химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

ии высушенного до постоянной массы осадка пектата кальция, образующегося в результате обработки хлоридом кальция продуктов гидролиза пектина (в частности, пектиновой кислоты) пектолитическими ферментами.

Необходимые реактивы. 1%-ный раствор пектина (подсолнечного или свекловичного)—10 г пектина растворяют в 1 дм3 дистиллированной воды; 1 н. раствор уксусной кислоты — 60,03 г СН3СООН разбавляют дистиллированной водой до I дм3; 2 н. раствор хлорида кальция — 230—250 г СаСЬ растворяют в 1 дм3 дистиллированной воды; 0,1 н. раствор гидроксида натрия — 4 г NaOH растворяют в 1 дм3 дистиллированной воды.

Техника определения. Свежеприготовленный 1%-ный раствор пектина нагревают на водяной бане до температуры 37—38°С и пипеткой порциями по 50 см3 разливают в заранее приготовлен-ные сухие эрленмейеровские колбы вместимостью 100 см3. В эти же колбы добавляют ферментный раствор в количестве от 1 до 5 см3 (Для препарата) или 0,5 см3 10%-ной вытяжки из культуры гриба. Смесь тщательно перемешивают, колбы за-крывают ватными пробками и ставят на пектолиз в термостат с температурой 37—38°С.

Одну колбу с раствором пектина на пектолиз не ста-вят (контроль), а берут из нее 5 см3 раствора, добавляют 50 см3 0,1 н. раствора NaOH, перемешивают и оставляют на омыление на ночь.

Через 4 ч пектолиза из всех остальных колб отбирают пипеткой по 5 см3 раствора в чистые сухие химические стаканы вместимостью 400 см3. В каждый ста48

49

кан добавляют 50 см3 0,1 н. раствора NaOH, перемени-вают и оставляют на омыление на ночь.

После омыления во все стаканы с пробами, включая и контрольный, добавляют по 50 см3 1 н. раствора СН3СООН, перемешивают, через 5 мин добавляют по 50 см3 2н. раствора СаС12 и снова хорошо перемешивают—выпадает осадок пектата кальция. Раствору дакл постоять 30—40 мин, после чего содержимое стаканов кипятят в течение 5 мин.

Полученный после кипячения осадок отфильтровывают на заранее высушенных до постоянной массы беззольных фильтрах и тщательно промывают горячей водой до исчезновения в промывной воде иона хлора (проба с нитратом серебра). Затем осадок вместе с фильтром переносят в тот же бюкс, в котором высушивался ранее фильтр, и высушивают до постоянной массы в сушильном шкафу при температуре 103—105°С. Для вычисления истинного содержания пектина полученную величину массы умножают на коэффициент 0,92.

Пример. Масса бюкса о высушенным до постоянной массы фильтром — ,2)5,6660 г, масса бюкса с осадком на фильтре — 25,7.847 г, масса осадка — 0,1.187 г — эту массу принимаем за 100% содержания пектина. Таким же образом рассчитываем содержание пектина в ощытных пробах. Например, получена масса осадка 0,0442 г. Процент расщепления пектина за определенный промежуток времени (4 или 24 ч) находим по следующей пропорции: 0,1№7 г — 100% нерасщепленного пектина, 0,0442, г — х, *=37,2.% нарасщепленного пектина, отсюда количество расщепленного пектина составляет 62,8%.

ВИСКОЗИМЕТРИЧЕСКИИ МЕТОД

Метод основан на гидролизе пектина ферментным препаратом и определении степени его расщепления по величине снижения вязкости. Поскольку главную роль в снижении вязкости играет эндополигалактуроназа, метод в основном характеризует активность этого фермента.

За единицу пектолитической активности в этом методе принимают такое количество фермента, которое в строго определенных условиях при температуре 30°С за 10 мин катализирует гидролиз 1 г пектина со снижением вязкости раствора на 30%.

Необходимые реактивы. 1%-ный раствор пектина (рекомендуется яблочный пектин с содержанием метоксиль-50 ньгх групп 5—5,5% на воздушно-сухое вещество. При отсутствии яблочного пектина допускается использование свекловичного пектина с такими же показателями. Относительная вязкость 1%-ного раствора пектина при 30°С должна быть в пределах 16—19); раствор фермента.

Техника определения. Сухой вискозиметр Оствальда с диаметром капилляра 0,8 мм помещают в водяную баню с температурой 30°С. Пипеткой вводят в него 10 см3 1%-ного раствора пектина. Через 5 мин вводят необходимое количество дистиллированной воды и раствор фермента (от 1 до 5 см3). Общий объем реакционной смеси в вискозиметре должен быть равен 15 см3. После введения фермента сразу же по секундомеру отмечают начало пектолиза и одновременно тщательно перемешивают содержимое вискозиметра воздухом при помощи груши, надетой на узкое колено вискозиметра. Ровно через 10 мин после введения фермента замеряют вязкость по времени истечения реакционной смеси.

Параллельно ставят контрольный опыт определения вязкости (времени истечения) исходного раствора пектина, который проводят так же, только без фермента, а с добавлением 5 см3 воды.

При анализе малоактивных препаратов контрольное определение следует проводить с ферментным раствором, инактивнрованным кипячением в водяной бане в течение 1 ч.

В большинстве случаев при анализе активных препаратов на определение берут растворы с таким разбавлением, что вязкость их практически не отличается от вязкости воды.

Контрольное определение вязкости проводят

страница 18
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
обслуживание фанкойла
дверные ручки производитель россия
ремонт арок авто
диагностика чиллеров цены

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(26.09.2017)