химический каталог




Химия природных соединений (углеводы, нуклеотиды, стероиды, белки)

Автор Н.К.Кочетков, И.В.Торгов, М.М.Ботвиник

спадались бы избирательно. В этом отношении самым многообещающим является ферментативный гидролиз. В распоряжении исследователей имеется большой набор протеолипгических ферментов, гидро-лизующих пептидные связи избирательно.

Ферментативный гидролиз проходит в мягких условиях и не сопровождается вторичным распадом аминокислот. К числу недостатков этого метода можно отнести возможный вторичный синтез пептидов.

Наиболее специфичным из ферментов является трипсин. Он расщепляет только пептидные связи, образованные карбоксилом аргинина и лизина. Его действие можно еще более ограничить, если динитрофени-лировать Е-аминную группу лизина. Химотрипсин расщепляет связи, образованные ароматическими аминокислотами. Недавно было обнаружено, что он гидролизует и лейциновые пептиды. Менее специфичны папаин, пепсин и субтилизин. Последний позволяет, однако, получать смесь низкомолекулярных пептидов, что часто оказывается удобным при исследованиях.

Частичный гидролиз белка является самым несовершенным звеном в определении строения молекулы белка. Как уже отмечалось выше, кислотный гидролиз может привести к образованию вторичных продуктов распада, а ферментативный — вызвать вторичный синтез пептидов. Более совершенными были бы методы, позволяющие устанавливать строение белка без предварительного гидролиза. К таким методам относятся упомянутое выше последовательное отщепление аминокислотных остатков.

Н. И. Гаврилов предложил проводить электровосстановление белка. Им и Т. И. Орловой было показано на моделях, что пептидная связь восстанавливается только в том случае, если она образована проли-ном. Связанная с пролином аминокислота превращается в аминоспирт, который можно выделить после гидролиза остальной пептидной цепи.

—CONHCH(R)—СО ?

. NHCH(R)—СО—N

. . . NHCH(R)CH2OH +

В результате частичного гидролиза белка образуется сложная смесь пептидов. Она значительно сложнее, чем гндролизат, состоящий из одних аминокислот, как по количеству возможного числа обломков,

Схема

фракционированного разделения смеси пептидов, полученных

из химотрипсиногена

Частичный гидролнзат

Пятикамерный электрофорез ^

/ \

Основные пептиды

Нейтральные пептиды

Кислые пептиды

\

Многокамерный электрофорез

Ионит Дауэкс-50

Окисление НС03Н

Электрофорез на бумаге

I

Пятикамерный электрофорез \

Хроматография на бумаге

\

\

\

Хроматография на бумаге

Нейтральные пептиды

\

Хроматография на бумаге

Индивидуальные пептиды

Схема

определении строения молекулы белка

Белок

I

определение числа пептидных цепей

I i

определение аминокислотного состава> нсооон

раскрытие S — S-мостиков

* частичный гндпрлиз

гндролизат, смесь пептидов

* разделение на фракции

фракции пептндов1

определение аминокислотного состава

i

определение последовательности ам инокисл отных остатков

воссоздание пептидной цепи

Т Я Е

3 = 5

Пептиды из

кислотных

Выведенная из них последовательность

Пептиды, полученные под действием пепсина

Пептиды, полученные под действием химотрипсина

Пептиды, полученные

под действием

тр .1 псина

Структура фенил -аланиновой цепи окисленного инсулина

гидролазотов

так и по их составу. Неудивительно поэтому, что до создания новых методов исследования— до 1942 г. число выделенных и идентифицированных пептидов было очень мало.

Для предварительного разделения пептидов на фракции часто применяют так называемый четырех- или пятикамерный электрофорез. Он позволяет отделить основные, кислые н нейтральные пептиды друг от друга. Каждую из фракций можно подвергнуть затем разделению яри помощи ионообменной хроматографии, микропрепаративным электрофорезом на бумаге или противоточным распределением, ограничиваясь при этом несколькими миллиграммами вещества. В качестве примера представлена схема разделения химотрипсиногена, проведенная Шор-мом с сотрудниками (см. схему на стр. 537). Прекрасные результаты дает метод Хирса, Мура и Штейна— автоматическое разделение пептидов на смоле Дауэкс-50. Строение пептидов, полученных в результате разделения, устанавливают^описаиными выше методами.

На схеме (стр. 517) представлен современный метод установления строения белка.

Сопоставляя затем найденные пептиды, исследователь воссоздает рисунок строения изучаемого белка. Пример такой реконструкции представлен на рис. 7 для фенилаланиновой цепи инсулина.

ЛИТЕРАТУРА

Кнунянц И. Л., Первова Е.Я."^интез пептидов. Усп хим., 1955, 24, 641. Ф рут он И. Синтез пептидов. В сб. Химия белка, т. 2. ИЛ, 1952, стр. 186 Bam ford С, Elliott A., Hanby W. Synthetic Polypeptides. London, 1956 Bergmann M., M i с k e 1 e у A Umlagerung peptidahnlicher Sfoffe. Z. Physiol Chem , 1924, 140, 128.

Brenner Al, Hartmann A Peptide der Hydroxyaminosauren; spezielle Probieme. Proceedings of the Symposium of Methods of Peptide Synthesis. Coll. of Czechoslov. Chem. Comm., 1958, 24, 126.

Goodman M., Ken пег G.W. The Synthesis of peptides. Advances in Protein Chemistry, 1957, 12, 465.

Proceedings of t

страница 183
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201

Скачать книгу "Химия природных соединений (углеводы, нуклеотиды, стероиды, белки)" (5.87Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
печатные сми
м домодедовская вытягивания вмятин
купить стол на кухню деревянный со стеклом
домашние кинотеатры 7 2

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(21.08.2017)