химический каталог




Химия природных соединений (углеводы, нуклеотиды, стероиды, белки)

Автор Н.К.Кочетков, И.В.Торгов, М.М.Ботвиник

ии белка.

Принцип распределительной хроматографии основан на различии в коэффициентах распределения аминокислот между водой и органическим растворителем. Особенность метода распределительной хроматографии на бумаге по сравнению с обычной экстракцией ам.инокислот из водного раствора органическим растворителем заключается в том, что одну из )фаз, чаще всего водную, помещают на какой-нибудь инертный твердый носитель, а органический растворитель — подвижная фаза,—проходя через первую, извлекает и распределяет аминокислоты на бумаге в соответствии с их (Коэффициентами распределения. Положение аминокислот на бумаге определяют по отношению скорости движения аминокислоты к скорости движения фронта растворителя и обозначают Rf. Величина Rf зависит в первую очередь от строения аминокислоты, затем от системы растворителей, рН среды и сорта бумаги. Чем полярнее аминокислота, тем меньше она растворяется в органических растворителях и тем меньше ее Rf. Увеличение длины углеродной цепи повышает п . Введение в молекулу полярных групп," например, гидроксильной, аминной или карбоксильной понижает Rf Так, Rf фенилаланина в системе фенол/вода = 0,85, а тирозина 0,51. Другие примеры изменения Rf в зависимости от строения аминокислоты представлены на рис. 3 и 4. Подбирая соответствующие смеси растворителей, можно провести достаточно тонкое разделение аминокислот. Наиболее часто пользуются для такого разделения системами: вода — фенол — аммиак; вода—^бутанол — уксусная кислота; бута-нол — аммиак — коллидин и т. д. Разделение можно проводить на одномерной или двумерной хроматограммах. Можно пользоваться также различными типами распределительной хроматографии на бумаге — нисходящей, восходящей и радиальной. Величины Rf для каждой из систем растворителей оказываются постоянными при соблюдении

постоянных условий хроматографирования. На рис. 4 приводится карта распределения аминокислот при двумерной хроматограмме. Проявле иие аминокислот проводят чаще всего обработкой хроматограммы раствором нингидрина. Большинство аминокислот окрашивается при этом в фиолетовый цвет разного оттенка. Пролин образует пятно желтого цвета. Аминокислоты, содержащие другие группы, кроме аминной и карбоксильной, можно обнаружить пользуясь специфическими красочными реакциями, описанными ранее. Количественное определение аминокислот можно проводить непосредственно на бумаге и определять содержание ам.инокислоты по интенсивности окраски, или фотометрии пятна. Лучшие результаты получают вымыванием аминокислоты и колориметрированием полученного раствора после обработки его нингидрином. Для этого проводят несколько хроматографических разделений смеси аминокислот, одну из хроматограмм проявляют, определяя таким путем положение аминокислот на хроматограмме. Можно также просматривать некоторые аминокислоты в ультрафиолетовом свете.

Важное изменение в хроматографирование аминокислот внесли Штейн и Мур, которые предложили проводить разделение аминокислот на колонке, заполненной бумажным порошком или крахмалом. Через колонку пропускают сначала раствор аминокислот, а затем разделяют их вымыванием смесью растворителей, собирая раствор с помощью специального автоматического коллектора в серию пробирок. Затем колориметрируют растворы с нингидрином. Этот метод оказался особенно удобным для тонкого разделения аминокислот, а

0,8

V u °[8 V °TB Y FFTҐ У °;Z V

0,8

Фенол-HW-,< :

0.7

0,7

0.6

ИЗОЛ • ФАЛ

O.B

0,5

Ш МЕТ \ТРЦП

«•3 1С

<_>

t

ГС

»

ГС

0.5

ОМ

03

• ТИР

ЩПРОЛ О АЛА

OM

0,3

O,Z

*ТРЕ MI ЛИТ

,ОКСИПРАД

0.2

шарг

O,Fф# о окси лаз асп\\\\г

О ЧИСТ ЕЙН -SCUH

4* 4* 4?O\SOJ ОМ ^2 5у

Рис 4. Карта распределения аминокислот на двумерной хроматограмме

также для разделения аминокислот в препаративных целях. Особенно продуктивно проведение такого определения, если воспользоваться для этого ионообменными смолами.

Разделение аминокислот на ионообменниках основано на способности аминокислот образовывать соли с кислотами и щелочами. Подбирая соответствующие катиониты или аниониты, можно быстро и с успехом разделить гидролизат белка, пользуясь для этого 2,5—3,5 мг белка. Ионообменную хроматографию хорошо сочетать с элюционным или вытеснительным анализом. Мур и Штейн пользуются для этого катионитной смолой сульфополистирольного типа Дауэкс-50, через колонку которого пропускают аминокислоты; последние вымывают затем соответствующими буферными растворами. Для разделения достаточно 3 мг аминокислот.

Ионофоретический метод разделения аминокислот также базируется на их амфотерности. При различных рН раствора аминокислоты движутся к катоду или аноду, в соответствии с их изоэлектрическими точками и электрофоретической подвижностью Так при рН, близком к 6, кислые аминокислоты направляются к аноду, основные к катоду, а нейтральные остаются неподвижными. Ионофорез также можно проводить в растворе или на твердом носителе. Первый метод позволяет разделять аминокислоты только на с

страница 169
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201

Скачать книгу "Химия природных соединений (углеводы, нуклеотиды, стероиды, белки)" (5.87Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
предупреждающие наклейки на шлагбаум
мурманск отель сочи
гофра глушителя фокус 2 1 6
http://taxi-stolica.ru/opisanie-uslug/taxi-na-svadbu/

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(14.12.2017)