Со с концентрацией С молекул ДНК, оставшихся диссоциированными к моменту времени t. Данные по реассоциации удобно представлять в виде графика зависимости относительного числа реассоциированных молекул от GV в логарифмическом масштабе (рис. 2-29,Л). Как видно из рис. 2-29, Б, Cot увеличивается прямо пропорционально длине генома ДНК, но иногда наблюдается сильное отклонение от этой зависимости, обусловленное наличием в молекуле большого числа повторов [поли(й) или поли (А)]. Наклон кривых в средней точке характеризует степень гетерогенности фрагментов ДНК в растворе (гл. 15, разд. ИЛ).

П. Конформация ДНК в палиндромах

Вопрос о том, что биологическое значение имеют обе конформации ДНК — А и В, — уже обсуждался нами ранее. Другой тип конформа-ционных перестроек связан с присутствием палиндромов1 — последовательностей ДНК, которые одинаково читаются как в прямом, так и в обратном направлении [95]. Такие последовательности обнаружены в ДНК многих вирусов и бактерий. Рассмотрим, например, ген, определяющий последовательность нуклеотидов в молекуле тРНК, изображенной на рис. 2-24. Он представляет собой участок двуспиральной ДНК, в котором одна цепь имеет ту же последовательность, что и цепь на рис. 2-24, за исключением того, что вместо Т стоят U и -ф (псевдоури5' —Т GGTGCGAATTCTCTGCATCGAACACAGCA С- 3'

З'-ACCACGC TTAAGACACCTAGCT TGTGTCCTG-S'

?« _ ТфС-летля -??

страница 57
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176

Скачать книгу "Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 1" (5.5Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
сигнализация с турботаймером для дизеля
мебель для дачи в москве
инвентарь для спортивных игр
вентилятор конденсатора с3s2 (75 квт)

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(17.01.2017)