химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

ОТЫ ПО ТЕХНОЛОГИИ ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ

| 1. ПОЛУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ ПРИ ПОВЕРХНОСТНОМ И ГЛУБИННОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ МИКРООРГАНИЗМОВ

Лабораторная работа №1

Культивирование микроорганизмов — продуцентов ферментов — поверхностным способом на твердых питательных средах

Микроорганизмы, растущие на твердых средах, в процессе своей жизнедеятельности выделяют во внешнюю среду различные гидролитические ферменты. Культура микроорганизма, полученная таким способом, является исходным материалом для получения ферментных препаратов различной степени очистки, а в высушенном состоянии она может быть готовым техническим препаратом.

Комплекс ферментов, синтезируемый микроорганизмами при поверхностном культивировании, зависит от физиологических особенностей продуцента, состава питательной среды и условий выращивания. В качестве продуцентов ферментов могут быть использованы акти-номицеты, мицелиальные грибы, бактерии, дрожжи. Но чаще всего при поверхностном способе культивирования используют микроскопические грибы.

В данной лабораторной работе удобнее всего использовать микроскопические грибы или дрожжеподоб-ные микроорганизмы, например такие, как Asp. oryzae, Asp. flavus, Asp, awamori, Asp, niger, Rh, delemar, En-Qornycopsis fibuliger и др.

Целью настоящей работы является выращивание продуцентов различных ферментов на твердых сыпучих сРедах и анализ полученных культур на активность содержащихся в них ферментов.

Эта работа выполняется за 2 занятия, так как тре-Уется определенное время для роста культуры.

на ? ^СЛН пеРед студентом стоит задача выполнить на эту тему ^но-исследовательскую работу (НИРС) с оптимизацией процес81

са по двум и более факторам, количество времени для ее прове-1 Дения значительно возрастает. Обычно оптимизация осуществляет.I ся по планам дробного, реже полного факторного эксперимент) | (см. приложение I, § 3). Исследование может заканчиваться пол,.' ченнем уравнения процесса и соответствующей интерггрета влияния на процесс исследуемых факторов или даже составлю программы оптимизации и ее осуществлением с расчетом no.ni ного эффекта. В этом случае работа ведется с применением > до,в математического анализа.За 6—7 дней до проведения работы культура из и;, ходной коллекционной пробирки, хранящейся в музе лаборатории, пересевается на свежескошенный сусло-агар (5—6%-ное сладкое пивное сусло с добавление;; 1.5—2,0% агара) в пробирки с большим диаметро:; (18 мм). Посевы микроорганизмов на косом сусло-агаре помещаются в термостат с температурой 30°С не 3—4 сут. Рост гриба заканчивается обильным спороно шением.

За 3 дня до начала основной работы повторно пересевают продуцент из пробирок на твердую питательную среду, обычно на увлажненные пшеничные отруби. Для, этого в конические колбы вместимостью 250 см3 поме-. щают по 15—20 г пшеничных отрубей влажностью 451 : закрывают их ватными пробками, надевают бумажный колпачок, чтобы не намокла пробка при стерилизаций, \ и затем автоклавируют 1 ч при 120°С.

После естественного охлаждения среды в колбах дс 35—40°С ее в стерильных условиях засевают суспензией спор микроскопического гриба. Суспензию спор л о-лучают, смывая спороносящую культуру продуцента с косого сусло-агара в большой пробирке 10 см3 стерильной воды. В каждую колбу со стерильной средой внося: по 1 см3 споровой суспензии. После тщательного перемешивания колбы с засеянной средой ставят в термостат с температурой 30°С на 2—3 сут. За это время мицелий гриба полностью пронизывает питательную среду, образуется рыхлый корж, густо покрытый конидиями гриба желто-зеленого цвета. Эта культура на отрубях, выращенная в колбах, является исходным посевным материалом для засева кювет во время лабораторных заня тий.

Посевной материал анализируется на микробиологи' ческую чистоту и на содержание конидий. Хороший посевной материал не должен содержать посторонней ми*'

82

оофлоры и должен иметь в 1 г посевной культуры от 1 5 "до 3 миллиардов спор (в пересчете на абсолютно сухое вещество).

Первое занятие

Первое занятие состоит из следующих операций:

подготовка посуды и ее стерилизация;

приготовление питательной среды и ее стерилизация;

определение исходной влажности среды и содержания в ней основных лимитирующих процесс роста микроорганизма компонентов;

расчет количества воды, необходимой для увлажнения питательной среды;

увлажнение стерильной питательной среды, ее засев и раскладка в кюветы для выращивания;

определение параметров воздуха в растильной камере.

Подготовка посуды к стерилизации. Вся посуда перед стерилизацией должна быть тщательно вымыта и высушена в сушильном шкафу.

Металлическую кювету (рис. 12) перед стерилизацией в собранном виде вместе с крышкой и листом неРис. 12. Металлическая кювета с крышкой для выращивания микроорганизмов на твердой питательной среде поверхностным способом:

а — общий вил. кюветы; 6 — вид перфорации на дне кюветы; в — крышка к кювете; г — кювета в собранном виде в Разрезе (/ — кювета; 2 — крышка; 3 — лист кепроклеенной бумаги; 4 — п

страница 30
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
футзал магазин онлайн
выкройка автопятки своими руками
как убрать залом на двери автомобиля
KO/93024C

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(06.12.2016)