химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

диализа чаше всего используют специальные трубки из модифицированной целлюлозы либо мешочки, изготовленные из листового целлофана. Наибольшей известностью пользуются специальные трубки для диализа (Viskingcellulose tubing). Характеристика различных типов диализных трубок « Visaing* представлена в табл. 8 приложения II.

Часто диализные трубки и ластовой целлофан для придания ич эластичности пропитывают при изготовлении смесью глицерина с водой, которая легко удаляется при промывании водой. Отмытый 0т смягчителей материал не следует держать на воздухе, так как 011 делается ломким и, кроме того, при высыхании изменяется степень порозносги. Влажные трубки для диализа целесообразно хранить в замороженном состояния или же в присутствии антисепПоскольку партии целлофана и диализных трубок бывают за-вязнены и могут содержать примеси ионо'в металлов, рекоменду-чся непосредственно перед использованием прокипятить их в те-ение 2—5 мин в 0,01—0,005 М растворе этилендиаминтетраацегата

109

(ЭДТА) при рН 7 и затем отмыть несколько раз водой. Трубы мешочек или плоский диализатор перед диализом необходимо пр-верить иа герметичность.

При установке образца на диализ необходимо доб>' вить к нему антисептик и проследить за тем, чтобы уровень жидкости в мешочке был на 1—2 мм выше уровнс внешней жидкости в сосуде, что позволяет определит! возможную утечку диализуемого раствора.

По мере выравнивания градиента концентрации №> рость диализа замедляется, поэтому рекомендуется npLl водить вначале обычный диализ, а на завершают^ стадиях для удаления трудноудаляемых балластных ществ пользоваться электродиализом.

Для обработки ферментных растворов чаще всег-1

ПО

щи и

^пользуется обычный изотонический диализ, позволяю

избавиться от 2/з балластных веществ, повысить в

3_-Ю раз активность ферментных препаратов (в пересчете на сухое вещество), провести некоторое фракционирование комплекса ферментов по молекулярной массе и т. Д- Но во всех случаях наблюдается увеличение объема диализируемого раствора в 1,1 —1,4 раза.

Целью настоящей работы является изучение процессов диализа и электродиализа экстракта из поверхностной культуры микроскопических грибов. Объектом исследования может быть любой раствор ферментов, который помимо белков содержит значительное количество низкомолекулярных примесей. Работа проводится в два занятия.

Первое занятие

На первом занятии осуществляются следующие операции:

получение экстракта из поверхностной культуры гриба;

очистка экстракта от взвеси; анализ исходного экстракта;

монтаж диализационной установки и проведение диализа или электродиализа.

Получение экстракта из поверхностной культуры гриба. Для проведения группового занятия (8—10 студентов) желательно взять готовую поверхностную культуру влажностью 10—12% двух или трех продуцентов ферментов.

_ . П<Д 1 С1 П JJUIIRX Л ^J.H-*-^IJ LLLU'UU \J?"UIUI YJIWI JRI U I

иРают 0,6—0,7 дм3 второго фильтрата. Вновь повторяПеред проведением диализа готовят экстракт в диффузионной батарее (см. рис. 14) либо простым настаиванием, не заботясь о том, чтобы все ферменты перешли в раствор. В последнем случае для приготовления экстракта 'берут 0,5 кг воздушно-сухой культуры, добавляют к ней 3 дм3 водопроводной воды, подогретой до 30°С, Т1Дательно все перемешивают и оставляют настаиваться ю—15 мин. Затем смесь фильтруют через два слоя марли и слегка отжимают. При таком способе удается °тделить 1,2—1,5 дм3 фильтрата. Этот фильтрат исполь-3У'ют для повторного настаивания на свежей культуре, которуЮ добавляют в фильтрат в количестве 0,25о,о(3

кг. После настаивания смесь снова фильтруют и отк

Ш

ют настаивание, внося во второй фильтрат 0,10—0,15 свежей культуры. Объем третьего фильтрата обычно превышает 0,25—0,30 дм3. Содержание сухих веще, в таком экстракте составляет около 10%.

Очистка экстракта от взвеси, Экстракт из повер.х ностной культуры, полученный таким способом, обыч« содержит значительное количество взвеси. Его необх, димо либо профильтровать через бумажный фильтр ;: воронке Бюхнера, либо процентрифугировать при част те вращения 5000 мин-1 и осторожно декантировать осадка. Экстракт должен быть абсолютно прозрачен не должен содержать взвеси.

Анализ исходного экстракта. Перед проведением дщ, лиза часть экстракта (30—50 см3) отбирается для опрк деления содержания сухих веществ, активности фер\п тов, рН экстракта, содержания белка, золы, редуциру щих веществ. Методики определения этих показате.:. изложены в главе I.

Анализ осуществляется в 2—3 повторностях, что : зволяет убедиться в отсутствии грубых ошибок и расе: тать доверительные ошибки экспериментальных оцеь (см. приложение I, § 1).

Содержание

Характеристика исходного экстракта оформляется виде таблицы:

белка

Активность фермеш

редуцирующих веществ

S о

ППИМР^Н^,!-4,?"110" В та0л:щс помимо среднеарифметических значен.1 ^ Р{,11РТ'30В Должны указывался величины доверитель!»^'

ошииок опенок ЪТПХ параметров.

Монтаж диализационно

страница 39
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
лента гироскутера
http://taxiru.ru/magnitnyie-nakladki/
кровати в ступино 90x180
билеты на имаджен драгонс

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(23.06.2017)