химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

ньше. Отсюда следует, что для более полной задерэы следует брать мембрану с меньшими, чем указано в . талоге, величинами пор. Следует также помнить, ч способность проходить через мембрану зависит не тол ко от молекулярной массы, но и от формы молекул.

Целью настоящей работы является получение к, центрированного ферментного раствора методами уль рафильтрации и вакуум-выпаривания.

КОНЦЕНТРИРОВАНИЕ МЕТОДОМ УЛЬТРАФИЛЬТРАЦИИ

Работа состоит из следующих операций: анализ исходного ферментного раствора; проведение процесса ультрафильтрации; анализ концентрированного раствора и ультрафиль рата.

Анализ исходного ферментного раствора, В фермея

ном растворе определяют содержание сухих вещее (рефрактометрически), белка (по модифицированное методу Лоури) и ферментативную активность (по ст» дартиому методу для соответствующего фермента).

Проведение процесса ультрафильтрации. В л а бор тории ультрафильтрацию небольших объемов раствор, проводят в отечественных аппаратах с постоянным пе:" мешиванием жидкости над мембраной УФ-10—50— (СКВ БФА) либо в аппаратах фирмы Amicon (США В аппарат в зависимости от его объема заливается опр^ деленное количество исходного раствора. Аппарат yd навливается на магнитную мешалку и через редукт подключается к баллону с азотом. После включен; мешалки в аппарате создается давление порядка 0,3

118

0 5 МПа. Ультрафильтрат в процессе опыта собирается в мерный цилиндр. Процесс прекращают, когда количество концентрата составит 5—7 см3. Концентрат слива-ют, а ультрафильтрационный аппарат тщательно промывают водой.

Анализ концентрированного раствора и ульграфильтрата. В концентрате и ультрафильтрате определяют

те же показатели, что и в исходном ферментном растворе. |

Результаты анализов заносят в протокол наблюдений, который имеет следующий вид:

Время опыта мин

_— -

Содер канне Степень концентрирования, раз

я

Анализируемый „

продукт 2 г 2 «

S

& * а

* 3 елка, и

* Ч о объе &!

О v t

О

о щ С а

Исходный ферментный раствор Концентрат

КОНЦЕНТРИРОВАНИЕ МЕТОДОМ ВАКУУМ-ВЫПАРИВАНИЯ

Работа состоит из следующих операций:

анализ исходного ферментного раствора;

проведение процесса вакуум-выпаривания;

анализ концентрированного раствора.

Анализ исходного ферментного раствора. В исходном ферментном растворе определяют содержание сухих веществ (рефрактометрически), белка (по модифицированному методу Лоури) и ферментативную активность (по стандартному методу для соответствующего фермента).

Проведение процесса вакуум-выпаривания. В лаборатории вакуум-выпаривание проводят на отечественном Р°торном испарителе. Предварительно аппарат в условиях вакуума проверяется на герметичность при помоги мыльной воды. В приемную колбу заливается определенное количество исследуемого раствора. После окончания процесса выпаривания концентрат сливают и за-МеРяют его объем в мерном цилиндре.

119

к.

Анализ концентрированного раствора. В концентра.

те определяют те же показатели, что и в исходном фер. ментном растворе.

Результаты анализов заносят в протокол наблюде-ний, который имеет следующий вид:

Время опыта мин

Содержание ь

Ъ QJ а дТ а

Анализируемый продукт Объем, смэ сухих веществ, % U Активность ед. ФА/сма О «1

л a 33 2

4> ч С О V С

,ь a U о.

Исходный ферментный раствор Концентрат

Лабораторная работа №6 Осаждение ферментов из водных [растворов

Ферментные растворы представляют собой сложш коллоидные системы, состоящие из двух фаз: жидки дисперсионной среды и твердой (коллоидной) диспер^ ной фазы. Размеры частиц дисперсной фазы от 1 100 мкм.

Коллоидные растворы не являются стабильными, пр определенных условиях их частицы агрегируются и м гут выпасть в осадок. Сольватная оболочка белка со, дается особо ориентированными молекулами воды и св бодными радикалами, притягиваемыми к молекуле. Че\ больше сольватный слой, тем стабильнее коллоидны раствор. Сольватная оболочка является связующим зве ном между растворителем и коллоидной частицей.

Осаждение ферментов из водных растворов можг вести органическими растворителями (этиловым и из> пропиловым спиртом, ацетоном) и различными солями (сульфатами аммония, цинка, натрия, хлоридом натрия!Введение в водный раствор осадителя вызывает уменьшение притяжения молекул воды к молекуле фермента, а с увеличением концентрации осадителя падае[ количество молекул воды, участвующих в образован^1 сольватной оболочки молекулы белка. Сольватная оболочка фермента разрушается, сила притяжения к моле120 кулам осадителя падает, -происходит уменьшение общей энергии сольватации всех молекул фермента. В какой-то момент при определенной концентрации осадителя вереде энергия сольватации становится меньше энергии связи между двумя молекулами белка и наступает явление агрегации молекул и коагуляции белка.

Способность ферментов терять растворимость в присутствии органических растворителей и солей связана с диэлектрической постоянной, ее снижение в присутствии осадителей влечет за со

страница 42
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
компьютерный художник обучение
Рекомендуем приобрести в КНС Нева Asus PG278Q - оформление в онлайн-кредит в Санкт-Петербурге.
наборы кухонных ножей из хорошей стали
курсы вязания детских вещей москва

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(03.12.2016)