химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

/сма.

Необходимые реактивы. Биуретовый реактив —в мерную колбу на 1 дм3 наливают 400 см3 0,2 и. раствора NaOH, добавляют 9 г калия-натрия виннокислого, перемешивают до полного растворения, добавляют 3 г сульфата меди (порошка) и 5 г йодистого калия, объем доводят до метки 0,2 н. раствором NaOH; раствор мочевины— к 300 г мочевины (карбамида) прибавляют кусочек тимола величиной с горошину, приливают 700 см3 дистиллированной воды и смесь нагревают, затем прибавляют 3 г активного угля, тщательно перемешивают и фильтруют в мерную колбу на 1 дм3; объем доводят до метки дистиллированной водой.

Техника определения. В пробирку наливают 2,4см3 раствора мочевины, 0,1 см3 раствора белка и 2,5 см3 биуретового реактива. Смесь хорошо перемешивают и пробирки помещают в водяную баню или в термостат при 40°С на 10 мин. Затем их охлаждают до 20°С. Через 30 мин после добавления биуретового реактива раствор колориметрируют на ФЭК-М при длине волны 545 нм. Количество белка находят по калибровочной кривой, составленной по яичному альбумину.

Для построения калибровочной кривой готовят исходные водные растворы с содержанием 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 и т. д. мг белка в 10 см3. Из полученных растворов отбирают в пробирки по 0,1 см3, добавляют 2,4 см3 раствора мочевины и 2,5 см3 биуретового раствора и ведут определение описанным выше методом.

Определение белкового азота по Барнштейну

Метод основан на денатурировании и осаждении белков из водных растворов с последующим определением выделенного азота по Кьельдалю.

Необходимые реактивы. 6%-ный раствор сульфата меди (CuS04-5H20); 1,25%-ный раствор NaOH; 5°/о-ный раствор хлорида бария.

Техника определения. 1—2 г мелко размолотого вещества помещают в химический стакан на 100—150 см3, размешивают в 50 см3 горячей дистиллированной воды и нагревают до кипения. Затем приливают 25 см3 6°/оного раствора CuS04-5H20, смесь размешивают и добавляют 25 см3 1,25%-ного раствора NaOH. Раствору дают постоять не менее 1 ч для полного осаждения осадка, а затем сливают декантацией. Осадок, остающийся на фильтре, многократно (не менее 10—12 раз) промывают кипящей дистиллированной водой, сливая каждый раз промывную воду на фильтр. Промывание продолжают до прекращения появления мути в промывных водах от прибавления 10 капель 5%-ного раствора хлорида бария. Промытый осадок подсушивают вместе с фильтром на воронке в термостате, завертывают в сухую фильтровальную бумагу и, сжигая в колбе Кьельдаля, определяют содержание в нем азота.

Осаждение белка можно проводить и другими соединениями, в частности трихлоруксусной кислотой. Дальнейшее определение ведут, как описано выше.

Разность между содержанием общего азота и белкового составит небелковый азот пробы (азот аммиака, аминов и аминокислот).

Определение азота аммиака

Метод, разработанный Ивановым, основан на количественном определении аммиака, отгоняемого из испытуемой жидкости, подщелоченной известковым молоком, в условиях вакуума при низкой температуре.

Необходимые реактивы. Известковое молоко; 0,1 н. раствор серной кислоты; 0,1 н. раствор NaOH.

Техника определения. Анализ проводится в специальном приборе, состоящем из двух колб Вюрца: перегонной вместимостью 1,0—1,5 дм3 и приемной вместимостью 0,65 дм3. В перегонную колбу Вюрца глубоко вставляется делительная воронка с краном. Отводная трубка перегонной колбы соединяется с помощью резиновой пробки с приемником так, чтобы ее конец был погружен в жидкость. Отводная трубка приемной колбы присоединяется к водоструйному насосу через предохранительную склянку и манометр.

Фильтрат после осаждения белка или вытяжку в количестве 30 см3 наливают в перегонную колбу Вюрца. Для уменьшения толчков при кипении в колбу бросают несколько кусочков пемзы. Колбу плотно закрывают пробкой, в которую вставлена делительная воронка с

12 хорошо пришлифованным краном и длинной трубкой, кончающейся над уровнем жидкости. Через воронку в колбу приливают 20—30 см3 хорошо прокипяченного и охлажденного известкового молока до щелочной реакции (устанавливается по лакмусовой бумажке). В приемную колбу наливают точное количество (20—30 дм3) 0,1 н. раствора H2S04. Затем включают вакуум-насос и, обеспечив снижение давления до 15—20 мм рт. ст., приступают к перегонке. Для этого перегонную колбу помещают в водяную баню, температуру которой поддерживают на уровне 40°С, а приемную колбу охлаждают льдом или струей воды.

Для уменьшения вспенивания перегоняемой жидкости и ускорения процесса перегонки аммиака из делительной воронки в перегонную колбу несколько раз приливают по каплям по 3—4 см3 этилового спирта. Перегонку ведут почти до полного выпаривания жидкости в течение 30—40 мин.

По окончании отгона закрывают зажим между водоструйным насосом и предохранительной склянкой и осторожно открывают кран делительной воронки. Когда давление выравняется, прибор разбирают, вынимая сначала пробку из перегонной колбы, а затем из колбы приемника, и тщательно промывают отводную трубку перегонной колбы; находившуюся в кислоте промывн

страница 4
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
кресло престиж серый
Рекомендуем компанию Ренесанс - готовые деревянные лестницы на второй этаж недорого - всегда надежно, оперативно и качественно!

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(29.04.2017)