химический каталог




Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева, Ю.П.Грачев, М.С.Мосичев, Е.Г.Борисенко и др.

накаливания, тумблер, включающий в цепь стабилизатора водородную лампу или лампу накаливания. Отверстие в передней стенке шасси открывает доступ к шлицу оси потенциометра установки тока стабилизатора.

Для работы на приборе следует установить необходимый источник излучения в осветителе (водородную лампу или лампу накаливания), рукоятка 10 при этом должна находиться в положении «закрыт»; включить прибор по инструкции, прилагаемой к каждому прибору; поставить рукоятку 18 в одно из положений «1», «2», «3», «4», потенциометр чувствительности — в среднее положение; вращая рукоятку 23, установить требуемую длину волны; установить при помощи рукоятки 17 светофильтр для данной области спектра; перемещая каретку рукояткой 16, установить на пути светового пуч-34 ка эталон; поставить рукоятку переключателя 19 в положение «выкл.»; скомпенсировать темновой ток фотоэлемента рукоятками грубой 18 и плавной 14 регулировки темнового тока; открыть фотоэлемент, поставив рукоятку 10 шторки переключателя в положение «откр.»; вращая рукоятку 7 механизма изменения ширины щели, установить стрелку миллиамперметра на условный нуль (стрелка миллиамперметра подводится к условному нулю плавно рукояткой 21 потенциометра чувствительности. При необходимости изменить рабочую ширину щели переключают рукояткой 20 пределы чувствительности и снова компенсируют темновой ток); перемещая каретку рукояткой 16, установить на пути светового пучка образец и спять показания прибора.

§ 3. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ

АКТИВНОСТЕЙ В РАСТВОРАХ

Приготовление ферментных растворов

При определении ферментативных активностей вначале готовят исходные ферментные растворы, а затем в зависимости от метода определения ферментативной активности соответствующим разведением приготавливают рабочие растворы.

Исходный раствор из поверхностной культуры готовят следующим образом: берут 10 г сырой культуры (влажностью 40—50%) или 5 г воздушно-сухой культуры (влажностью не более 12—14%) и помещают в фарфоровую ступку. Отдельно в мерном цилиндре готовят 10°/о-ный буферный раствор (10 см3 соответствующего буфера и 90 см3 дистиллированной воды).

Взятую навеску культуры тщательно растирают пестиком с кварцевым песком или толченым стеклом с Ю—20 см3 забуференкой воды (10 см3 буферного раствора и 90 см3 дистиллированной воды) в течение 10— 15 мин, затем, если позволяют размеры ступки, выливают оставшуюся забуференную воду, перемешивают и помещают эту смесь на 30 мин в термостат при 30°С. Если вместимость ступки небольшая, после растирания содержимое ее переносят количественно в стакан с помощью оставшейся забуферекной воды (общий объем ее Должен быть 100 см3) и также выдерживают 30 мин

2* 35 при 30°С. Выдержка в термостате необходима для наиболее полного извлечения ферментов из культуры продуцента. После настаивания смесь отфильтровывают через складчатый бумажный фильтр и фильтрат используют как исходный раствор при определении ферментативных активностей.

Ферментативные активности в культуральной жидкости, диффузионной вытяжке или жидком концентрате определяют непосредственно в данных растворах или производя необходимые разведения с учетом особенностей методов определения активностей.

При определении ферментативных активностей очищенных препаратов, полученных осаждением органическими растворителями, высаливанием или высушиванием на распылительной сушилке, в качестве исходного раствора используют 0,1%-ные растворы препаратов.

Наилучшее растворение препаратов достигается при растирании их в фарфоровой ступке с небольшим количеством толченого стекла и 10—15 см3 забуференной воды, После растирания смесь переносят количественно в мерную колбу на 100 см3 и доводят до метки забуференной водой. При наличии нерастворенного осадка его отфильтровывают через складчатый фильтр; прозрачный фильтрат служит исходным раствором для определения ферментативной активности.

Раствор ферментных препаратов может храниться в течение одних суток при температуре от +2 до —4°С.

Определение протеолитической активности (ПС)

МЕТОД AHCOHA В МОДИФИКАЦИИ

Метод основан на гидролизе белка казеината натрия препаратом фермента, находящимся в исследуемом растворе, с последующей инактивацией фермента и осаждением негидролизованного белка трихлоруксусной кислотой (ТХУ).

Протеолитическая активность характеризует способность ферментов катализировать расщепление белка до пептидов и аминокислот и выражается числом единиц протеазы в 1 г препарата.

За единицу протеолитической активности (ПС) принимают такое количество фермента, которое за 1 мин 36 при 30°С превращает в неосаждаемое трихлоруксусной кислотой состояние казеинат натрия в количестве, соответствующем 1 мкмоль тирозина (1 мкмоль тирозина равен 0,181 мг).

Активность грибных и бактериальных протеиназ определяют при следующих значениях рН; 2,5±0,2 — кислая протеиназа; 3,5±0,2—кислая протеиназа; 7,2± ±0,2—нейтральная протеиназа; 9,5±0,2 — щелочная протеиназа.

Необходимые реактивы. 0,1 М универсальный буферный раствор — готов

страница 12
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Скачать книгу "Лабораторный практикум по технологиям ферментных препаратов" (1.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
керамическая плитка chalet brillo bisel
Candino C4490.1
автокад для дизайна помещений
этажерки стеклянные

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(06.12.2016)