химический каталог




Лабораторная техника органической химии

Автор Б.Кейл

подвижной фазой. Другим затруднением является смещение точки перехода индикатора, вызванное его адсорбцией на носителе. Поэтому вместо метилового оранжевого были предложены некоторые природные [50] и синтетические красители [99].

Если целью опыта является определение значений R и нет необходимости в выделении разделяемых веществ, то обнаружить зоны на столбике можно при помощи любой цветной реакции. Так, полосы аминокислот на колонке с крахмалом можно обнаружить, смочив столбик эфирным раствором нингидрина с последующим нагреванием всей колонки. При этом зоны аминокислот проявляются в виде интенсивных фиолетовых полос [133].

2. Существует несколько способов регистрации веществ в момент

их выхода из колонки. Для веществ кислого характера можно использовать цветную реакцию с индикатором. Для этого в элюат, вытекающий

из колонки, помещают капилляр, через который тонкой струйкой подается

раствор индикатора [78]. Имеются и более эффективные методы, не вызывающие загрязнения элюата. Например, элюат по выходе из колонки

направляют в микрокювету, где его непрерывно анализируют потенцио11.5 75,5

метрическим [83], рефрактометрическим или интерферометрическим методами [74]. Однако чувствительность измерения в этом случае примерно в 100—200 раз ниже, чем чувствительность колориметрического метода

Рис. 431. Запись выхода веществ из хроматографической

колонки.

а — разделение аминокислот на колонке с крахмалом (колориметрия с нингидрииом); б — разделение компонентов нуклеиновых кислот (спектрофотометрня в ультрафиолетовой области). 1 — лейцин + изолейцин; 2 — феннлалаиин; 3 — валин; 4 —тирозин + -f- метионни; 5 — пролии; 6 — аланин -}- глутамнновая кислота; 7 — треонин; S — аспарагиновая кислота; 9 — сернн; 10 — глицин; — аммиак; 12 —^'аргинин; 13 — лизин; 14 — гистидин; 15 — цистин; 16 — тимни; П —„урацил; 18 — цитозин; 19 — аденнн; 20 — гуаиин; 21 — гипоксантнн.

обнаружения при помощи нингидрина. Описан также метод обнаружения, основанный на измерении диэлектрических проницаемостей хромато-графируемых веществ [93].

3. Наиболее распространенный метод контроля заключается в отборе точно отмеренных фракций фильтрата с последующим анализом каждой пробы. В подавляющем большинстве случаев анализ проводят одним из следующих методов:

A. Прямым взвешиванием остатка после упаривания (только для

больших препаративных колонок).

Б. Ацидометрическим или алкалиметрическим титрованием.

B. Спектрофотометрированием в ультрафиолетовой области.

Г. Колориметрированием (в большинстве случаев сопровождается разрушением разделяемых веществ). Д. Биологическими испытаниями. Е. Полярографией.

Ж. Поляриметрией, рефрактометрией, интерферометрией.

3. Измерением радиоактивности (если в разделяемые вещества введены радиоактивные метки).

И. Концентрированием части фильтрата с последующим хроматогра-фированием на бумаге или электрофорезом на бумаге (один из лучших методов).

К. Химическими превращениями с последующим исследованием продуктов реакции (например, гидролиз пептидов, полисахаридов и т. д. и хроматографирование продуктов гидролиза на бумаге) *.

Поскольку расстояния между зонами хроматографируемых веществ часто очень невелики, эффективность разделения тем выше, чем меньше отбираемые объемы элюата. При таком тонком фракционировании иногда приходится анализировать колориметрически несколько сот фракций. Графически такое разделение изображено на рис. 431.

6.2. Обнаружение при хроматографировании на бумаге

Обнаружение веществ на бумажных хроматограммах можно осуществить двумя способами. По первому способу хроматограмму после проявления разрезают на поперечные полосы и каждую из полос анализируют отдельно (см. стр. 477). По второму способу пятна веществ обнаруживают обработкой всей хроматограммы. Последний способ более употребителен.

Окрашенные вещества в большинстве случаев можно обнаружить на хроматограмме визуально. Если эти вещества присутствуют в виде следов и при нормальном освещении плохо заметны, то их в некоторых случаях удается обнаружить при освещении ультрафиолетовой лампой. В ультрафиолетовом свете ряд бесцветных веществ обнаруживает характерную флуоресценцию или абсорбцию.

Получение окрашенных или флуоресцирующих производных является наиболее распространенным способом обнаружения бесцветных веществ. Однако в большинстве случаев хроматографируемые вещества при этом разрушаются. Проявитель для обнаружения может быть применен в виде газа (хлор и т. д.), пара или жидкости.

* Одним из наиболее удобных и эффективных методов контроля является тонкослойная хроматография отдельных фракций элюата. Основные преимущества этого метода состоят в следующем; а) быстрота; б) высокая разрешающая сила; в) возможность применения очень чувствительных «разрушающих» способов обнаружения; г) возможность осуществления контрольного хроматографирования на тех же материалах и в тех же системах, которые применяют для хроматографического разделения на колонке.— Прим. ред.

Очень часто п

страница 204
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266 267 268 269 270 271 272 273 274 275 276 277 278 279 280 281 282 283 284 285 286 287 288 289 290 291 292 293 294 295 296 297 298 299 300 301 302 303 304 305 306 307 308 309 310 311 312 313 314 315 316 317 318 319 320 321 322 323 324 325 326 327 328 329 330 331 332 333 334 335 336 337 338 339 340 341 342 343

Скачать книгу "Лабораторная техника органической химии" (8Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
аренда плазмы 50 дюймов на стойке
Фирма Ренессанс лестница для дачи винтовая - качественно и быстро!
стул изо цена
Удобно приобрести в КНС Нева моноблок Acer купить - офис в Санкт-Петербурге, ул. Рузовская, д.11, КНС Нева.

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(10.12.2016)