химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

29). «и»"н°и среде,

Концентрация источника углерода в среде. %

Таблица 2.29*

8,4-Ю'

Активность глюкаиазы в зависимости от количества конидии на 100 мл питательной среды. % „ максимальной

14,6 56,1

52,8

13,5 80,7 67,4

6.9 87,3 98,7

3,6.10'

12,2 100,0 86,4

' По данным О. Н.Быноной и др., (1983).

но слабокислый — от 4,8 до 5,3. Затем происходит резкий сдвиг в кислую зону рН — до 2,5—3,0 и только в самом конце наблюдается небольшой подъем рН на 0,3—0,5 (см. рис. 2.39, кривая 2). При культивировании бактерий исходный рН лежит в нейтральной зоне (около 7,0); в течение первых 12—20 ч он несколько понижается — до 6,2—6,4, а затем происходит подщелачивание до рН 7,0—7,3. Снижение рН иа первом этапе культивирования вызывает подавление биосинтетической способности бактериальных продуцентов, поэтому рекомендуется подтитровка среды или введение подпитки с более высоким значением рН (табл. 2.30). В табКонечное значение рН

рН среды после добавления

Активность 3-глюканазы, % от максимальной

Таблица 2.30

Исходное значение рН питательной среды, взятой для добавления

Физиологические особенности каждого продуцента определяют продолжительность выращивания микроорганизма и образования им гемицеллюлаз. Во многом этот показатель определяется составом среды и ее концентрацией. Так, для A. foetidus — продуцента В-1,3: 1,4-глюканазы наивысшая активность в культуральной жидкости отмечается в период 64—66 ч роста культуры (рис. 2.39). Для В. subtilis 402 максимум образования В-глюканазы наблюдается в культуральной жидкости на 24—30 ч роста культуры, а при дробном введении основного субстрата длительность процесса сокращается до 17—18 ч (рис. 2.40).

Др 1гЭ84Б>Ь'КОВОЯ' °' Соседом и

На длительность культивирования оказывает большое воздействие не только вид продуцента, но и рН среды. Для грибных культур — продуцентов гемицеллюлаз начальный рН среды обыч229

Количество подаваемого воздуха в ферментатор, л/мин

Активность В-глюканазы, ед./мл

300 400 500 600 700

28,2 40,1 56,0 63,7 47,0

Скорость растворения кислорода. г/(л.ч)

0,92 1,38 1.42 1,95 2,25

заключается в том, что в течение первых 8—10 ч создаются оптимальные условия для роста культуры (подача воздуха около 500 л/мин), затем аэрация усиливалась до 600 л/мин и после 12 ч роста дополнительно включалось устройство для перемешивания среды (около 200 мин-1). Эти мероприятия позволили увеличить продуктивность штамма на 26—41 %.

Все используемые в производстве продуценты образуют сложный комплекс гемицеллюлазных ферментов, который в зависимости от состава может быть использован для самых разных целей.

Выделение ферментов. Препараты гемицеллюлаз можно получать путем осаждения органическими растворителями, нейтральными солями и при использовании различных видов хроматографии.

На полноту осаждения гемицеллюлаз оказывают заметное влияние следующие условия: рН ферментного раствора, концентрация сухого вещества, отношение ферментного раствора к органическому растворителю, наличие стабилизаторов, ингибиторов и т. д.

3J5 if V sp SS NK> *? H» f-V Щ рНдхрпентногс раствора Овжмное отчешете ферментного раствора л растворителю

Рис. 2.41. Влияние рН среды (а) и соотношения растворителя (б) иа полноту осаждения ферментов нз культуральной жидкости В. subtilis 402: / — ваопропиловый спирт: 2 — ацетон; S — этиловый

СПИРТ

402 — продуцента эндо-В глюканазы можно проследить ряд таких зависимостей (рис. 2.41). Из рисунка видно, что наиболее полно В-глюканаза перехо- дд! дит в осадок под действием изопропилового спирта (1:4,5) при рН 4,3, когда можно перевести в осадок до 93—94 % исходного фермента в активном состоянии.

Вопросам выделения и очистки различных ферментов комплекса гемицеллюлаз посвящено очень

целлюлаз посвящено очень юлаз мало отличается от

представлены в табл. 2.32 и на рис. ^• формы, которые

большинство глюканаз^меет мно^твениы^ф^^ ^ ^

отличаются по ряду своисш « »«

10,3 20,5

60,0 16,8

24,8 49,2

Таблиц» 2.32*

Активность 1,3-^-глюкамаэ Выход, Степень

Этап очистки суммарная, ед./*1- удельяая, ед./мг белка % очистки

7040 4220 1180

Исходный ферментный препарат

Амииосилохром 94'!»

14.2 63,8 335,6

2,0 1.4 4,1

34,1 153,1 805,5

Акрилекс Р-150 -М-"0

140

98 290

4,10 0,64 0,36

Сефадекс G-75 Глюканазы 1

19,0 113,8 354,1

0,9 0,6 1.9

45,7 273,3 850,0

II Ш

64 41 136

1,40 0,15 0,16

Бкогель Р-300 Глюканазы

II

25,8 23,8

0,25 0,10

III „

62,0 57,1

18

0,29 0,14

Дополнительные этапы очистки глюканазы I

дЭАЭ-сефадекс А-50

И. В. Зайкниой, Н. А. Тиуиовой и др. (1986).

Сефадекс G-200

231

230

Глюкана^Тапа3иЫ1П^ИгЮТСЯ,^ Н30^ектрическими точками.

т^З^,11.«йЧСмайш1 В КИСЛ0Й зоне имеют Р1 соответственно d,7, 4,0 и 4,3. Эти глюканазы несколько отличаются

100,0 100,0

4,7 4,5

1,3 1,6

0 0

0 0

0 0

0 0

0 0

59,0 48,7

0,5 0,1

100,00 4,90 1,50 0 0 О О

о

45,40 0,03

по своей субстратной специфичности (табл. 2.33) отлича1

страница 92
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
ватерпольный мяч купить спб
установка акустической системы авто
обучение дизайну интерьера летом в москве
банкетки арива тверь

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(05.12.2016)