химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

аствора пектина, накрывают стаканы часовыми стеклами и ставят с промежутками в 15 мин в термостат с температурой 30±0,5°С. Через 15 мин в первые два стакана прибавляют по 10 см3 ферментного раствора, а в другие два — по 10 см3 инактивированного фермента (общий объем реакционной смеси должен быть равен 30 см3-Если для испытания берут менее 10 см3 ферментного раствора, то недостающий объем дополняют дистиллированной водой, которую вводят перед добавление»! ферментного раствора).

Через 1 ч после введения фермента пробу вынимают из термостата и быстро титруют из микробюретки 0,1 я. 56 раствором NaOH до рН 7,5, используя для этой цели потенциометр.

Пектинэстеразиую активность ПэС (в ед./г или ед./мл) вычисляют по формуле ПэС= 100а-100/(/тс), где 100 — число гидролизованных сложноэфирных связей, соответствующее 1 см3 0,1 н. раствора NaOH, мкэкв; о — количество 0,1 н. раствора NaOH, необходимое для титрования освободившихся в результате действия фермента карбоксильных групп (находят по разности между количеством щелочи, израсходованным на титрование опытного и контрольного растворов), см3; 100 — степень этерификации пектина, на которую ведут расчет; t—время гидролиза, мин; т — количество ферментного препарата, взятое для испытания, г; с — степень этерификации пектина, используемого в качестве субстрата.

Определение амилолитической активности (АС)

КОЛОРИМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД

(ПО ГОСТ 20284.4—74)

Метод основан на гидролизе крахмала ферментами амилолитического комплекса до декстринов различной молекулярной массы.

Амилолитическая активность характеризует способность амилолитических ферментов катализировать гидролиз крахмала до декстринов различной молекулярной массы и выражается числом единиц указанных ферментов в 1 г препарата.

За единицу активности амилолитических ферментов принято такое их количество, которое в строго определенных условиях температуры, рН и времени действия катализирует до декстринов различной молекулярной массы 1 г растворимого крахмала, или 30% от введен-ного в реакцию.

Необходимые реактивы. 1%-ный раствор крахмала (субстрат); ацетатный буферный раствор с рН 4,7; 0,1 н. Раствор НС1 — 8,2 см3 концентрированной соляной кислоты разбавляют дистиллированной водой до 1 дм3; ос-°вной и рабочий растворы йода; основной и рабочий Растворы ферментного препарата; основной и рабочий Растворы культуры гриба.

57

Приготовление 1%-ного раствора крахмала (су( страт). 1 г крахмала с учетом влажности помещают мерную колбу вместимостью 100 см3, добавляют 25 с> воды и перемешивают. Затем добавляют в колбу ец 25 см3 воды, помещают колбу с содержимым в кипящуч водяную баню, непрерывно перемешивая до полного ра; творения крахмала. После этого содержимое колб охлаждают, добавляют 10 см3 ацетатного буферног раствора с рН 4,7, объем жидкости доводят до метк дистиллированной водой и содержимое колбы перем; шивают. Раствор крахмала готовят в день проведен» анализа.

Приготовление растворов йода. Для приготовлен» основного раствора 0,5 г йода и 5 г йодида калия pav творяют в бюксе с притертой крышкой в малом коле честве воды. Содержимое осторожно перемешивают пр плотно закрытой крышке бюкса. Раствор после полк го растворения йода переносят в мерную колбу с прр тертой крышкой вместимостью 200 см3, объем доводя дистиллированной водой до метки. Основной раство хранят в темноте и используют в течение 1 мес.

Для приготовления рабочего раствора йода 2 см3 о; новного раствора разводят 0,1 н. раствором соляной ж лоты в мерной колбе вместимостью 100 см3. Перед у по треблением рабочего раствора фотоэлектроколорнме! ром проверяют его оптическую плотность, пользуясь сш тофильтром с максимумом светопропускания при \~ = 453 нм и кюветами с толщиной поглощающего езе слоя 1 см. Оптическая плотность раствора йода долЖ на быть равна 0,160±0,01. Оптическая плотность рабо чего раствора йода на ФЭК-60, ФЭК-56, ФЭК-56М со ставляет 0,220±0,01. В случае отклонения оптически плотности раствора от этой величины добавляют к рас твору несколько капель кислоты или основного растве ра йода.

Все пипетки, используемые при испытании, должн-1 иметь ватные тампоны (во избежание попадания в ра( твор слюны, содержащей амилазу).

Приготовление растворов ферментного препарат'

Для приготовления основного раствора 0,1 г исследи мого препарата взвешивают в стаканчике вместимость11' 25—30 см3. Навеску тщательно растирают стеклянн0' палочкой с небольшим количеством воды, количествен"'

58

переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят дистиллированной водой до метки, перемешивают и при необходимости фильтруют. Основной раствор ферментного препарата может храниться в течение одних суток при температуре от +2 до —4°С.

Рабочий раствор фермента готовят из основного раствора, разбавляя его так, чтобы в 5 см3 рабочего раствора содержалось такое количество фермента, которое обеспечивает в принятых условиях гидролиз крахмала от 20 до 70%- Для этого берут различное количество основного раствора (в зависимости от активности исследуемого

страница 21
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
купить арку для свадьбы
Рекомендуем фирму Ренесанс - лестницы в частном доме на второй этаж фото цены - качественно и быстро!
стул изо купить
решения для хранения документов дома

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(10.12.2016)