химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

ечение 10—16 мес.

Грибные культуры успешно хранят в замороженном состоянии в атмосфере жидкого азота при температурах от —165 до —196 °С. Микроскопические грибы замораживают в 10%-ном водном растворе глицерина в запаянных ампулах. Ампулы с замороженными культурами помещают в контейнер с жидким азотом, где их хранят 5 и более лет.

Перспективным следует признать способ хранения культур в лиофилизированном состоянии. Культуру микроорганизма вносят в защитную среду, в качестве которой можно использовать саха-рожелатиновую среду и др., помещают в стерильные ампулы, закрывают стерильными ватными тампонами и быстро замораживают при температурах от —35 до —78°С. Затем ампулы переносят в вакуум-сушильный аппарат и высушивают при остаточном давлении 13,33—1,33 Па в течение 25—30 ч. Лиофильно высушенные культуры могут сохраняться до 5—6 лет, не теряя способности продуцировать ферменты.

Исходный штамм может храниться на зерне или в почве. Для этого почву стерилизуют и вносят в нее культуру продуцента. Штамм в таких условиях может храниться долго. При возобновлении культуры смыв с почвы высевают на чашки Петри. Если продуцент хранят на пшене, то для этого пшено, очищенное от примесей, кипятят в минимальном количестве воды (0,8 л на 1 кг пшена), распаривают 30 мин, затем разбирают и удаляют образовавшиеся комки, а остывшее пшено по 15—16 г засыпают в стерильные флаконы вместимостью 250 мл, которые затем стерилизуют при 0,1 МПа в течение 40 мин. На стерильное распаренное пшено засевают 2 мл густой взвеси конидий или 3 мл двухсуточного вегетативного мицелия, выращенного в колбах на качалках. Культуру продуцента выращивают при периодическом встряхивании при температуре 25—30 °С- Выросшую культуру высушивают до влажности 7—8% в вакууме при 25 °С в течение 60—70 ч и в таком виде хранят от 1 до 3—5 лет.

Подготовка посевного материала для поверхностного культивирования. Этот способ применяют в основном для культивирования микроскопических грибов. Посевной материал в этом случае может быть приготовлен двух видов: в виде культуры, выращенной на твердой питательной среде, и мицелиальной массы продуцента, выращенной иа жидкой среде глубинным способом. Независимо от вида посевного материала последовательность операций одинаковая: 1) приготовление питательной среды; 2) стерилизация питательной среды и аппаратуры; 3) охлаждение среды с соблюдением правил асептики до температуры роста культуры; 4) засев среды исходным штаммом продуцента; 5) выращивание культуры продуцента до определенного возраста; 6) консервирование посевного материала.

Приготовление питательной среды сводится к точному дозированию отдельных компонентов среды и их смешиванию в определенной последовательности. Этот процесс можно вести в специальной емкости — смесителе или же в аппарате, предназначенном для стерилизации. Условия стерилизации зависят от состава среды и ее состояния. Всю аппаратуру и коммуникации стерилизуют острым паром при избыточном давлении 0,15—0,35 МПа. Охлаждать среду можно стерильным холодным воздухом или холодной водой через глухие поверхности теплообмена. Засев среды ведут водной суспензией продуцента с соблюдением правил асептики.

Выращивание проводится в специальном цехе. Готовый посевной материал консервируют либо высушиванием, либо хранением при низких температурах. Сроки хранения устанавливаются для каждого продуцента экспериментально.

Посевную культуру на твердой питательной среде готовят, выращивая микроорганизмы в возрастающем количестве в три или четыре этапа. Состав питательной среды определяется свойствами микроорганизма — продуцента фермента. Чаще всего для этой цели используют увлажненные пшеничные отруби. Иногда к среде добавляют солодовые ростки, древесные опилки, свекловичный

15

жом. В зависимости от продуцента влажность среды после стерилизации составляет 45—56 %.

Исходную музейную культуру продуцента на твердой агарнзн-рованной среде пересевают для обновления сначала на 1 —1,5 г увлажненных стерильных отрубей в пробирку (рис. 1.1). Пробирку помещают в термостат и выращивают культуру прн оптимальной температуре до обильного коиидиеобразования. Содержимое пробнркн переносят в 3—4 колбы вместимостью 0,75—1 л, содержащие 40—100 г рыхлой влажной стерильной среды, и выращивают продуцент прн тех же условиях.

Подготовленный в колбах в достаточном количестве посевной материал используют для засева питательной среды, которую предварительно стерилизуют в бнксах прн 0,15 МПа в течение 60 мин. Засеянная среда размещается на стерильных кюветах. Обычно посевные кюветы имеют прямоугольную форму, выполняются нз оцинкованного неперфорированного железа и снабжены крышками, которые имеют одно нлн два отверстия, закрывающиеся ватно-марлевымн салфетками. Трех колб посевной культуры достаточно для засева 20—25 кювет. Засеянную среду раскладывают в посевные кюветы слоем 0,8—1,2 см; между кюветой и крышкой прокладывают слой непроклеенной бумаги для предотвращения возможной конденсацнн влагн на крышке и создания зон излишнего ув

страница 7
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
бритвы опасные купить
мяч волейбольный микаса mva 200 цена
сколько стоит гироскутер в бишкеке
аренда мини боксов под хранение

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(08.12.2016)