и почему?

8. Какие изменения пигментов мочи отмечают в начале инфекционного гепатита?

9. Как изменяется общий билирубин и его фракции при паренхиматозной желтухе в разгар заболевания?

10. Каков цвет мочи и какими пигментами он обусловлен при паренхиматозной желтухе в разгар заболевания?

11. Каков цвет кала и содержание в нем пигментов при этом заболевании?

12. Каковы изменения в содержании пигментов крови, мочи и кала при гемолитических процессах?

276

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

§ 133. Определение билирубина в сыворотке крови1

При взаимодействии сульфаниловой кислоты с нитритом натрия образуется диазофенилсульфоновая кислота (диазосмесь), которая дает со связанным (прямым) билирубином сыворотки розово-фиолетовое окрашивание. По его интенсивности судят о концентрации связанного билирубина, дающего прямую реакцию. При добавлении к сыворотке крови кофеинового реактива несвязанный (непрямой) билирубин переходит в растворимое диссоциированное состояние и также дает розово-фиолетовое окрашивание с диазосмесью одновременно с прямым билирубином. По интенсивности окраски, образующейся после добавления кофеинового реактива, определяют концентрацию общего билирубина. По разнице между общим и связанным (прямым) билирубином находят содержание несвязанного (непрямого) билирубина.

Реактивы: 1) кофеиновый реактив (5 г ч. кофеина, 7,5 г бензоата натрия, 12,5 г ацетата натрия CH3COONa растворяют в 90 мл дистиллированной воды, нагревают до 50—60° С и хорошо перемешивают; после охлаждения доводят дистиллированной водой до объема 100 мл); срок хранения 2 нед;

2) 0,9% раствор хлорида натрия;

3) диазосмесь: а) диазореактив I (5 г сульфаниловой

кислоты растворяют при нагревании в 300—400 мл дистиллированной воды до полного растворения, прибавляют

15 мл концентрированной хлористоводородной кислоты с

относительной плотностью 1,19; после охлаждения объем

раствора доводят до 1 л дистиллированной водой); реактив

стоек; хранят в посуде из темного стекла; б) диазореактив

II (0,5% раствор нитрита натрия NaN03); реактив нестойкий; хранят в посуде из темного стекла около 2—3 нед;

желтый оттенок—признак непригодности реактива; в) диазосмесь. готовят перед работой, смешивая 10 мл диазореактива I и 0,3 мл диазореактива II.

Ход определения. В 3 пробирки (для общего билирубина, прямого и для контроля) вводят реактивы в порядке, указанном в табл. 15.

Для определения прямого билирубина в пробе измерения на ФЭКе производят спустя 5—10 мин после добавления диазосмеси, так как при более длительном стоянии в реакцию вступает непрямой билирубин.

При определении общего билирубина пробу оставляют

Метод Иендрашика.

277

Таблица 15. Схема определения билирубина в сыворотке крови s

Билирубин |

Ингредиенты, мя —^————^—— Коигрояь

общий связанный (прямой) ^ЖявмМ

Сыворотка 0,50 0,50 0,50

Кофеиновый реактив 1,75 — 1,75.

0,9% раствор NaCl — 1,75 0,25

Диазосмесь 0,25 0,25 —

стоять 20 мин. При дальнейшем стоянии окраска не НИ

изменяется. НИ

Контроль на мутность сыворотки ставят для каждого НИ

опыта. ^HJ

Измерение экстинкции производят на ФЭКе при зеле- НИ ном светофильтре (500—560 им) против воды в кювете с НИ толщиной слоя 5 мм. Из показателей общего и прямого НИ билирубина вычитают показатель контроля. Расчет произ- ! водят по калибровочному графику. Находят содержание j общего и прямого билирубина. Для определения непрямо- j го билирубина из общего вычитают прямой билирубин. _ J

Построение калибровочного графика удобно произво-иИ

дить с помощью набора «Билирубин-эталон» (фирма НИ

«Лахема», ЧССР). Набор содержит лиофилизированный ??

(сухой) билирубин, альбумин и инструкцию по построению ЯН

графика. НИ

Результаты выражают в миллиграммах на литр; для

этого концентрацию билирубина, найденную по графику, ИИ

умножают на 2000, так как для исследования было взято НИ

0,5 мл сыворотки. Коэффициент пересчета в единицы СИ НИ

(мкмоль/л) равен 1,7104. В норме содержание общего ИИ

билирубина 8,5—20,5 мкмоль/л. НИ

Глава VII НИ

ВОДНО-СОЛЕВОЙ ОБМЕН Н

ПОКАЗАТЕЛИ, ХАРАКТЕРИЗУЮЩИЕ СОСТОЯНИЕ HI

ВОДНО-СОЛЕВОГО ОБМЕНА НЯ

§ 134. Роль воды и минеральных веществ НЯ

в организме НИ

Вода вместе с растворенными в ней органическими и НИ

минеральными веществами составляет среду, в которой ИИ

осуществляются биохимические процессы, обеспечива-^П

ющие жизнедеятельность организма. Способность орга-^И

низма к поддержанию постоянства и единства внутреннейИИ

среды (гомеостаз) представляет собой одно из наиболееИИ

существенных достижений эволюции. НИ

278 ЯН

п

Являясь универсальным растворителем для многих соединений и транспортируя их, вода обеспечивает связь всех органов и систем. Ее количество составляет 60—65% от массы тела. Большая часть воды входит в состав внутриклеточных жидкостей. Внеклеточная вода содержится в межклеточной и внутрисосудистой жидкостях. В то же время вода находится в свободном и связанном состоянии.

Значительная ее часть связана, гла