ольникова. Основан на образовании белого кольца при наслаивании исследуемой жидкости на 50% раствор азотной кислоты или на реактив Ларионовой (см. § 8).

Получаемые количества спинномозговой жидкости невелики, поэтому рекомендуется, приступая к определению белка, развести ее в 5 раз. При появлении кольца ранее 3 мин ее разводят в 10—15 раз и т. д. Разводящей жидкостью служит изотонический раствор хлорида натрия.

Фотометрический метод. Белок с сульфосалициловой кислотой дает помутнение, интенсивность которого пропорциональна концентрации белка.

Реактивы. 1) 6% раствор сульфосалициловой кислоты; 2) 14% раствор безводного сульфата натрия; 3) рабочий раствор (свежеприготовленная смесь равных объемов реактивов 1 и 2); 4) 0,9% раствор хлорида натрия; 5) стандартный 1% раствор альбумина для построения калибровочного графика (приготовление реактива и построение графика см. § 8).

Ход определения. В пробирку наливают 5 мл рабочего раствора и 0,5 мл спинномозговой жидкости. Тщательно перемешивают, оставляют на 10 мин при комнатной температуре. Жидкость мутнеет. Нефелометриру-ют на ФЭКе в кювете с толщиной слоя 10 мм против контроля при длине волны 410—480 нм (сине-фиолетовый светофильтр).

Контроль. 0,5 мм спинномозговой жидкости и 5 мл 0,9% хлорида натрия.

Расчет ведут по калибровочному графику.

J02

Л, .

Глобулиновые реакции

Реакция Панди. Основана на осаждении глобулинов спинномозговой жидкости насыщенным раствором карболовой кислоты.

Реактив: насыщенный раствор карболовой кислоты (100 г карболовой кислоты смешивают с 1 л дистиллированной воды, энергично перемешивают и оставляют в термостате при 37° С на 6—10 ч; затем выдерживают 7 дней при комнатной температуре; над осад очную жидкость сливают и используют в качестве реактива).

Ход определения. На часовое стекло, помещенное на черную бумагу, наливают 1—2 капли реактива. По краю стекла или в его центр наслаивают каплю исследуемой спинномозговой жидкости.

Оценка полученных результатов. В случае положительного результата в месте соприкосновения реактива и исследуемой спинномозговой жидкости образуется молочно-белое облачко, переходящее в муть. Степень помутнения выражают, пользуясь цифровыми обозначениями: значительное помутнение—4, умеренное — 3; заметная опалесценция — 2; слабая опалесценция—1, отсутствие помутнения — 0.

Реакция Нонне — Апельта. Основана на свойстве некоторых солей в определенных концентрациях осаждать избирательно глобулины из спинномозговой жидкости.

Реактив: насыщенный раствор сульфата аммония (NH4)2S04 (85 г х.ч. сульфата аммония растворяют в 100 мл кипящей дистиллированной воды; полученный раствор выдерживают 48 ч при комнатной температуре; фильтруют; реактив должен иметь нейтральную реакцию).

Ход определения. В пробирку вносят 0,5 мл спинномозговой жидкости и равный объем насыщенного раствора сульфата аммония. Хорошо перемешивают. В контрольную пробирку равного диаметра наливают 1 мл дистиллированной воды.

Оценка полученных результатов. Регистрация результатов производится не позднее, чем через 3 мин после смешивания спинномозговой жидкости с реактивом. При более поздней регистрации помутнение может произойти и в нормальной спинномозговой жидкости. Оценивая результаты, рядом с опытной нужно держать для сравнения контрольную пробирку с дистиллированной водой и рассматривать их вместе на черном фоне. Степень помутнения выражают, пользуясь цифровыми обозначениями: значительное помутнение—-4; умеренное — 3; заметная опалесценция — 2; слабая опалесценция—1; отсутствие помутнения — 0.

При выполнении глобулиновьгХ проб необходимо соб103

людать точность в выполнении методики, так как появление мути может быть обусловлено осаждением всех белковых фракций спинномозговой жидкости, а не только глобулинов.

Источники ошибок: 1) поздняя регистрация результатов реакции; 2) грязная лабораторная посуда; 3) кислотность или щелочность реактива.

§ 38. Коллоидные реакции

Коллоидные реакции используются для распознавания \ дегенеративных и воспалительных процессов центральной нервной системы и ее оболочек. Дегенеративные (необратимые) изменения мозговой ткани наступают при сифилисе мозга, рассеянном склерозе, опухолях головного и спинного мозга, размягчении его. Изменения воспалительного характера появляются при менингитах различного происхождения.

Коллоидные растворы в присутствии нормальной спинномозговой жидкости не меняют своих свойств. При взаимодействии с патологической спинномозговой жидкостью дисперсность коллоидных растворов изменяется, в результате чего появляется помутнение, образуется осадок или изменяется цвет.

Реакция с хлорным золотом (реакция Ланге). Коллоид- | ный раствор хлорного золота при взаимодействии с патологической спинномозговой жидкостью в присутствии электролитов претерпевает изменение дисперсности. Это проявляется изменением цвета и выпадением осадка.

Реактивы: 1) 0,45% раствор хлорида натрия (4,5 г на ; 1 л дистиллированной воды); 2) 1% раствор хлорида золота; 3) 1% раствор цитрата