уется в гравиметрическом методе определения суммы кумаринов в растительном сырье. Специ-; фическое отношение кумаринов к щелочи лежит в основе метода ; нейтрализации (обратное титрование), которое применяется как для J определения суммы кумаринов, так и для индивидуальных компонентов. Способность кумаринов давать устойчивые красно-оранже-|вые и красно-пурпурные растворы с диазотированным сульфанила-Ёмндом в щелочной среде используется в колориметрических ме-

103

•годах количественного определения суммы кумаринов и индивидуальных компонентов, Флуоресценция при УФ возбуждении в видимой области лежит в основе флуориметрических методов количественного определения кумаринов.

Для количественного определения кумарина применяются спек-трофотометрические методы, где учитывается изменение оптической плотности растворов кумаринов при длине волны максимума поглощения в УФ области спектра того или иного кумарина в зависимости от его концентрации на основе удельных показателей поглощения. Колориметрическим, флуориметрическим и спектро-фотометрическим методам чаще всего предшествует хроматографн-ческое разделение кумаринов на бумаге и в тонком слое сорбента, поэтому эти методы называются хромато-оптическими методами.

Количественное определение кумаринов проводят также полярографическим методом.

Многообразие методов количественного определения в сырье позволяет провести правильный выбор метода для анализа растительного сырья, учитывая структуру природных кумаринов.

Методика количественного определения кумаринов в плодах амми большой Fructus Ammi maidis (ФС 42-540-72). Зрелые плоды амми большой {Ammi majus L.) семейства сельдерейных (зонтичных) Apiaceae (Umbelliferae) используются в качестве лекарственного сырья для получения препарата «Аммифурии», который представляет собой сумму фурокумаринов — изопимпинеллина и бер-гаптена. Количественное определение этих соединений проводят хроматоспектрофотометрическим методом.

Около 2 г (точная навеска) измельченного сырья, просеянного сквозь сито с размером отверстий 0,16 мм, извлекают 120 мл хлороформа в аппарате Сокслета в течение 2 ч (12—15 сливов), Хлороформное извлечение отфильтровывают и упаривают в вакууме досуха. Сухой остаток растворяют при слабом нагревании в хлороформе и количественно переносят в калиброванный пикнометр вместимостью 6 мл. 0,02 мл полученного раствора наносят микропипеткой на старт хроматограммы. Хроиатограмиу затем импрегнируют 10 %-ным фориамидом в метиловом спирте, подсушивают на воздухе в течение 4 мин и ведут хроматографировапие восходящим способом в системе н-гептан — бензол (4:1) при t = 19—20 "С в течение 5—6 ч на бумаге марки «СУ. Затем хроматограмму сушат в сушильном шкафу в течение 2 ч при температуре 40—50 °С и просматривают в УФ свете. Пятна бергаптена с Rf = 0,63 а изопим-пинелина с Rf = 0,53 обводят карандашом и вырезают. Вырезанные участки бумаги помещают соответственно в колбочки со шлифом вместимостью 10—15 мл, заливают 5 мл 95 %-ного спирта и оставляют стоять па 10—12 ч, затем нагревают па водяной бане при ? ~ 40 СС в течение 10 мин. Элгоат отфильтровывают и спектрофотометр пру ют в кювете с толщиной слоя 1 см на фоне элюата чистого кусочка той же хроматограммы. Оптическую плотность растворов измеряют при следующих длинах волн: изопимгошеллииа — 313 нм; бергапгеял—311 нм. Процентное содержание нзопнмшшеллина

104

и бергаптена х вычисляют по формуле

ViV3Pal,045. 100

где \\ — объем извлечения, мл; У2— объем извлечения, нанесенного на хроматограмму, мл; V9 — объем элюата, мл; т — масса навески сырья, г; ?|* — удельный показатель поглощения; изо-пимпинеллина-518, бергаптена-651; Аг — оптическая плотность элюата; ai — потеря в массе сырья при высушивании, %,

Содержание изопимпинеллина в сырье должно быть не менее 0,3 %, бергаптена — не менее 0,15 % в пересчете па абсолютно сухое сырье.

Реактив и н оборулопание: хлороформ; метиловый спирт (метанол): формэмид; н-гептан; бензол; чтплопый спирт (этанол).

Бумага хроматографическая мярки «С»; бкжсы с притертыми кршикзми; пикнометры вместимостью 5 мл; мчкропшхетки измерительные вместимостью 0,2 мл: колбы с нормальным шлифом вместимостью 10—15 мл; воронки стеклянные для фильтрования диаметром 5 см; весы лабораторные аналитические; набор сит; аппарат Сокслетз; камеры хро^этографические для ТСХ; шкаф сушильный лабораторный; УФ лампа; ба:ш водяные лабораторные; спектрофотометры СФ-4А, СФ-16.

Методики количественного определения кумаринов в корнях горичника Radix Peucedant (ФС 42-538-72). Корни горичника Мо-рисона (Peucedanum morisonii Bess.) и горичника русского (Р. ruthenicum М. В.) семейства сельдерейных (зонтичных) Apiaceae (Umbelliferae) используются в качество лекарственного сырья для получения препарата «Пеуцеданннэ.

Количественное определение пеуцедакина в корнях горичника проводят методом нейтрализации.

Около 15 г (с погрешностью не более 0.Q1 г) измельченного сырья (сито с размером отверстий 1 мм) помещают в колбу вместимостью 250 мл, заливают 150 мл 95 %-ного эт