химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

самые различные соединения. Например, при биосинтезе амилаз важно знать харакку потребления крахмала и других углеводов из среды, при биосинтезе целлюлаз — целлюлозы, пектиназ — ПЕД тиновых веществ и т. д. Кроме того, в исходной сре.и определяют содержание аминного и общего азота, фосфора. Перечень определяемых компонентов среды огова ривается в каждом индивидуальном задании.

Если в среде есть нестабильные компоненты (например, фрукте за, сахароза, витамины), которые могут изменяться при воздейст вин высоких температур и избыточного давления, целесообразно ОПределить их содержание после стерилизации. Для этого можно Ш' пользовать пробу среды (50 см3), в которой определяли рН пос.к стерилизации.

Точность определения в среде тех или иных компонентов оценивается в виде доверительной ошибки, РАСсчитываемой по результатам нескольких повторносте» опыта (>3) после исключения из полученных резуль татов грубых ошибок (см. приложение I, § 1).

Засев питательной среды. После того как стерилизз ция окончена и автоклав открыт, пипетки помещают в» 10—15 мин в горячий сушильный шкаф (температур5 70—80°С) для подсушивания бумаги, колбы и осталь' ную посуду оставляют в автоклаве на 15—20 мин с т^ чтобы бумажные колпачки подсохли в токе горячее воздуха. Затем колбы с питательной средой вынимаю1 и, если позволяет время, оставляют на столе для охлз*

102

дения их до температуры 30—35°С; если же времени нет, колбы можно поместить в ванну с холодной водой, но так, чтобы не намокли пробки, и после охлаждения насухо вытереть и снять бумажные колпачки.

Засев питательной среды проводят в боксе. Бокс перед посевом в течение 2—3 ч облучают бактерицидной лампой. Готовясь к посеву, ставят на стол штатив с пробирками посевной культуры и стерильной воды, пустой высокий стакан для грязных пипеток, четыре стерильные градуированные пипетки на 2 см3 или пенал с пипетками, колбы со стерильной средой и горелку.

Засев желательно вести вдвоем. Один из студентов садится против горелки, слева стоит второй студент. Первый студент берет в руки две пробирки: в левую пробирку с продуцентом, в правую —со стерильной водой. Мизинцем левой руки захватывает пробку пробирки со стерильной водой и обжигает [верхний край пробирки. Затем мизинцем правой руки открывает пробирку с культурой и содержимое первой пробирки выливает в пробирку с чистой культурой. После этого обе пробирки закрывает. Пустую пробирку из-под воды, закрытую пробкой, ставит в штатив. Вторую пробирку с культурой и водой помещает между ладонями вертикально и плавно вращает в течение 2—3 мин, затем ставит пробирку в штатив. Первый же студент освобождает стерильную пипетку от бумаги в непосредственной близости от пламени горелки, держа ее за верхний край в правой руке. Берет пробирку с суспензией конидий, открывает ее и, обжигая на огне края пробирки и пипетки, вводит пипетку в пробирку. Содержимое пробир-ки осторожно перемешивает, отбирает 2 см3 посевной суспензии, закрывает пробирку пробкой и ставит ее в штатив. В это время второй студент, участвующий в по-севе, открывает колбу со средой, обжигая горлышко и пробку, и подводит край колбы под пипетку. Содержите пипетки выливает в колбу, колбу закрывает пробкой и ее содержимое тщательно перемешивает вращатель-иыми движениями. Грязную пипетку ставит нижним кон-Пом в стакан. Затем, используя имеющуюся конидиевую ^Успензию, второй стерильной пипеткой засевает среду 0 второй колбе и в третьей.

0п Четвертую колбу со средой центрифугируют для РеДеления твердой фазы среды. Надосадочную жид!03

к.

к

ных й расчет доверительных ошибок (см. приложение I § 1).

Определение количества сухой массы мицелия гриба,

Фильтры вместе с осадками из первой и второй колб помещают в предварительно взвешенные донышки чашек Петри и высушивают в ИК сушильном шкафу л>, постоянной массы в течение 15—30 мин. Можно вести высушивание до постоянной массы и в обычном сушильном шкафу при 105 °С или даже в приборе Чижовой. После охлаждения фильтра в эксикаторе его взвс-шивают и определяют содержание сухой массы мицелцг гриба.

Расчет количества биомассы Бм проводится по фес муле Бм = Д— (а + Б+С) : 1,2, где Д — маоса филы-, с биомассой, помещенных в чашку Петри, после вы:;.-шивания, г; а —масса сухого фильтра, г; 5 —масса д нышка чашки Петри, г; С — масса твердой взвеси в х, тательной среде, г; 1,2 — коэффициент пересчета i:. 100 см3 культуральной жидкости. Расчет проводится &. учета выпаренной влаги при стерилизации и культпвг ровании.

Flip и м е ч ал и е. Такой расчет биомассы можно вести в w случае, если известно, что твердые включения в среду не погрч' дяются в процессе роста микроорганизма. Обычно такой рас-к Невозможен, если микроорганизм синтезирует ферменты, разрушат-щие целлюлозу и гемицеллюлозы.

Характеристика фильтрата культуральной жидкости Прежде всего в фильтрате определяют рН, затем все i компоненты культуральной жидкости, которые анал:»; ровали в исходной среде. На анализ надо брать про"1 большего объема, так как основная часть этих сое

страница 37
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
стоимость акустики 7 1 для кинозала
обслуживание кондиционеров electrolux
сковородка гриль lodge
верстак слесарный вм200

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(23.03.2017)