химический каталог




Клинические лабораторные исследования

Автор А.Я.Любина Л.П.Ильичева Т.В.Катасонова С.А.Петросова

еатинфосфотрансферазы (креатинфосфокиназы).

Активность перечисленных ферментов резко возрастает при инфаркте миокарда, когда происходит некроз мышечной ткани. При стенокардии не отмечается повышение активности АсАТ, АлАТ, креатинкиназы.

При заболеваниях печени и для дифференциации желтух производят определение АлАТ, АсАТ, фосфомоноэ-стеразы (щелочной фосфатазы) и вычисляют соотношения между ними-. При паренхиматозных желтухах резко возрастает активность перечисленных ферментов, которые освобождаются при распаде клеток печени. Пря механических желтухах, не сопровождающихся клеточ246

ным распадом, активность этих ферментов остается в пределах нормы.

При заболеваниях поджелудочной железы, сопровождающихся клеточным распадом, резко повышается активность фермента а-1,4-глюкан-4-глюканогидролазы (а-амилазы). При заболеваниях костной ткани (рахит, опухоли) повышается активность фосфомоноэстеразы (щелочной фосфатазы). Снижение активности ацетилхолингидро-лазы (холинэстеразы) отмечается при болезни Боткина, инфаркте миокарда, отравлении фосфорорганическими соединениями.

Врожденная недостаточность D-глюкозо-б-фосфат-фосфогидролазы (глюкозо-6-фосфатазы) приводит к тяжелым нарушениям углеводного обмена — гипогликемии, ацидозу, избыточному отложению гликогена в печени и почках. Этот фермент способствует образованию свободной глюкозы.

В практике биохимических лабораторий при проведении ферментативных анализов необходимо учитывать специфику исследуемых веществ.

О количестве фермента судят по производимому им действию. За единицу (Е) любого фермента принимают то его количество, которое катализирует превращение одного микромоль субстрата или образование одного микромоль продукта реакции в одну минуту при заданных условиях. При этом активность фермента выражается в единицах на литр (Е/л).

При проведении анализа необходимо строго соблюдать условия реакции: температуру, рН среды, концентрацию субстрата и др.

Особые требования предъявляются к исследуемому материалу. Кровь на исследование лучше брать натощак, как можно скорее отделять сыворотку от сгустка, не допускать употребления гемолизированной сыворотки. Следует иметь в виду, что длительное хранение сывороток приводит к снижению активности ферментов. При получении плазмы крови необходимо выбирать соответствующий антикоагулянт, так как он может влиять на результат исследования. Например, оксалат и цитрат влияют на активность а-амилазы.

Вопросы для повторения

1. Какие вещества называются ферментами?

2. Какова химическая природа ферментов?

3. Каковы специфические свойства ферментов?

4. Каков принцип классификации фермеитов?

5. Какую роль в осуществлении ферментативной реакции играет фер-ментсубстратиый комплекс?

6. Что такое активный центр фермента и какое влияиие на него оказывают активаторы и ингибиторы фермеитов?

247

7. На какие группы можно разделить ферменты, содержащиеся в крови

человека?

8. Какие ферменты определяются и как изменяется их активность при

' инфаркте миокарда? стенокардии?

9. Какие ферменты определяются и как изменяется их активность при

паренхиматозных и механических желтухах?

10. Почему увеличивается активность а-амилазы при панкреатите, щелочной фосфатазы при опухолях костной ткани?

11. При каких заболеваниях снижается активность холинэстеразы?

12. Что принимают за единицу активности фермента?

13. Какие правила необходимо соблюдать при проведении определения ферментов в клинико-биохимических лабораториях?

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

§ 118. Определение активности а-амилазы1

Крахмал в присутствии ионов йода окрашивается в сине-фиолетовый цвет. ct-Амилаза осуществляет расщепление крахмала с образованием продуктов, не дающих цветной реакции с йодом. Об активности фермента судят по уменьшению концентрации крахмала.

Реактивы: 1) субстратно-буферный раствор, рН 7,0 (13,3 г безводного двузамещенного фосфата натрия и 4,3 г бензойной кислоты растворяют в 250 мл дистиллированной воды, доводят до кипения; 0,2 г растворимого крахма* ла размешивают в небольшом количестве воды и выливают при перемешивании в кипящую смесь, кипятят 1 мин, охлаждают, переносят в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят дистиллированной водой до метки;

2) 0,1 н. основной раствор йода (готовят из фиксанала);

3) 0,01 н. рабочий раствор йода (готовят из 0,1

н. раствора перед работой).

Ход определения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мл субстратно-буферного раствора! нагревают 5 мин при 37° С, добавляют 0,1 мл сыворотш или профильтрованной мочи. Инкубируют 7,5 мин npi 37° С. Сразу же добавляют 5 мл рабочего раствора йода i доводят объем дистиллированной водой до 50 мл. Тотча< измеряют экстинкцию на ФЭКе в кювете с толщиной ело* 10 мм при красном светофильтре (630—690 нм) проти воды.

Контрольную пробу ставят как опытную, но сыворот

ку или мочу добавляют вместе с рабочим раствором йод:

после инкубации. Измерение экстшжции проводят также

как в опытной пробе. i

Расчет. Активность а-амилазы выражают в грамме крах

страница 92
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108

Скачать книгу "Клинические лабораторные исследования" (2.84Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
облегченные плиты
ручка-кноб дверная купить
что такое гистологическое иследование
чугунная сковорода интернет магазин

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(27.07.2017)