химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

дини ний потреблена микроорганизмом в процессе роста.

Приготовление вытяжки из мицелия гриба. Мицели из третьей колбы после отделения жидкой части культ; ральной жидкости промывают двумя порциями (по 20-25 см3) холодной воды (2—3°С) и переносят в фарФ1 ровую ступку, где тщательно растирают в течение Ю-15 мин с кварцевым песком (добавляют приблизите.! но 0,2—0,3 г кварцевого песка) и дистиллирован:! водой температурой 30°С. Количество воды должно бв около 30 см3. Затем содержимое ступки переносят в м° ную колбу на 50 см3, настаивают 15—20 мин, охлаж'-ют до 20°С и доводят дистиллированной водой до меть' В результате этих операций извлекаются фермеит

106 оСТавшиеся в мицелии, что дает возможность опреде-1ить сумму всех ферментов, синтезированных микроорганизмом за весь цикл культивирования.

Содержимое мерной колбы тщательно перемешивают и фильтруют через складчатый фильтр. Фильтрат используют для определения активностей ферментов.

Определение активности ферментов в фильтрате культуральной жидкости и в мицелиальной массе гриба. Анализ ведется в зависимости от вида выбранного продуцента и синтезируемого им комплекса ферментов. Активности ферментов определяют в фильтратах культуральной жидкости и в биомассе микроорганизма. Так как в мицелии обычно находится очень мало фермента, то на определение берут в 5—10 раз больше вытяжки, чем при анализе фильтрата культуральной жидкости.

Ферментативные активности (ФА), полученные в фильтрате культуральной жидкости и в вытяжке из мицелия, выражаются в соответствующих единицах на 1 см3 культуральной жидкости; суммой единиц ФА во всем объеме фильтрата культуральной жидкости (объем составляет 120-0,93 см3, где 0,93 — коэффициент, учитывающий условно все виды потерь и сухой остаток); в соответствующих единицах на 1 см3 вытяжки из мицелия; в единицах на весь объем (50 см3) вытяжки из мицелия (2 ФА мицелия); в единицах на 1 г мицелия (для этого сумма единиц ФА мицелия делится на количество сухой массы микроорганизма во всем объеме).

Расчет продуцирующей способности гриба. Обычно в научно-исследовательских работах по физиологии микроорганизмов приводится показатель продуцирующей способности биомассы (Пс) того или другого микроорганизма. Пс— это то количество единиц активности ферментов, которое при данных условиях способен синтезировать 1 г биомассы микроорганизма (в пересчете на сухую массу).

Чтобы рассчитать Пс, необходимо знать сумму единиц ФД во всем МИцелни (2 ФА мицелия); сумму единиц фд во всем объеме фильтрата культуральной жидкости (2 ФА фильтрата); сухую 'массу мицелия (в г) 0 всем объеме: Пс= (2 ФА мицелия + 2 ФА фильтра-а)-2Бм.

Кроме того, подсчитывается процентное содержание Рментативной активности в фильтрате культуральной

107

к

жидкости и в мицелии по отношению к общей сумм,

единиц ферментативной активности в культуре (2фкультуры). 1

Результаты всех определений и расчетов заносят,-в сводную таблицу протоколов наблюдений.

Протокол наблюдений второй части лаборатории работы имеет вид:

Продуцент:——

Состав среды: _

Условия культивирования: объем среды см3; объем качалсп

колбы .см3; температура культивирования °С; час

вращения качалки мин-1 и т. д.

Биомасса микроорганизма Ферментативная активность (ФА), соответствуют;! ? единицы

л ь фильтрат культуральНОЙ ЖИДКОСТИ мицелий о к

пробе о К

о

о С суммарная

ФА в фильтрате суммарная ФА в мицелии к

f?з

g &

и

о

at

1 U 1 s*

ЩИ 5 О

2 и

И продуцирующая с мицелия, Пс <

е | в единицах X ФА фильтрата в % К общей 2 ФА

(К графе 10) | к

Е

<

?е- в единицах Z ФА мицелия В % к общей Г ФА

(к графе I 0) *§

2 f- С

1 ( . 2 3 4 5 6 7 8 9 10

1

Примечание. Наряду со среднеарифметическими величинами "Р мых измерении или результатами вычислений в таблице должны быть пРИ" дены величины доверительных ошибок (см. приложение I § 1)

108

. 2. концентрированней очистка ферментных растворов

Лабораторная работа №4

Очистка ферментных растворов от низкомолекулярных веществ методом диализа

Диализом называется процесс разделения низко- и высокомолекулярных веществ с использованием полупроницаемых перегородок (мембран). Молекулы низкомолекулярных веществ, диаметр которых значительно меньше диаметра пор, свободно проходят через мембрану в раствор, тогда как для высокомолекулярных соединений мембрана непроницаема. Этот принцип положен в основу использования диализа в препаративных целях.

Чтобы процесс диализа был высокоэффективен, необходимо длительное время поддерживать значительную разность концентраций по ту и другую сторону полупроницаемой мембраны. Этого можно достигнуть в специальных аппаратах—диализаторах, работающих в непрерывном режиме при различном протоке для диали-зуемого раствора и омывающего мембраны раствора.

Установки для диализа (рис. 16) состоят из набора кассет (ячеек), в которых чередуются каналы для протока воды и ферментного раствора, разделенные полупроницаемыми мембранами.

В лабораторной практике для

страница 38
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
обучение курсы наращивание ресниц балашиха
Фаркоп Aragon E4723BA для Peugeot 3008
физкультурное оборудование для участка в детском саду
какую скорость может развить моноколесо

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)