натрия; 4) рабочий раствор хлорного золота (к 9 мл дистиллированной воды приливают 1 мл 1% раствора хлорного золота, подогревают до 90— 95° С. Затем добавляют 5 мл 1% раствора цитрата натрия и кипятят до тех пор, пока раствор не примет вишнево-красный цвет. Во время кипячения цвет раствора меняется от синего и фиолетового до красного и вишневого; приготовленный раствор хранят в темном месте при комнатной температуре).

Ход определения. Для постановки реакции посуда должна быть химически чистой. Спинномозговую жидкость исследуют в 11 пробирках. В 1-ю наливают 0,9 мл 0,45% раствора хлорида натрия, в остальные — по 0,5 мл того же раствора. В 1-ю пробирку приливают 0,1 мл спинномозговой жидкости и после перемешивания 0,5 мл смеси переносят во 2-ю пробирку, из 2-й—в 3-ю и т. д. до 10-й. Из 10-й пробирки после перемешивания 0,5 мл смеси удаляют. Таким образом получают ряд последовательных

104

в Красный

1 Нрдсно-фиопе-тоВыа

2 Фиопетобый

3 Красно-синий

4 Синий

5 СВетпо-синий S Бесцветный

се

2 §§?

1

/ /1 1

\ у '3 1

\

\

\ / / /

1

\

\ /

'' /

(г

X

V V 1 1

/

— — — .— — / 4 '

12345В789 ЮП Рис. 30. Графическое изображение реакции Ланге.

разведений спинномозговой жидкости в 10, 20 , 40, 80, 160, 320, 640, 1280, 2560, 5120 раз. В 11-ю пробирку спинномозговую жидкость не добавляют (контрольная проба). Затем во все 11 пробирок приливают по 2,5 мл раствора хлорного золота. Пробирки энергично встряхивают и оставляют на 16—18 ч при комнатной температуре.

Оценка полученных результатов. Практически результаты регистрируют на следующий день после постановки реакции. При нормальной спинномозговой жидкости смесь во всех 11 пробирках остается пурпурно-красной или в одной из первых пробирок становится красно-фиолетовой. В случае патологии цвет жидкости меняется на красно-фиолетовый, красно-синий, голубой и, наконец, полностью обесцвечивается. Результаты отмечают цифрами, указывающими условное изменение цвета в каждой пробирке. 0 — обозначает отсутствие изменений в окраске (пурпурно-красный цвет), 1—красно-фиолетовый цвет, 2 — фиолетовый, 3 — красно-синий, 4—синий и сине-фиолетовый; 5 — светло-синий и голубой, 6 — бесцветный.

Результаты можно изобразить графически (рис. 30). По горизонтальной оси откладывают номера пробирок с разведениями спинномозговой жидкости, а по вертикали — название цвета с соответствующим номером. Точками отмечают изменение цвета в каждой пробирке. Затем все точки соединяют и получают характерные кривые. Различают следующие типы кривых: нормальный, дегенеративный и воспалительный.

В норме график выглядит в виде прямой; цифровое выражение отрицательной реакции будет 00000000000 или 00010000000.

При дегенеративном типе изменения цветов начинают105

ся с 1-й пробирки и более выражены в левой половине кривой. Первые пробирки бесцветны, имеют осадок, в последующих наблюдается переход от голубого через синий и фиолетовый к красному цвету. Дегенеративная кривая будет иметь выражение: 66666543210.

При воспалительном типе изменения цветов более выражены в центре кривой и в правой ее части. В первых пробирках цвет красный, затем, в зависимости от интенсивности воспалительного процесса, он изменяется до синего, голубого или полного обесцвечивания жидкости возвращаясь в конце ряда к красному цвету. Цифровое выражение воспалительной кривой может быть следующим: 00124566530.

Фуксин-сулемовая проба (реакция Таката — Ара). Основана на коагуляции белка спинномозговой жидкости раствором сулемы. При этом изменяется цвет фуксин-сулемовой смеси.

Реактивы: 1) 10% раствор карбоната натрия; 2) 0,2% раствор основного фуксина; 3) 0,02% раствор фуксина (готовят из 0,2% раствора); 4) 0,5% раствор сулемы; 5) фуксин-сулемовая смесь (0,02% раствор фуксина и 0,5% раствор сулемы смешивают в равных объемах; при смешивании сулему следует добавлять к фуксину).

Ход определения. В пробирку наливают 0,5 мл спинномозговой жидкости, добавляют каплю 10% раствора карбоната натрия и 0,15 мл фуксин-сулемовой смеси, перемешивают. Оставляют при комнатной температуре на 24 ч.

Оценка полученных результатов. Результа' реакции может быть трех типов. Первый тип—j отрицательный или нормальный (фиолетовый цвет жидкости не изменяется в течение 24 ч; она остается прозрачной); второй тип — дегенеративный (прибавление реактива вызывает выпадение сине-фиолетового осадка, над ним остается прозрачная жидкость); третий тип воспалительный (розовая окраска смеси с течением време-j ни обесцвечивается, осадок отсутствует).

§ 39. Подсчет форменных элементов в счетной камере

Подсчет форменных элементов в спинномозговой жид! кости необходимо производить сразу же после ее получе! ния, так как они при стоянии в пробирке быстро разруша* ются.

, Для облегчения подсчета лейкоциты подкрашивают, эритроциты разрушают. Подсчет лейкоцитов производят В| счетной камере.

Реактив: 10% раствор уксусной кислоты, подкрашенный метиловым фиолетовым (0,1 г-на 50 мл).