химический каталог




Клинические лабораторные исследования

Автор А.Я.Любина Л.П.Ильичева Т.В.Катасонова С.А.Петросова

хлористоводородной кислоты

должно соблюдаться точно—1:10. ?

У каждого больного кровь берут отдельным стериль-Т

ным капилляром. 1

Капиллярную пипетку погружают в среднюю пробирку гемометра и выдувают из нее кровь на дно пробирки. Недопустимо образование при этом пузырей. Капилляр следует 2—3 раза промыть хлористоводородной кислотой из верхнего прозрачного слоя жидкости. Кровь в пробирке тщательно перемешивают с хлористоводородной кислотой и оставляют на 5 мин. За это время эритроциты гемолизируются и гемоглобин превращается в хлорид гематина бурого цвета. По истечении указанного времени в градуированную пробирку по каплям вносят дистиллированную воду. Содержимое пробирки размешивают тонкой стеклянной палочкой. Разведение продолжают до полного совпадения цвета жидкости в градуированной пробирке с цветом стандарта. Сравнение цветов необходимо производить всегда при одном и том же источнике света, так как интенсивность освещения влияет на результат определения.

Показания гемометра снимают по нижнему мениску жидкости в градуированной пробирке. Полученная цифра указывает концентрацию гемоглобина в грамм-процентах. Для того чтобы выразить концентрацию гемоглобина в единицах Международной системы (СИ), т. е. в граммах на литр крови (г/л), нужно количество гемоглобина в г% умножить на 10.

§ 55. Определение гемоглобина на фотоэлектроколориметре

Колориметрический визуальный метод определения (сравнение цвета исследуемой жидкости со стандартом глазами наблюдателя) всегда субъективен и поэтому неточен.

Окраска раствора отражает степень поглощения им света. Для получения точных объективных данных о светопоглощении применяются приборы, снабженные фотоэлементами,— фотоэлектроколориметры, спектрофотометры и др.

Способы определения гемоглобина на ФЭКе основаны на образовании стойких, окрашенных соединений при взаимодействии его с различными веществами: аммиаком, ацетонциангидрином и др.

Гемиглобинцианидный метод. Гемоглобин, взаимодействуя с ацетонциангидрином, в присутствии железосинеро-дистого калия K3[Fe(CN)6] образует гемиглобинцианид красного цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина в пробе крови.

Реактивы: 1) трансформирующий раствор (0,5 мл ацетонциангидрина, 0,2 г железосинеродистого калия, 1 г гидрокарбоната натрия NaHCl3 растворяют в 1 л дистиллированной воды; реактив стоек, хранится в посуде из темного стекла); 2) стандартный раствор гемиглобинциани-да (раствор, выпускаемый фирмой «Ренал», содержит 59,75 мг% гемиглобинцианида; раствор фирмы «Иммуна» — 64,23 мг%. Это соответствует концентрации гемоглобина в крови 150 и 154 г/л при разведении ее в 251 раз).

Ход определения. К 5мл трансформирующего раствора добавляют 0,02 мл (капилляр Сали) крови. При этом кровь разводится в 251 раз. Оставляют пробирки на 10 мин при комнатной температуре.

Фотометрируют при зеленом светофильтре (длина волны 500—560 нм) в кювете с толщиной слоя 10 мм против дистиллированной воды.

Стандартный раствор фотометрируют при тех же условиях, что и опытную пробу.

Расчет. Содержание гемоглобина определяют по калибровочному графику, который строится по стандартному раствору гемиглобинцианида (табл. 7).

Приготовленные разведения фотометрируют против дистиллированной воды («холостая» проба). Концентрацию гемоглобина крови можно рассчитать по формуле:

Hb=f^ • С-К-0,01,

132

где Е0„ — экстинкция опытной пробы; ЕсТ—экстинкция стандартного раствора; С—концентрация гемиглобинцианида в стандартном растворе, мг%; К—коэффициент разведения крови; 0,01—коэффициент для пересчета в граммы на литр.

При С=61,23 мг% гемиглобинцианида: -|j

''1

Hb=p^-61,23'25i0,01=p^-154 г/л. При С=59.75 мг% гемиглобинцианида:

нь=

Е •59,75-251-0,01 = 1г::-150 г/л.

Таблица 7. Приготовление растворов гемиглобинцианида для построения калибровочного графика

Трансформирующий раствор, мл

Стандартный раствор, мл

Концентрация гемоглобина крови, г/л

«Холостая» проба 50 100 150

§ 56. Подсчет эритроцитов и лейкоцитов в счетной камере

Для подсчета количества форменных элементов в 1 л крови необходимо ее развести. Для разведения берут точно отмеренное количество крови и точно определенное количество разводящей жидкости.

Для разведения эритроцитов применяется 3% раствор хлорида натрия. В тех случаях, когда нельзя произвести подсчет вскоре после взятия крови, для лучшего сохранения эритроцитов пользуются жидкостью Гайема.

Жидкость, разводящая лейкоциты, должна одновременно растворять эритроциты, иначе подсчет лейкоцитов будет невозможен. Этому требованию удовлетворяет 3% раствор уксусной кислоты, который растворяет эритроциты, не повреждая лейкоцитов.

Реактивы: 1) 3% раствор хлорида натрия; 2) 3% раствор уксусной кислоты; 3) жидкость Гайема (0,5 г сулемы, 1 г хлорида натрия, 5 г сульфата натрия, дистиллированная вода до объема 200 мл).

Техника взятия и подготовки крови. В химические пробирки разливают по 4 мл 3% раствора хлорида натрия пипеткой вместимостью 5 мл или из бюретки вместимостью 25

страница 48
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108

Скачать книгу "Клинические лабораторные исследования" (2.84Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
69 фз о такси скачать
банкетка для спальни купить недорого
латексные подушки для ребенка 3 лет
фанкойл кассетный korf стоимость

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(27.03.2017)