химический каталог




Лабораторная техника органической химии

Автор Б.Кейл

у для упаривания используют микростаканчики, получаемые отрезанием нижних концов ампул или маленьких пробирок с последующим запаиванием. Отдельные капли можно упаривать в лунках на пластинке из плексигласа, имеющей углубления, или на полиэтиленовой фольге (рис. 443) [40]. Пластинку с образцами помещают в эксикатор. Нанесенные на такую пластинку водные растворы упаривают в вакууме в течение 1—2 час.

8.4. Простые химические реакции

Несмотря на то что количества веществ, разделяемых на бумажной хроматограмме, обычно не превышают нескольких микрограммов, их можно подвергнуть некоторым химическим превращениям, позволяющим более точно идентифицировать отдельные пятна. Автор ограничивается приведением примеров из химии аминокислот и пептидов, хотя аналогичные принципы можно применять и к другим веществам, для разделения которых используют хроматографию на бумаге.

Предположим, что перед нами поставлена следующая задача:

1) разделить смесь дипептидов;

2) установить, представляют ли собой разделенные пятна индивидуальные химические вещества или смеси;

3) определить, из каких аминокислот состоят эти дипептиды;

4) определить последовательность аминокислот в каждом пептиде;

5) доказать конфигурацию аминокислот.

До разработки современных методов распределительной хроматографии такая задача могла быть решена лишь с большой затратой времени и труда и значительного количества изучаемых веществ (от 10 до 100 г). В настоящее время такую задачу можно решить без особых затруднений с количеством вещества, не превышающим 10 мг.

Первая часть поставленной задачи самая трудная. Нужно подобрать такой метод хроматографии на бумаге, который бы обеспечил оптимальное разделение смеси дипептидов. Наибольшие возможности дает двумерная хроматография с обнаружением нингидрином [40], орцином [117] или хлорированием [126]. Для этого проявляют параллельно две хроматограммы: одну используют для обнаружения, другую — для выделения пептидов. Элюаты упаривают на пластинке из органического стекла.

Небольшую часть каждого из остатков, полученных после упаривания, растворяют в дистиллированной воде и наносят на новую хроматограмму с другой системой растворителей или на несколько хроматограмм с различными растворителями. Если каждая из первоначально выделенных зон и в этих системах дает только одно пятно, то индивидуальность соответствующего дипептида можно считать доказанной.

Другую часть остатка, полученного после упаривания на пластинке, растворяют в нескольких микролитрах 6 н. соляной кислоты и всасывают раствор в толстостенный капилляр. Капилляр заплавляют на обоих концах, помещают в термостат и нагревают 16 час при 100°. После охлаждения капилляр вскрывают и раствор гидролизата переносят в микростаканчик. Вакуумированием в эксикаторе над едким кали упаривают образцы досуха. Остаток растворяют в нескольких микролитрах дистиллированной воды и избыток хлористого водорода удаляют повторным упариванием над щелочью. После растворения полученного остатка в воде раствор наносят на бумагу и хроматографированием определяют, из каких аминокислот состоит дипептид.

Для определения последовательности аминокислот в дипептиде можно воспользоваться одним из нижеописанных способов.

Часть выделенного индивидуального дипептида растворяют в разбавленной соляной кислоте и полученную каплю подвергают действию нитрозных газов в течение 10 мин при 37° [40]. Свободная аминогруппа аминокислоты, карбоксил которой амидно связан в молекуле дипептида, под влиянием нитрозных газов замещается на гидроксил. После упаривания реакционной смеси, гидролиза остатка 6 н. соляной кислотой в капилляре и упаривания гидролизат хроматографированием на бумаге можно разделить на оксикислоту и аминокислоту. Нингидрин обнаружит присущ ствие только той аминокислоты, которая была связана в пептиде своей аминогруппой.

По другому способу на свободную аминогруппу в дипептиде действуют динитрофторбензолом [127] (см. также стр. 473), а полученное производное гидролизуют способом, описанным выше. Остаток гидролизата после упаривания на бумажной хроматограммедает пятно аминокислоты, которая была связана в дипептиде своей аминогруппой, и пятно динитрофенильного производного аминокислоты, которая была связана в дипептиде карбоксильной группой. Существует еще несколько аналогичных способов,позволяющих найти последовательность аминокислот в молекулах пептидов с применением хроматографии на бумаге.

Последним пунктом нашей задачи было установление конфигураций аминокислот. Этот вопрос можно решить при помощи ферментативного расщепления. Смесь аминокислот подвергают действию раствора оксидазы D-аминокислот в термостате при 37°. Фермент расщепляет только D-ами-нокислоты, в то время как L-формы остаются без изменения. Сравнивая хроматограммы первоначальной смеси с хроматограммой той же смеси после действия фермента, можно однозначно определить конфигурацию аминокислот [80].

9. ПРИМЕРЫ ПРИМЕНЕНИЯ РАСПРЕДЕЛИТЕЛЬНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

В настоящее время практически невозможно дать исче

страница 212
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266 267 268 269 270 271 272 273 274 275 276 277 278 279 280 281 282 283 284 285 286 287 288 289 290 291 292 293 294 295 296 297 298 299 300 301 302 303 304 305 306 307 308 309 310 311 312 313 314 315 316 317 318 319 320 321 322 323 324 325 326 327 328 329 330 331 332 333 334 335 336 337 338 339 340 341 342 343

Скачать книгу "Лабораторная техника органической химии" (8Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
гироскутер smart avatar купить
управления приводами белимо
проектор 15000 люмен аренда
светвые панели авито крым

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(25.06.2017)