химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

еактивы, что и при определении азота по Кьельдалю.

Техника определения. Точную навеску исследуемого вещества, содержащую 4—5 мг азота, помещают "в колбу Кьельдаля на 50 см3, прибавляют 1 см3 концентрированной серной кислоты и 0,3—0,5 г смеси сульфата меди и сульфата калия в соотношении 1 :3. Сжигание проводят так же, как и при определении содержания общего азота по Кьельдалю.

После сжигания и охлаждения смеси в остывшую колбу приливают 4— 5 см3 воды и отгоняют аммиак в приборе модификации Парнаса — Вагнера (рис. 2).

Перед началом определения прибор в собранном виде пропаривают 15— 20 мин. Жидкость нз колбы Кьельдаля через воронку переносят в сосуд 5. Колбу несколько раз ополаскивают небольшими порциями воды, которые сливают в этот же сосуд. К содержимому основного сосуда через воронку приливают 7 см3 33%-но-го раствора NaOH (из расчета 7 см3 на 1 см3 H2S04), также смывая воронку небольшими количествами воды. Общин объем жидкости в сосуде не должен превышать 50 см3. Необходимо следить, чтобы трубка холодильника была опущена в приемную колбу с 5—15 см3 (в зависимости от предполагаемого содержания азота) 0,05—0,1 н. раствора серной или соляной кислоты.

Отгонку аммиака ведут, пропуская пар через сосуд в реакционную жидкость. Этот сосуд служит для создания вакуума и регулирования давления пара и тем самым позволяет промывать и отсасывать отработавшие и промывные воды.

Отгонка заканчивается за 10—15 мин. После этого приемную колбу опускают и, чтобы обмыть трубку холодильника внутри, продолжают перегонку еще 2 мин. Снаружи трубку также обмывают водой, которую собирают в ту же колбу, Избыток кислоты оттитровыва-ют из микробюретки раствором щелочи той же концентрации, что и кислоты.

По окончании анализа открывают зажим, сообщающий сосуд с атмосферой, и закрывают на несколько секунд зажим, соединяющий прибор с парообразователем. Благодаря более быстрому охлаждению сосуда 1 образуется вакуум и вся жидкость из сосуда 5 перетекает в сосуд 1. После промывания прибор готов к новому определению.

Содержание азота рассчитывается по той же формуле, что и при определении по Кьельдалю.

Установление нормальности H2S04. Точную нормальность приготовленного 0,1 н. раствора серной кислоты удобно устанавливать по перекристаллизованной буре (Na2B4O7'10H2O).

Для определения титра серной кислоты в колбы помещают навески буры (0,18—0,20) ±0,0001 г, приливают 50 см3 горячей дистиллированной воды и несколько капель смешанного индикатора. Смесь титруют 0,1 н. раствором H2S04 до появления малиновой окраски. Титр кислоты Т устанавливают по следующей формуле: Г = = а -1000/ (190,61 &), где а — навеска буры, г; b — количество H2S04, пошедшей на титрование, см3.

Примечание. Титр серной кислоты и щелочи необходимо устанавливать для каждых вновь приготовленных растворов.

Определение белка в материалах И пробах

МЕТОД ЛОУРИ

Метод основан на реакции белков с реактивом Фоли-на, дающей синее окрашивание. Метод применяют для определения в растворах белка с концентрацией от 10 до 100 мкг.

Необходимые реактивы. Раствор А — 2%-ный раствор Na2C03 в 0,1 и. растворе NaOH; раствор В — 0,3%-ный раствор CuS04-5H20 в 1%-ном растворе дву-замещенного виннокислого натрия или калия; раствор С— опытный раствор, готовят в день определения (годен в течение одного дня), смешивая 50 мл раствора А и 1 мл раствора В; реактив Фолина — 100 г вольфра-мата натрия (Na2W04'2Н20) и 25 г молибдата натрия (Na2Mo04-2H20) растворяют в 700 см3 воды, добавляют 50 см3 85%-ного раствора ортофосфорной и 100 см3 соляной кислот. Смесь кипятят в течение 10 ч с обратным холодильником в вытяжном шкафу. После этого в колбу добавляют 150 г сульфата лития, 50 -см3 дистиллированной воды и 5 капель бромной воды. Смесь кипятят 15 мин в вытяжном шкафу для удаления избытка брома, охлаждают и доводят до 1 дм3. Реактив фильтруют и хранят в темной склянке с притертой пробкой. Раствор должен быть ярко-желтого цвета. Раствор можно хранить длительное время; раствор Д — реактив Фолина, разбавленный водой в соотношении 1:1.

Техника определения. К 0,4 см3 раствора белка добавляют 2 см3 раствора С. Смесь перемешивают и через 10 мин приливают к ней 0,2 см3 рабочего раствора Фолина. Интенсивность окраски определяют на ФЭК-М с красным светофильтром (или на спектрофотометре при длине волны 750 нм) через 30 мин. Количество белка находят по калибровочной кривой.

Для построения калибровочной кривой 100 мг чистого белка (сывороточного у-глобулина, кристаллического альбумина и т. п.) растворяют в 100 см3 0,1 н. раствора NaOH (I см3 содержит 1 мг белка). В 9 мерных колб на 100 см3 приливают раствор белка в возрастающих количествах: 0,5 см3, а затем от 1 до 8 см3. Раствор в колбах доводят водой до метки, перемешивают и из каждой колбы берут по 0,4 см3 для определения концентрации белка колориметрическим методом. По полученным данным вычерчивают калибровочную кривую.

ш

БИУРЕТОВЫИ МИКРОМЕТОД ПО ЯРОШ

Метод используется для определения в растворах белков с концентрацией от 0,04 до 1,6 мг

страница 3
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
двери шарлиз и обноличники
Рекомендуем приобрести офисную технику в КНС лазерный мфу черно-белый - специальные условия для корпоративных клиентов.
барбекю из кирпича купить
теплица из сварной оцинкованной сетки

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(24.06.2017)