химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

ьная амилаза (1,4-А-/)-глюкан-4-А-(1,4-А-глюкаио)-траисфераза (циклизующая), КФ 2.4.1.19), впервые была найдена в культуре В. macerans. Она цик-лизует часть цепи 1,4-А-глюкана путем образования 1,4-А-глюко-зидной связи. Рабочее название этого фермента циклодекстрин-глюканотрансфераза (ЦДГТ). При воздействии на крахмал и аналогичные субстраты образуются циклические нередуцирующие декстрины (декстрины Шардингера) различных размеров, состоящие из 6—8 и более остатков глюкозы. Эта реакция обратима. Фермент также способен перестраивать линейную структуру маль-тодекстринов без циклизации.

В. macerans образует сложный комплекс ферментов, который помимо ЦДГТ содержит по меньшей мере еще четыре амилазы. Эта система катализирует не менее трех реакций, которые включают процессы циклизации, ассоциирования и неупорядоченной деградации. Исследования по расшифровке механизма действия ЦДГТ-системы показывают, что все эти ферменты внеклеточные и что соотношение декстринирующей, амилазной, циклодекстрин-синтетазной и циклодекстринглюканотрансферазной активностей в культуральной жидкости В. macerans остается постоянным. В связи с этим были высказаны предположения, что все эти активности принадлежат одному ферменту. Я. Кобаяши с сотр. в 1978 г., работая с кристаллическим ферментом, экспериментально подтвердил это предположение.

Были изучены свойства ЦДГТ (табл. 2.5). Первоначально предполагалось, что этот фермент состоит из двух субъединиц, но в 1979 г. А. Ставн и П. Е. Гранум установили, что это одноцепо-чечный белок с молекулярной массой 67 ООО.

По данным Де Пннто и Камп-белла, 1968

По данным Я. Кобаяшн и др., 1978

Таблица 2.5

Показатель

Молекулярная масса Изоэлектрическая точка Оптимальный рН Оптимальная температура,

145 000

6,0 60

139 300 6,1-6,2 3,33

67 000 5.4 5,4-5,8 60 5,7

По данным А. Ставка и П. Е. Гранума, 1979

которые образуют фермент, очень близкий по свойствам к ЦДГТ из Bacillus macerans. Практическое использование циклодекстри-нов имеет большую перспективу, так как эти соединения находят применение при изготовлении различных лекарств пролонгированного действия.

2.1.3. Получение амилолитических препаратов

Амилолитические ферменты могут применяться в виде поверхностных и глубинных культур, жидких концентратов, сухих препаратов различной степени очистки.

Получеине препаратов амилаз из поверхностных культур. Средой для выращивания продуцентов являются пшеничные отруби с добавлением до 25 % солодовых ростков, увлажненные водой, подкисленной 0,1 н. раствором серной или соляной кислоты. Выход готовой культуры составляет обычно от 70 до 80 % массы среды. Продуцентами а-амилазы и глюкоамилазы чаще всего используются микроскопические грибы A. oryzae, A. awamori, A. niger, R. delemar и др. В Японии при твердофазном культивировании применяют бактерии В. subtilis и В. amylosolvents. Режимы выращивания зависят от физиологии продуцента.

Выращенная культура влажностью 36—50 % может быть высушена и использована как готовый препарат с индексом Пх, а также в сухом или влажном виде может быть передана на дальнейшую переработку с целью получения очищенных препаратов. Процесс очистки начинается с водной экстракции при 20—25 °С с отбором 200—220 °/о, средняя концентрация Сухого вещества в экстрактах 11—14%. Потери ферментов с биошротом составляют 6—12 %. Экстракты с целью понижения уровня обсемененности микроорганизмами могут быть обработаны слабыми растворами электролитов, например 0,8—1,0%-ным СаСЬ. Далее экстракты можно сконцентрировать методом вакуум-выпаривания или ульт-рафнльтрации.

Экстракт из поверхностной культуры может быть использован для получения очищенных амилолитических препаратов путем осаждения ферментов органическими растворителями или нейтральными солями. Амилазы выпадают в осадок почти полностью (93—96%) при концентрации этанола в растворе 69—72 %, ацетона 60—62 и изопропанола 54—55 %. Но сейчас поверхностная культура не считается перспективным сырьем для производства высокоочищенных амилолитических препаратов.

Получеине препаратов амилаз из глубинных культур. В настоящее время в нашей стране для получения амилолитических ферментных препаратов преимущественно используется глубинный способ культивирования продуцентов. В качестве продуцентов используют грибы рода Aspergillus (A. oryzae, A. usamii,

A. batatae), спороносные бактерии, относящиеся к группам

B. subtilis — mesentericus, дрожжелодобные организмы родов

Endomycopsis, Endomyces и многие другие микроорганизмы.

169

nn«H. а30Та- Выб°Р сРед *ля ^ждого продуцента

проводится опытным путем с учетом физиологических потребно

н„ЛТДУЦеНТа " УСЛ0ВИЙ "Р°изводства. Например, при изуче™Ј™ra7imM бИ°СИНТе3 *еРмент°в- было показав,

та в средеР(табл 2 6 ,увствительна к источнику азоВариант среды

Способ обработки крахмала в питательной среде

рН готовой культуральной

жидкости

Таблица 2.8

Активность а-аиилаэы в культуральной жидкости

|ед. АС/мл I контроля

82,8

14,4

6,9 6,9 6,9 6,9 6,9 6,9 6,9 6,9

страница 70
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
кладочная смесь
купить двуспальную кровать с закругленными углами в туле
купить наклейку i love gibdd
передвижной стол для ноутбука

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(29.05.2017)