химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

ся различные твины и спаны, и желчные кислоты, которые относятся к группе анионных ПАВ. Но ПАВ также по-разиому действуют на рост микроорганизмов и синтез липаз. Так, Oospora lactis наибольшую способность к синтезу липаз проявляет только в присутствии твина-80, особенно при наличии других источников липидов в среде. А для R. microsporus все другие ПАВ оказывали стимулирующее действие, а твин-80 угнетал биосинтез. Многие авторы отмечают ингибирующий эффект ПАВ на биосинтез липаз. Это вопрос сложный, он требует индивидуального экспериментального подтверждения и изучения для каждого продуцента. Влияние вида липидного компонента в среде на биосинтез липазы можно продемонстрировать на примере роста R. oryzae 14-14, результаты которого представлены в табл. 2.35 (по данным Е. А. Некрасовой, И. М. Грачевой, 1984).

Из табл. 2.35 видно, наибольшее воздействие оказывают на биосинтез липиды дрожжей С. guilliermondii, введение которых в

Лнпидный компонент

Активность лнпазы, % к контролю

78 98

Пальмитиновая кислота ~ Пальмитолеиновая кислота (Ct,:l)

Стеариновая кислота (CiH:0) Олеиновая кислота Лнноленовая кислота (С1я:2) Лннолевая кислота (С1Н:3) Микробные липиды Rhodotorula aurantiaca Rhizopus oryzae Myrothecium roridum Candida guilliermondii

91 80 73

95 120 175 280

Таблица 2.35

Лнпидный компонент Активность

лнпазы, %

к контролю

Оливковое масло (конт- 100

роль)

Подсолнечное масло 98

Горчичное масло 96

Кукурузное масло 93

Хлопковое масло 80

Трипальмннитин 79

Тристеорин 98

Триолеин 100

Фосфолипиды 195

Глицерин 80

240

среду позволило в 2,8 раза повысить выход липазы. Исследования влияния концентрации этих дрожжевых липидов в среде на биосинтез липазы показали, что она должна быть на уровне 0,7— 0,9 %. Далее при изучении влияния структурных компонентов липидов С. guilliermondii на биосинтез липаз было найдено, что наибольший стимулирующий эффект приходится на долю фосфолипи-дов, введение которых в количестве 0,8—0,9 % позволяет получить липолитическую активность до 12 500 ед. ЛА/мл. Для культуры С. guilliermondii были испытаны следующие анионные ПАВ: цетилсукцинат, цетилмалат, цетилартрат, ацетилцетилартрат, це-тилцитрат, янол-1 и -2, цитрол-1 и -2. Дополнительное введение в среды ПАВ также стимулирует в ряде случаев биосинтез липаз в этой культуре. Наилучшие результаты (до 16 000—18 000 ед./мл) получены при добавлении цетилсукционата, цетилмалата, янтола-2 и цитрола-2. Янтол-1 и цитрол-1 резко тормозят процесс биосинтеза для всех исследуемых концентраций. Для изучения влияния неионогенных ПАВ на биосинтез липазы R. oryzae 14-14 были испытаны твин-80 и -60, эфиры полиглицеринов (Т-2) и моноглицерины в концентрациях от 0,05 до 0,6%. Эксперимент показал, что моноглицериды в концентрации 0,1 % способны повысить био-синтетическую способность культуры приблизительно в 1,5 раза. На среде, содержащей соевую муку, кукурузный экстракт, фосфолипиды и моноглицериды, активность внеклеточной липазы к 50 ч роста достигала 21 000—22 000 ед. ЛА/мл, что в 4—4,5 раза выше, чем на средах без фосфолипидов и моноглицеридов.

Условия культивирования. Биосинтез ферментов определяется не только составом среды, но и выбранными условиями культивирования продуцента (температура, длительность культивирования, рН среды, посевной материал, аэрация). На примере R. oryzae можно показать, как велика роль этих факторов в накоплении липаз в культуральной жидкости (рис. 2.46). Из рис. 2.46, а видно, что только при исходном рН среды 5—6 и температуре 27—30°С можно получить максимальное накопление фермента. Длительность культивирования не должна превышать 48—50 ч (рис. 2.46,6). Наибольшей биосинтетической способностью культура обладала при засеве среды 20-часовым посевным материалом в количестве 2 % по объему среды и т. д. При использовании других продуцентов условия выращивания всякий раз устанавливаются экспериментально.

Выделение ферментов. Получение препаратов липаз и их очистка проводятся на основе фильтратов культуральной жидкости. Биомасса продуцента и твердая взвесь среды отделяются центрифугированием или фильтрованием. Жидкая фаза культуры стабилизируется солями и концентрируется, например, путем ультрафильтрации или вакуум-выпаривания. Полученный концентрат может непосредственно высушиваться для получения технических препаратов с индексом ГЗх. Однако чаще проводят выделение фермента методом осаждения органическими растворителями или сульфатом аммония. Липазы весьма чувствительны к воздей241

а —влияние температуры ствию растворителей, так как под действием их довольно часто наблюдается частичная денатурация белка, что может привести, в ряде случаев к нарушению организации активного центра и потере активности. Поэтому для выделения липаз высаливанием чаще применяют сульфат аммония.

Для получения высокоочищенных препаратов липаз широко используются все ме

страница 96
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
курсы программе эксель на шаболовке
отопительные котлы для дома на дизельном топливе цена
филармония .концерт киркорова
канальный кондиционер gc/gu-dh192hwn2 цена

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(03.12.2016)