химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

контрольного и опытного растворов должно составить 0,5— 6,0 см3 0,1 н. раствора тиосульфата натрия. Если расхождение меньше 0,5 или больше 6 см3, то анализ повторяют с большим или меньшим количеством ферментного раствора.

При определении осахаривающей активности бактериальной культуры, например Вас. subtilis, вводятся следующие дополнения:

Для приготовления 1%-ного раствора крахмала в качестве буферного раствора используют фосфатный буферный раствор с рН 6,0. В 100 см3 раствора крахмала Должно быть 10 см3 фосфатного буферного раствора,

69

После Введения 20 см3 0,1 н. раствора Йода к смеси добавляют 52,5 см3 0,1 н. раствора NaOH ИЛИ КОН.

Осахаривающую активность OCi (в ед./г) в культурах и ппепаратах Aspergillus oryzae определяют по формуле OCi=e/(m<), где е — количество единиц активности, найденное по табл. 5 в соответствии с результатами

Таблица 5

Количество; 0,1 н. раствора тиосульфата Na, см3

Единицы ОС (е)

Единицы ОС (е)

118,9 125,5 132,1 138,9 145,8 152,8 159,9 167,1 174,5 181,9 189,5 197,2 205,1 213,1 221,3 229,6 238,1 246,8 255,6 264,6

4,1

4,2 4,3 4,4 4,5 4,6 4,7 4,8 4,9 5,0 5,1 5,2 5,3 5,4 5,5 5,6 5,7 5,8 5,9 6,0

273,8 283,2 292,8 302,7 312,8 323,1 333,6 344,4 355,5 366,9 378,6 390,6 402,9 415,6 428,8 442,3 456,2 470,6 485,0 501,2

титрования (разность титрований контрольного и опытного растворов 0,1 н. раствором тиосульфата натрия), мнкроэквивалент гликозндных связей; т — навеска препарата, г; t — время гидролиза, мин.

Осахаривающую активность ОС2 (в ед./г) в культурах и препаратах Aspergillus awamori определяют по формуле ОС2 = (К—0)5<3/(mi), где (К—О) — разность титрований контрольного и опытного растворов 0,1 н. раствором тиосульфата натрия, см3; 50—коэффициент пересчета на микроэквивалент гликозидных связей. 70

Перевод кошчеспш 0J н. раствора тиосульфата натрия о единицы ОС

Количество 0,1 м. раствора тиосульфата Na, см3 Единицы, ОС (с) Количество 0,1 н. раствора тиосульфата Na, ем*

0,1 5,0 2,1

0,2 10,0 2,2

0,3 15,0 2,3

0,4 20,2 2,4

0,5 25,5 2,5

0,6 30,8 2,6

0,7 36,2 2,7

0,8 41,6 2,8

0,9 47,0 2,9

1,0 52,6 3,0

1,1 58,2 3,1

1,2 63,9 3,2

1,3 69,7 3,3

1,4 75,5 3,4

1,5 81,5 3,5

1,6 87,6 3,6

1,7 93,6 3,7

1,8 99,8 3,8

1,9 106,1 3,9

2,0 112,5 4,0

Расхождение результатов титрований контрольного и опытного растворов не должно превышать 6,0 см3 0,1 н. раствора Na2S203 (1 см3 0,1 н. раствора тиосульфата натрия соответствует для данного количества субстрата гидролизу 4% гликозидных связей). Если оно меньше 0,5 или более 6,0 см3, то определение повторяют с большим пли меньшим количеством препарата.

Осахаривающую активность ОС3 (в ед./г) в культурах и препаратах Bacillus subtilis определяют по формуле OC3 = C]/(mt), где е, — количество единиц активности, найденное по табл. 6 в соответствии с результатами

Таблица 6

Количество 0.1 н. раствора тиосульфата Na,

Количество 0,1 н. раствора тиосульфата Na,

Перевод количества 0,1 н. раствора тиосульфата натрия в единицы ОС

Единицы ОС (с,)

Единицы ОС (г,)

Единицы ОС (.-,)

113,1 119,9 128,8 138,0 150,3 158,3 169,7 180,9 192,3 209,9 226,1

2,0 2,1 2,2 2,3 2,4 2,5 2,6 2,7 2,8 2,9 3,0

45,0 52,1 58,7 63,3 07,8 74,7 81,4 85,9 92,7 99,6 108,5

0,9 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4 1,5 1,6 1,7 1,8 1,9

250,6

278,2

312,

366,

452,

517,

585,

662,7

740,3

811,9

891,6

968,1

3,1 3,2 3,3 3,4 3,5 3,6 3,7 3,8 3,9 4,0 4,1 4,2

Количество 0,1 н. раствора тиосульфата Na, смэ

ление дисахарида мальтозы до глюкозы и выражается числом единиц мальтозы в 1 г препарата.

За единицу мальтазной активности принято такое количество фермента, которое в строго определенных условиях за 1 ч при 30°С катализирует расщепление 1 г мальтозы до глюкозы при степени гидролиза 30%.

Необходимые реактивы. 1%-ный раствор мальтозы (субстрат) — 1,05 г чистой мальтозы (моногидрата) растворяют в дистиллированной воде, добавляют 10 см3 ацетатного буферного раствора с рН 4,7 и доводят объем водой до метки в мерной колбе вместимостью 100 см3; 1 н. ацетатный буферный раствор с рН 4,7; 1%-ный раствор крахмала (индикатор); 0,1 н. раствор тиосульфата натрия; раствор серной кислоты (1:4); 0,1 н. раствор NaOH или КОН; 1 н. раствор НС1; 0,1 н. раствор йода.

Техника определения. В две пробирки длиной 18 и диаметром 2 см вводят пипеткой по 10 см3 1%-ного раствора мальтозы. Пробирки с субстратом помещают на 10 мин в термостат с температурой 30 + 0,2°С. Через 10 мин в пробирки вводят от 1 до 5 см3 исследуемого ферментного раствора. Общий объем реакционной смеси должен быть 15 см3. Если на определение берут меньше 5 см3 ферментного раствора, недостающий объем дополняют дистиллированной водой непосредственно перед введением ферментного раствора.

Через 1 ч после введения фермента действие его приостанавливают добавлением 2 см3 1 и. раствора НС1.

Содержимое пробирок после осахаривания количественно переносят, смывая дистиллированной водой, в коническую колбу вместимостью 300—400 см3, туда же добавляют пипеткой 20 см3

страница 26
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
кресло ch 993 low v
Компания Ренессанс монтаж лестницы цена - качественно, оперативно, надежно!

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(30.04.2017)