химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

ников азота особо сильно сказывалось на биосинтезе целлюлаз грибом Т. longibrachiatum (табл. 2.22).

Минеральные вещества и ПАВ. Продуценты целлюлаз весьма чувствительны к минеральному питанию. Известно, что для роста микроорганизмов необходимо наличие в среде фосфора, серы, калия, натрия, магния, а также ионов железа, марганца, кальция и ряда других металлов. Однако не все ионы оказывают положительное влияние на биосинтез целлюлаз. В литературе отмечается, что ионы Co2+, Li+, Zn2+, Ва+ и Na+, как правило, снижают уровень биосинтеза целлюлаз на 25—45%.

Имеются сведения, что добавление в среду поверхностно-активных веществ (ПАВ) увеличивает продуцирующую способность микроорганизмов по отношению внеклеточных целлюлаз. Внесение олеата натрия в среду с целлобиозой в количестве 0,1 % приводит к стократному увеличению биосинтеза целлюлаз Т. viride. Предполагается, что ПАВ способствует дсступу целлобиозы к связанной в клеточной мембране трансферазе, которая обусловливает образование индуктора, например софорозы. Кроме того, введение ПАВ, например твинов, способствует повышению клеточной проницаемости. Онн влияют на транспорт питательных веществ внутрь клетки и секрецию из нее, что приводит к возрастанию продуктивности клеток и повышению уровня биосинтеза внеклеточных ферментов.

Рнс. 2.30. Влияние добааления твинов и жирных кислот на биосинтез целлюлаз Т. longibrachiatum (по данным М. В. Гернет, В. М. Поляковой и др., 1984): а — добавление твннов: 1 — твнн-40; 2 —твин-60; 3—твнн.80: б —добавление жирных кислот: /' — пальмитиновая; Y — стеариновая; 3' — олеиновая

Стимулирующее влияние твинов, особенно твина-80, на биосинтез целлюлаз было отмечено при культивировании Т. longibrachiatum (рнс. 2.30, а). Подобное явление наблюдалось и ранее на культуре A. terreus 17/р (Д. Ю. Исманлова, 1977). Введение твннов в среду вызывает одновременно со стимуляцией синтеза целлюлаз некоторое торможение в накоплении биомассы, которое неодинаково в присутствии различных твинов. Возможно, влияние оказывает состав ПАВ. Известно, что полиоксиэтилен-сорбитанмоноалконаты получают ангидридизацией и этерификаци-ей сорбита соответствующей жирной кислотой с последующим каталитическим оксиэтилнрованн-ем сорбнтанмоноалконата. Для твина-40, -60 и -80 такими жир211

ными кислотами являются соответственно пальмитиновая, стеариновая и олеиновая. Опыты с введением в среду этих кислот позволили получить эффект стимуляции биосинтеза целлюлаз, аналогичный тому, что имел место при добавлении твинов (рис. 2.30,6). Если сравнивать эти данные с контролем (без введения ПАВ), то эффект от ПАВ и соответствующей кислоты сопровождался снижением количества биомассы, изменением морфологии культуры (появление вытянутых и вздутых форм), увеличением продолжительности культивирования с одновременным резким увеличением синтеза целлюлаз. Однако вышеуказанные компоненты среды (олеиновая кислота и твин-80) не используются при конструировании промышленных сред, так как они, с одной стороны, очень дороги, а с другой — увеличивают время выхода культуры на максимальное накопление в среде целлюлаз.

Условия культивирования. Большое влияние на биосинтез целлюлаз оказывают условия культивирования. Отличительная особенность большинства продуцентов целлюлаз — это большая длительность культивирования. Обычно максимум активности приходится иа 4—8 сут. Анализ данных показывает, что в культуральной жидкости при оптимальных условиях выращивания может накапливаться от 2 до 22 ед. АФБ/мл и от 200 до 500 ед. КМЦ/мл.

Способ получения препарата

Осаждение этанолом (1:3) Осаждение ацетоном (1:2) Осаждение сернокислым аммонием (0,7 полного насыщения)

Распылительное высушивание культуральной жидкости

212

Выделение фермента. На основе глубинной культуры можно получить технические препараты целлюлаз и очищенные целлюлолитические препараты. Технические препараты получают путем высушивания распылением концентратов культуры без отделения твердой фазы или выпаривания ее жидкой фазы. Для снижения потерь при сушке в культуральную жидкость вводят стабилизаторы, чаще всего небольшие количества некоторых солей. Комплексные очищенные целлюлолитические препараты, например из Т. viride, можно получить осаждением органическими растворителями и высаливанием сульфатом аммония (табл. 2.23). Из таблицы видно, что способ получения препарата оказывает существенное влияние на комплекс целлюлаз в данном препарате, даже если все они получены на основе одного продуцента и из одной культуральной жидкости.

Как говорилось в начале этой главы, целлюлазный комплекс очень сложный и пока изучен недостаточно, поэтому нет установившейся технологии по получению определенных индивидуальных ферментов этого комплекса. Это осложняется еще тем, что качественный и количественный состав целлюлазных комплексов варьирует в широких пределах в зависимости от продуцента, состава среды, условий культивирования и способа выделения отдельных компонентов.

Для получения очищенных препаратов целлюлаз используют комбинацию

страница 86
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
Акция - кликни и получи скидку в KNS. Промокод "Галактика" - розетки внешние - хорошее предложение от супермаркета компьютерной техники.
двигатели для вентилятора wrw
wolf se 160 канальный водяной нагреватель 2916004
аренда колонок с усилителем

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(27.02.2017)