химический каталог




Нейрохимия. Основы и принципы

Автор Ф.Хухо

Чо-с,н„ он

CHAPS ЕНАР50

В} ЦВИТТЕР-ИОННИЕ ДЕТЕРГЕНТЫ СН,

R-COlNHJICHjljNtCHslj-tCHOsSO,Я^холят -CHjCHOHCHiSOj*

17,Ф

БРИДЖ, ЩБРОПЫ W И AL, .ЗМУЛЫРОЗЕН ВС, РЕНЕКС 30, ЪТЕРОКСЫ A3 И АР

Ч/ч/ЧА/W°-rc".-c^0:l'"

- о-[Снг-с нг-оз„ н

трите» X

Рис. ЗЛО. Детергенты. (В формуле тауродезоксихолата натрия циклическая часть структуры приведена с ошибкой.)

Рис. 3.10 (продолжение).

Детергенты растворяют природные мембраны, образуя вместе с их липидами смешанные мицеллы. В случае мембранных белков они замещают их эндогенные липиды и образуют мицеллы вокруг гидрофобных участков белков (рис. 3.11). Если же детергенты затем удалить, например диализом или просто разбавлением, белок становится вновь нерастворимым. Возможно, что при этом молекулы белка агрегируют, поскольку они начинают контактировать своими собственными гидрофобными участками и сами образовывать нечто вроде мицелл.

Некоторые детергенты, например тритон Х-100, луброл, бридж, холат и дезокенхолат, как уже описывалось, просто растворяют мембрану и солюбилизируют интегральные белки. Другие же детергенты существенно повреждают белки, сильно влияя на их структуру, вплоть до необратимой денатурации. Поэтому действие детергентов непредсказуемо, и его следует проверять в каждом отдельном случае.

Искусственные липидные мембраны — модели биологических мембран

Постоянная дилемма, с которой приходится сталкиваться нейро-химикам и биохимикам, изучающим мембраны, заключается в том, что для исследования функционально важных молекул мембран необходимо выделить их, т. е. удалить из окружения, обеспечивающего их функционирование. Однако при этом могут

Si

Глава 3

Мембраны

85

Нелан-Ретергент

быть потеряны важнейшие свойства таких молекул, что особенно справедливо для транспортных белков, которые по определению не могут функционировать вне мембраны. Биохимик же может изучать только структурные свойства очищенного мембранного белка, но не механизм его функционирования. Один из подходов, разрешающих эту дилемму, заключается в воссоздании мембраны, т. е. во введении очищенного мембранного белка в искусственную липидную мембрану, где он вновь восстанавливает свою функцию. Преимущество такой воссозданной системы по сравнению с биологической состоит в том, что с ней можно работать при строго определенных условиях и с хорошо очищенными веществами, так что, например, транспортный белок может быть единственным белком в искусственной мембране, а его липидное окружение может быть легко проконтроликачественный, чем количественный характер. Везикулярные системы особенно удобны для измерения потоков через мембраны радиоактивно меченных соединений, а также спектроскопических (в том числе ЯМР, ЭПР) измерений. Количественное изучение липид-белковых взаимодействий, и особенно ионной проницаемости, эффективнее осуществлять на пленарных липидных системах. Из-за экспериментальных трудностей число удачно воссозданных систем все еще невелико.

999

ft

В основу методики положено недоказанное еще положение молекулярной биологии о том, что биомолекулы содержат в

ровано экспериментатором. Таким путем можно выяснить, какой именно компонент биологической мембраны необходим для проявления исследуемой функции и при каких иных условиях (ионная сила, рН, мембранный потенциал) система функционирует. Поскольку этот метод становится все более важным для нейрохимии, мы приведем здесь краткий обзор преимуществ и недостатков искусственных липидных систем и методов их построения.

Искусственные липидные системы делятся на везикулярные и планарные (рис. 3.3). Методы исследований, основанные на использовании искусственных липидных везикул, экспериментально проще и требуют менее дорогой аппаратуры, но обычно они дают меньше информации, чем планарные системы. Во многих случаях они используются как компромисс или как предварительный этап на пути воссоздания планарной мембранной системы, а данные, полученные с их помощью, носят скорее своей структуре всю необходимую информацию для образования структур более высокого порядка. Биомембраны —это самособирающиеся системы.

Наиболее часто для воссоздания везикулярных протеолипид-ных систем используются следующие методы (рис. 3.12):

1) ультразвуковая обработка липидов, суспендированных в белок-содержащей среде [25];

2) диализ раствора липида и белка в детергенте [26];

86

Глава 3

3) гель-фильтрация раствора липида и белка в детергенте [27].

При этом предполагается, что липидная везикула (липосо-ма) в водном растворе термодинамически более стабильна, чем единичная липидная молекула или плоская пленка таких молекул. При ультразвуковой обработке или при удалении детергента возникающая везикула захватывает молекулы белка, если они гидрофобны и поэтому находятся в термодинамически невыгодном окружении. У гидрофобных белков имеются две возможности стабилизации: либо посредством агрегации друг с другом, либо путем включения в липидную фазу. Если экспериментатору повезет, то происходит последнее. В самое последнее время удало

страница 27
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134

Скачать книгу "Нейрохимия. Основы и принципы" (4.85Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
купить чугунную скамью
ультраяркая диодная лента
CLAS PREMIUM EVO 30
купить билеты золушка

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(27.03.2017)