химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

ак) К • Р, где а и ак—количество 0,1 н. раствора NaOH, пошедшее на титрование соответственно опытной и контрольной пробы, см3; К—поправка к титру щелочи; Р — коэффициент, учитывающий разведение и пересчет на 1 г препарата культуры или на 1 см3 жидкого ферментного препарата.

Пример. На определение протеолитической активности очищенного препарата взяли 1С1 см3 0,1%-ного раствора npenapaTai, На титрование опытной пробы пошло 3,5 ом3 0,1 н. раствора NaOH, на титрование контрольной пробы—1,5 см3. Поправка к титру щелочи — 1,02:

Исходный раствор ферментного препарата имел концентрацию 0,1%. На анализ взяли 10 см3 этого раствора и провели реакцию в объеме 30 см3, а затем объем довели до 50 см3 и оттуда отобрали на непосредственный анализ 10 см3 смеси. Схема разведения ?имеет вид: 0,1 r-WLOO-4O-*S0l-*10,

Подсчитываем величину ПС: ПС= (3,5—1,5) 1,02-50-100/(10-10-•0,1) = 1010 ед. на 1 г препарата.

Определение пектолитической активности (ПкА)

МЕТОД ПО ГОСТ 20284.3—74

Метод основан на определении пектолитических ферментов при каталитическом расщеплении пектина. За единицу пектолитической активности в данном методе

44 принято такое количество фермента, которое катализирует гидролиз 1 г пектина до продуктов, не осаждаемых Z11SO4, при проведении гидролиза при температуре. 30°С в течение 1 ч при рН реакционной среды 4,0 и соотношении фермент—субстрат в реакционной среде, обеспечивающем гидролиз 30% пектина, взятого на реакцию.

Пектолитическую активность выражают числом указанных единиц в 1 г испытуемого препарата. Количество продуктов гидролиза пектина, не осаждаемых сульфатом цинка, определяют на интерферометре ИТР-2.

Необходимые реактивы. 1%-ный раствор пектина (субстрат); 15%-ный раствор сульфата цинка—15 г ZnS04 растворяют в 100 см3 дистиллированной воды.

Приготовление 1%-ного раствора пектина (субстрат). Навеску пектина, взятую с таким расчетом, чтобы в 250 см3 раствора было 2,5 г чистого пектина (по данным испытания), тонкой струей всыпают при непрерывном перемешивании в коническую колбу вместимостью 300 см3, куда предварительно наливают около 130 см3 дистиллированной воды. Перемешивают 10 мин, после чего раствор оставляют на 3 ч при комнатной температуре. По истечении этого времени в раствор добавляют при перемешивании определенное количество концентрированного раствора аммиака для установления рН 4,0. Затем объем раствора доводят дистиллированной водой до 250 см3, тщательно перемешивают и фильтруют через два слоя марли. Раствор пектина готовят за 2—3 ч до проведения испытания. Окраска раствора должна быть светло-серой. Раствор пектина можно использовать в течение 4 сут при условии хранения его в холодильнике.

Техника определения. Для испытания берут несколько (по количеству исследуемых проб) пробирок диаметром 2 см и высотой 18 см. В каждую пробирку наливают по 20 см3 субстрата и ставят их на 10 мин в ультратермостат или водяную баню с постоянной температурой 30±0,2°С, чтобы растворы приняли постоянную температуру. Затем, не вынимая пробирки из ультратермостата, наливают в каждую по 10 см3 испытуемого ферментного раствора, содержимое каждой пробирки тщательно перемешивают и оставляют в ультратермостате при 30°С на 1 ч для проведения пектолиза. По истечении этого времени пробирки с реакционной смесью

45 вынимают из ультратермостата, добавляют по 2 см3 15%-ного раствора ZnSO* для инактивации фермента и осаждения продуктов пектолиза. Содержимое пробирок тщательно перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр. Если фильтрат будет мутным, необходимо заново профильтровать раствор через тот же фильтр до получения прозрачного раствора. Полученный раствор является исследуемым.

Одновременно готовят контрольный раствор. Для этого в пробирку наливают 2 см3 15%-ного раствора ZnSO^, 10 см3 исследуемого ферментного раствора и 20 см3 субстрата. Содержимое пробирки тщательно перемешивают в течение 2—3 мин и фильтруют. Затем исследуемый раствор помещают в левое отделение кюветы интерферометра с длиной грани 4 см, а контрольный раствор — в правое отделение и измеряют величину смещения интерференционных полос, возникающую вследствие различных показателей преломления контрольного и исследуемого растворов. Отсчет ведут по шкале барабана прибора (я). Для обеспечения точности испытания необходимо разведение ферментов подбирать таким образом, чтобы получать показания от 400 до 1250.

Пектолитическую активность ПкА (в ед./г) вычисляют по формуле ПкА= (0,06425л+ 19,62)/ (т-1000), где 0,06425; 19,62; 1000—постоянные коэффициенты, полученные при математической обработке экспериментальных данных по изучению зависимости между количеством образующихся продуктов гидролиза пектина в условиях метода и количеством единиц активности фермента, взятого на анализ; п — показание прибора для данного разведения; т — количество ферментного препарата, содержащееся в 10 см3 ферментного раствора, взятого на определение, г.

ОБЪЕМНЫЙ МЕДНЫЙ МЕТОД

Метод заключается в определении йодометрическим способом связанной меди — медной соли

страница 16
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
ремонт холодильника Nord 186-7-029
лофт на фабрике красный октябрь
MT A2011R
Банкетки и скамейки, изготовление банкеток и скамеек

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(08.12.2016)