химический каталог




Лабораторная техника органической химии

Автор Б.Кейл

роявленную хроматограмму смачивают раствором реактива в растворителе, не смывающем пятна с бумаги. Так, например, аминокислоты лучше всего обнаруживать, погружая лист бумаги в раствор

нингидрина в безводном ацетоне. Если же использование такой простой методики по тем или иным причинам не представляется возможным, то раствор реактива наносят на хроматограмму в виде мелкодисперсного тумана. Существует ряд специальных пульверизаторов, разбрызгивающих раствор при помощи сжатого воздуха (рис. 432).

Реактивы для разбрызгивания целесообразно растворять не в воде, а в органических растворителях. Водные растворы часто придают хромато-грамме «рябой» вид, что затрудняет обнаружение веществ, присутствующих в виде следов. Это иногда удается устранить добавлением к водному раствору реактива нескольких процентов летучего растворителя. Правильное обрызгивание бумаги требует навыка. Бумага должна намокнуть равномерно с обеих сторон и стать прозрачной. Раствор реактива не должен образовывать на бумаге «луж», так как при этом размываются контуры пятен.

Иногда можно комбинировать несколько методов обнаружения на одной хроматограмме и получить таким образом информацию одновременно о нескольких классах веществ. В качестве примера рассмотрим случай расшифровки двумерной хроматограммы гидролизата фермента (молекула которого построена из нескольких а-аминокислот и одной N-диметиламинокислоты) с простатической группой, обладающей характеристической флуоресценцией в ультрафиолетовом свете.

.Рис. 432. ПульвеРассмотрение двумерной хроматограммы в ультрафиолето- пизатоо

вом свете дает возможность по флуоресценции определить положение пятна, отвечающего простетической группе (рис. 433, а).

Затем бумагу смачивают спиртовым раствором орцина, к которому добавлена разбавленная серная кислота, и нагревают ее. Серная кислота разлагает целлюлозу бумаги, а орцин взаимодействует с продуктами гидролиза. Бумага окраши'^(УУЛУ/У/

оУуУ

уУуЛУуУ

•,М/,,У'У,,,У,УЛ

УУ'У/УУ

V/3'УУ, '<У/ Уу/ / / УлуулУ/ууу, У\

УууУ0УУУУУ'уА

УУ^У^У/ЖУ/л2L

Ъ'У&У'УУУуУ

в

Рис. 433. Комбинированное обнаружение веществ на двумерной

хроматограмме.

а — в ультрафиолетовом свете; б — при помощи орцина и серной кислоты; в — прн помощи нингидрниа (темные пятна) —а-аминокислоты; белые пятна — ш-аминокнс-лоты; заштрихованные пятиа — флуоресценция).

вается равномерно в коричневый цвет. Только в местах, где находятся пятиа каких-либо буферных веществ, т. е. всех биполярных соединений, гидролиза целлюлозы не происходит [116]. Поэтому в таких местах бумага останется бесцветной (рис. 433, б). 1 ем самым определяется положение пятен всех аминокислот. Если затем эту хромато-гРамму обработать нингидрином и нагреть, то нингидрин со всеми присутствующими а~аминокислотами образует интенсивное фиолетовое окрашивание (рис. 433, в), в то вРемя как пятно N-диметиламинокислоты ие окрасится.

Чувствительность методов обнаружения, основанных на получении окрашенных пятен, в большинстве случаев значительна. Для открытия ряда веществ достаточны количества порядка нескольких микрограмм. Еще большей чувствительностью обладают методы, основанные на измерении радиоактивности [88].

Очень элегантный метод был разработан для обнаружения веществ, которые тормозят или, наоборот, стимулируют рост микроорганизмов. Хроматограмму с невидимыми пятнами прикладывают к агаровой плите, содержащей среды с привитыми микроорганизмами, и оставляют на некоторое время. В местах, где на хроматограмме присутствуют вещества, стимулирующие рост, возникают непросвечивающие пятна, образованные колонией растущих микробов; в тех местах, где находятся вещества, тормозящие рост (антибиотики и т. д.), наоборот, возникает пятно чистого агара на затемненном фоне.

7. ТЕХНИКА РАСПРЕДЕЛИТЕЛЬНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

7.1. Колонки с силикагелем

Порошкообразный силикагель для распределительной хроматографии приготовляют обработкой разбавленного жидкого стекла соляной кислотой. Можно пользоваться либо продажным препаратом, либо силикагелем, приготовленным в лаборатории. Активность каждой новой партии силикагеля следует проверять при помощи какого-нибудь окрашенного стандартного вещества.

Сырьем для получения силикагеля служит обычное жидкое стекло. Его разбавляют так, чтобы плотность раствора была 1,19, помещают в толстостенный сосуд и охлаждают до 5° на ледяной бане. При интенсивном перемешивании приливают порциями концентрированную соляную кислоту так, чтобы температура не превышала 5°. Выделившаяся кремневая кислота образует сначала жидкую, затем густую массу, и перемешивание все затрудняется. Все сгустки следуеттщательно размешать.При последующем приливании соляной кислоты вся масса постепенно опять разжижается. После достижения кислой реакции (по тимоловой сини) перемешивание продолжают, и через некоторое время кислая реакция опять исчезает. Добавляя соляную кислоту небольшими порциями, добиваются устойчивой кислой реакции. Вплоть до этой стадии температуру нужно постоянно удерживать на уров

страница 205
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266 267 268 269 270 271 272 273 274 275 276 277 278 279 280 281 282 283 284 285 286 287 288 289 290 291 292 293 294 295 296 297 298 299 300 301 302 303 304 305 306 307 308 309 310 311 312 313 314 315 316 317 318 319 320 321 322 323 324 325 326 327 328 329 330 331 332 333 334 335 336 337 338 339 340 341 342 343

Скачать книгу "Лабораторная техника органической химии" (8Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
купить керамическую посуду в москве
курсы по access дистанционный
профессиональные сковороды для ресторанов
sophie elli москва 2017

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)