химический каталог




Химия природных соединений (углеводы, нуклеотиды, стероиды, белки)

Автор Н.К.Кочетков, И.В.Торгов, М.М.Ботвиник

ате аминогруппа заменяется гидроксильной или карбонильной и: после гидролиза пептида и разделения аминокислот на хроматограмме одна аминокислота исчезает.

NH,-CH(R)—СО—NHC^(R')-CO . . . -f-HN02 ? HOCH(R)—СО—NH—CH(R')CO - . .

Ряд методов определения N-концевых аминокислот основан на алки-лировании или ацилировании пептида и последующем гидролизе. В гидролизате концевая аминокислота обнаруживается в виде алкиль-ного или ацильного производного. Наиболее важным и детально разработанным методом является метод динитрофенилирования белка, предложенный в 1945 г. Зангером и использованный им при установлении строения инсулина.

Пептид (или белок) обрабатывают 2,4-динитрофторбензолом в слабо щелочной среде (рН 9) при 20—25°. Образующиеся 2,4-динитрофе-нильные производные не распадаются во время кислотного гидролиз»

пептидов и белков (исключение составляют динитрофенильные производные глицина, цистина, пролина и триптофана). Динитрофенильные производные аминокислот представляют собою кристаллические соединения, окрашенные в желтый цвет. Вследствие оттягивания электронов динитрофенилированным бензольным кольцом они обладают ясно выраженными кислыми свойствами, легко разделяются электрофорезом и хроматографией и определяются спектрофотометрически.

Инграм предложил использовать для определения концевых амин-ных групп реакцию восстановительного метилирования по Бауману. При действии на пептиды формальдегидом и одновременном восстановлении над палладием образуются N-диметильные производные пептидов, гидролизующиеся до диметиламинокислоты и аминокислот.

R— СН—СО— NH—CH(R')—CONHCH(R")CO . .. +H2/Pd-f НСОН »

I

NHS н2о,нR-CH-CONHCH(R')-CONHCH(R")CO ... »

N(CH3)2

R-CH—COOH-f-R —CH—COOH . ..

I I

N(CH3)a NH2

Диметиламинокислоты не реагируют с нингидрином и их проявляют орцином, тимоловым синим и т. д.

Вследствие тенденции метильных групп к подаче электронов заряд на азоте диметиламинокислот несколько повышен, амфотерные свойства их выражены столь же ярко, как и у самих аминокислот. Разделение их методами электрофореза и хроматографией менее четко, чем разделение динитрофенильных производных аминокислот. Диметильные производные аминокислот не имеют широкого применения при исследованиях строения пептидов.

Метод ацилирования белков, широко применявшийся в начале столетия, сейчас потерял свое значение, так как большинство ацильных производных гидролизуются аналогично пептидной связи. Исключение составляет остаток я-иодбензолсульфокиелоты (пипсил), который связывается с аминогруппой прочнее, чем динитрофенильный остаток. .Обычно применяют пипсилхлорид, содержащий иод 135.

J135 У Ч_S02C1+NH2CH(R)C0NHCH(R')C0 ... —»

^ jU5_y ^-S03NHCH(R)CONH-CH(R')CO . . .

Пипсиламинокислоты можно отделить хроматографически, противоточ-ным распределением или определить, пользуясь радиохроматограммой. Пипсильную защиту полезно применять в тех случаях, когда N-конце-вым остатком являются глицин, цистин, пролин или триптофан.

Ряд методов основан на получении таких производных пептидов, которые в кислой среде распадаются с образованием циклических соединений, отщепляющихся от пептида. К ним относятся изоцианатные, тиоизоцианатные, карбаминовые и аналогичные производные. Наиболее важным из этих реактивов является фенилизоцианат и фенилизотиоциа-нат, использовать который предложил Эдман. При действии на пептид, например, фенилизотиоцианата в щелочной среде образуется фенил-изотиоциановое производное.

C6H5NCS+NH2CH(R)CONHCH(R')CO . °—-» CeH6NHCSNHCH(R)CONHCH(R')CO . ..

При осторожном нагревании с НО в нитрометане оно циклизуется с распадом на фенилтиогидантоин и пептид.

if

R—СН—СО—NCH(R')CO ... н" R—СН—СО

| | \ +NH2—CH(R')CO. .

NH NHC6H5 HN NC6H5

который извлекают в органический растворитель и определяют как таковой или гидролизуют до аминокислоты.

Оставшийся пептид можно подвергнуть вторичной обработке фе-нилизотиоцианатом и отщепить следующий аминокислотный остаток. Таким образом, этот метод пригоден также и для установления последовательности аминокислотных остатков в пептидах. Френкель-Конрат видоизменил метод для микроопределения аминокислотных остатков в виде фенилтиогидантоинов на бумаге и определил с его помощью первые 8 аминокислот в кортикотрошине.

Остальные приведенные ниже методы, основанные на образовании циклических производных, имеют ограниченное значение.

а. Пептид обрабатывают сероуглеродом и получают дитиокарбаминовое производное (I), которое в кислой среде при комнатной температуре расщепляется на 2-тио-5-тиазолидон и пептид. Тиазолидон (II)

можно извлечь органическим растворителем.

он' н*

CS2+NHaCH(R)CONHCH(R)CO . . . »HSCS—NH—CH(R)CONHCH(R)CO . . . R—CH—CO I

j ^S+NH2-CH(R)CO . . .

NH—CS II

б. При реакции пептида с эфиром ацилтиокарбаминовой кислоты (I)

получают N-ацилтиокарбаминовое производное пептида (II); оно распадается в кислой среде на тиогидантоин и пептид, содержащий, также ка

страница 180
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201

Скачать книгу "Химия природных соединений (углеводы, нуклеотиды, стероиды, белки)" (5.87Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
прием венеролога на краснопресненской
http://taxiru.ru/fotootchet_forum_taksi/
заказать автомобиль на 3 часа
как научится читать чертежи вентиляции

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(20.10.2017)