химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

пектиновой кислоты— до и после гидролиза 1%-ного раствора пектина в течение 1 ч при температуре 37—38°С. Пекголигиче-ская активность по этому методу выражается в единицах количества фермента, которое катализирует расщепление в этих условиях 1 мг пектина.

46

Необходимые реактивы. 1%-ный раствор пектина (свекловичного) — 10 г пектина растворяют в 1 дм3 дистиллированной воды; 0,1 н. раствор гидроксида натрия— 4 г кристаллического NaOH растворяют в 1 дм3 дистиллированной воды; 1 н. раствор уксусной кислоты— 60,12 г ледяной уксусной кислоты растворяют в 1 дм3 дистиллированной воды; 5%-ный раствор сульфата меди — 50 г CuS04 растворяют в 1 дм3 дистиллированной воды; 0,01 н. раствор тиосульфата натрия; 2 н. раствор серной кислоты — 98 см3 концентрированной H2S04 плотностью 1,84 растворяют в 1 дм3 дистиллированной воды; 1%-ный раствор крахмала; растворы ферментных препаратов и вытяжки.

Техника определения. Для определения пектолитиче-ской активности фермента в четыре сухие эрленмейеров-ские колбы вместимостью 100 см3 отбирают по 50 см3 1%-ного раствора пектина, Предварительно нагретого до температуры 37—38°С.

В первую и вторую колбы добавляют по 5 см8 исследуемого ферментного раствора, в третью и четвертую — по 5 см3 дистиллированной воды (контрольные пробы). Общий объем реакционной смеси как опытных, так и контрольных Проб равен 55 см3.

После этого содержимое колб перемешивают, закрывают колбы ватными пробками и ставят в термостат при температуре 37—38°С на 2 ч для проведения гидролиза пектина.

Затем из каждой колбы отбирают по 5 см3 реакционной смеси в сухие химические стаканы вместимостью 400 см3, добавляют по 50 см3 0,1 н. раствора NaOH и проводят омыление негидролизованного пектина в течение 12—16 ч.

После омыления во все стаканы добавляют по 50 см3 1 н. раствора уксусной кислоты для нейтрализации щелочи и через 5 мин — по 50 см3 5%-ного раствора CuS04 Для осаждения пектиновой кислоты в виде пектата ме-Ди. Реакционную смесь выдерживают 30—40 мин при комнатной температуре, после чего содержимое стаканов подогревают до кипения и образовавшийся осадок Пектата меди отфильтровывают через беззольный фильтр (диаметр 9 см).

Осадок тщательно промывают горячей дистиллированной водой до исчезновения в промывных водах реак47 ции на ион меди. Для этого берут 1 см3 25%-ного рас-; твора аммиака и к нему прибавляют 2—3 капли промывных вод из воронки. Осадок считается промытым, когда при прибавлении промывных вод к аммиаку не образуется голубовато-синего окрашивания.

Промытый осадок пектата меди вместе с фильтратом переносят в эрленмейеровскую колбу вместимостью 250 см3 для титрования. В эту же колбу добавляют 40 см3 горячей дистиллированной воды, 8—10 капель 25%-ного раствора аммиака и перемешивают. Затем к раствору прибавляют 10 см3 2н. раствора H2SO4, 5 г йодида калия (кристаллического) и оттитровывают выделившийся йод 0,01 н. раствором тиосульфата натрия в присутствии 1%-ного раствора крахмала (2—3 капли), как индикатора.

Величина пектолитической активности ПкА ферментных препаратов определяется по следующей формуле; ПкА = с(а—b)BI(rallt), где с—количество пектина, определяемое для каждой партии пектина кальций-пек-татным методом, содержащееся в 5 см3 раствора, взятого на омыление, мг; а — количество 0,01 н. раствора тиосульфата натрия, пошедшее на титрование 5 CMj контрольного раствора пектина, см3; Ь — количество 0,01 и. раствора тиосульфата натрия, пошедшее на титрование 5 см3 раствора пектина после обработки ферментным препаратом, см3; б —общий объем реакционной смеси, см3; —количество реакционной смеси, взятое на омыление, см3; Я — количество препарата, содержащееся в объеме ферментного раствора, взятого на определение с учетом разведения, г; t — время гидролиза пектина, ч.

Для определения пектолитической активности устанавливаются величины а и Ь, и если Ь составляет больше 60°/о от величины а, то полученные показатели подставляют в расчетную формулу для нахождения ПкА. Если величина b составляет меньше 60% от а, то определение активности проводится при меньшем разведении ферментного препарата, т. е. берут не 5, а 2,5 см3 раствора.

Пример. На анализ взято 0,06 г препарата. На титрование контрольной пробы пошло 0,14 см3 0,01 н. раствора тиосульфата налрия, или с учетом поправки к титру (0t,96) а=9,1'4-01,99 = 8,77 см'.

На титрование опытной пробы пошло 7,44 см3 0,01 н. раствора тиосульфата натрия, или с учетом поправки к титру (0,96) Ь = =7,44-0,9'6=7,14 см3.

При условии содержания в свекловичном пектине ?й,8% пектина в 55 ом3 реакционной смеси содержится 0,5-78,8: 10a=0i,39i4 г пектина.

Из 55 см3 на омыление берется 5 ом3, следовательно, с=0.394 • • 5;б|5=.0,'03бв г, или 35,81 мг пектина. Время гидролиза пектина f=2 ч. Объем реакционной смеси 5=65 см3.

Количество реакционной смеси, взятой иа омыление, Г=5 см3.

Следовательно, П,кА=с(а—Ь)В/(Гflat) =35,8(8,77—7Щ ?

.55/(8,77.5? 0,005? 2) =7319 ед. па 1 г препарата.

КАЛЬЦИИ-ПЕКТАТНЫЙ МЕТОД

Метод заключается в количественном определен

страница 17
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
мониторы для камер заднего вида
купить обшивку на переднии двери авто2109-2114
адвокат по жилищным вопросам москва отзывы
курсы косметолога в москве юзао

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(07.12.2016)