химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

итательная среда)

83

1

проклеенной бумаги, но без питательной среды необхо-димо взвесить и записать эту массу (Р) в протокол ла. блюдений. Для стерилизации следует завернуть в бумагу, не нарушая ее целости, и аккуратно завязать вере-вочками следующие предметы: кювету, крышку к кювете вместе с вырезанным по размерам крышки листом непроклеенной бумаги, низкий широкий сосуд вместимостью 1,5—2,0 дм3, где будет проводиться увлажнение среды и ее засев, мерный цилиндр на 250 см3 для замера необходимого количества стерильной воды, стеклянную палочку или лопатку для перемешивания посевной культуры в посевной колбе. Кроме того, следует просто рилизовать в колбе 250 см3 водопроводной воды.

Стерилизацию посуды и воды следует проводить в автоклаве при температуре 120°С в течение 0,5 ч.

Стерильная посуда после автоклавирования должнг быть подсушена в сушильном шкафу при 105°С, так как бумага при стерилизации слегка увлажняется.

Приготовление и стерилизация питательной среды. Для каждого конкретного микроорганизма готовится своя питательная среда, обладающая набором специфических соединений, обеспечивающих биосинтез определенных ферментов.

Для Asp. oryzae, например, используются следующие вариант питательных сред (в %): пшеничных отрубей — 10О; .пшеничных огрубей — 70, солодовых ростков (или подсолнечной лузги, или древесных опилок, или кукурузного жмыха) — 30; пшеничных отрубей— 5Q, свекловичного жома —30; пшеничных отрубей — 8Q, вь-жимок винограда — 20; солодовых ростков —50; рисовой uieJiv хи — 50.

Если задание связано с оптимизацией состава питательной среды, то каждый из перечисленных вариантов может служить центром эксперимента. Интервалы варьирования факторов студенты должны назначать самостоятельно с учетом физиологических особенностей продуцента и литературных данных.

Если компонент среды имеет очень крупные частицы (например, подсолнечная лузга), его перед введением в среду следует измельчить.

Компоненты среды отвешиваются на технических весах, тщательно перемешиваются и после этого из смеси отбирается средняя проба для последующих анализов-обычно она составляет около 40—60 г. На эту величину следует увеличивать рассчитанную для опыта массу среды. Например, опыт проводится "в трех параллельно-84

тяХ в каждую кювету входит 80 г среды (по воздушно-сух-о'й массе), т. е. 240 г на три кюветы. Тогда общее количество приготовляемой среды будет 300 г.

Среда для каждой кюветы стерилизуется отдельно. Приготовленная среда помещается либо в пакет, либо в многослойную салфетку из марли, либо в широкий стеклянный стакан. Емкость для стерилизации предварительно должна быть взвешена (а). Стерилизация среды ведется при 120°С в течение 1 ч в биксе. Емкость вместе со стерильной средой вновь взвешивается (В).

При необходимости оценить доверительную ошибку1 взвешивания следует взять 5—6 одинаковых навесок на технических весах, а затем проверить их массу на аналитических весах. По методике, изложенной в приложении I, § 1, рассчитать оценку дисперсии единичного взвешивания и его доверительную ошибку.

Определение исходной влажности среды (W,,cy) и содержания в ней основных лимитирующих процесс роста микроорганизма компонентов. Определение влажности сыпучей среды ведется в трех параллельных пробах по ускоренной методике, на приборе Чижовой, в сушильном шкафу с ИК-лампой либо высушиванием до постоянной массы. Результаты в трех повторностях дают возможность убедиться в отсутствии грубых ошибок и, кроме того, рассчитать доверительную ошибку определения влажности, которую следует в дальнейшем учесть при балансовых расчетах.

Лимитирующими компонентами в среде могут быть источники углерода, азота, некоторые соли. Чаще всего пРи поверхностном способе культивирования большое значение имеет наличие в среде крахмала, целлюлозы, гемицеллюлозы, пектина, которые не только являются источником питания, но и способствуют образованию микроорганизмом определенных ферментов. Например, Для получения амилолитических ферментов необходимо наличие в среде значительных количеств крахмала, а для Пектолитических ферментов наряду с крахмалом в среде Должно быть повышенное содержание пектина и т. п. о зависимости от поставленной задачи определяют наиболее важное лимитирующее рост микроорганизма соединение и биосинтез им требуемого комплекса.

Расчет количества воды, необходимой для увлажне-Ия питательной среды. Для нормального развития мик85

к

роскопического гриба и интенсивного образования ментов необходимо, чтобы среда имела влажность 581 63%.

Расчет количества добавляемой воды проводится j следующим данным:

Лср — масса питательной среды с исходной влажностьScp — содержание абсолютно сухого вещества в исхо: ной пробе;

ССр — масса питательной среды с требуемой влажной» №тр, которая равна Вср-100 : (100— №тр);

Гср—масса питательной среды после стерилизации, ра; ная (В—а);

Д — количество воды, которое необходимо добавит для получения питательной среды требуемо влажности, равное (Сср—Гср).

Пример. Исходными данными для р

страница 31
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
курсы по сервесному обслуживанию кондиционеров
вячеслав бутусов 55 лет
ускоренные курсы мастеров маникюра в москве
урны

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(08.12.2016)