химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

ными реагентами и вступают в реакции азосочетания, галоилироваиия, нитрования и др.; остатки метионина и дисуль-фндиые группы легко подвергаются окислительно-восстановительным превращениям; тиометильные группы легко алкилнруются с образованием сульфо-ииевых солей и т. д.

130

Условно реакции модификации функциональных групп белка можно разделить иа реакции замещения, присоединения и отщепления. Для иммобилизации ферментов имеют значение реакции присоединения по карбоксильным группам реагента или белка, реакции замещения; по типу превращений можно различать реакции ацилнроваиия, алкилирования, конденсации, окисления-восстановления, азосочетания и т. д.

1.13.1. Носители

Все носители подразделяют на две группы: органические полимерные носители и неорганические.

Носитель имеет очень большое значение для успешной иммобилизации ферментов. К носителям предъявляются определенные требования: они должны быть нерастворимы в реакционной среде, быть разнозаряженными с ферментом, иметь высокую гидро-фильность, химическую, биологическую стойкость, механическую прочность, не вызывать неспецифической адсорбции и сильных конформационных изменений молекулы белка, легко гранулироваться и активироваться. Носители для иммобилизации могут иметь зернистую структуру, могут быть выполнены в виде волокон, пленок, полых трубок, мембран.

Органические полимерные носители. Они разделяются на природные и синтетические. Природные носители бывают полисаха-ридные и белковые. Синтетические полимерные носители подразделяются на полиметиленовые, полиамидные и полиэфирные.

Природные полисахаридные носители. Основой этих носителей могут быть целлюлоза, декстран, агароза, губчатый крахмал, хитин и другие полисахариды.

Целлюлоза (Ц) используется в виде пористых сферических гранул, которые имеют хорошие механические и технологические качества. Целлюлоза применяется в виде модификаций, которые получают, используя различные методы обработки целлюлозных сферических гранул.

/. Диизоцививтнш метод

где R(ц)-ОН 1- OCN-R-NCO —(ц)-О-С— NH-R—N=C=Ot(CH2V

н,с

Но при использовании этого метода иногда получаются не очень хорошие результаты из-за полимеризации диизоцианата на поверхности гранулы.

131

г(ц)—он +онс(сн2)3сно —*- (ц)—О—С—о—(ц)

(сн2)3

С НО

При использовании этого метода получаются ацетали, а они неустойчивы в кислой среде.

Ь.Силиниавция у-аминопрапилтриэтонсиланом (/-АЛТЭС)

^ОН О

° NH,

©-он + (с2н5о)зЯ(снг)3ш2-^ @^O^Si(CH2),

он 1

На модифицированных гранулах целлюлозы иммобилизованы многие ферменты: глюкоамилаза, р-амилаза, 6>фруктофуранози-даза, протеиназы и др. Кроме того, используются модификации микрокристаллической целлюлозы, среди которых надо отметить аминоксибутилцеллюлозу, модифицированную а-кетоглютаровой кислотой, танинаминогексилцеллюлозу, полученную при реакции CNBr-активированного галотанина с аминогексилцеллюлозой, и некоторые другие модификации. Производные целлюлозы широко выпускаются в виде порошков, бумаг, содержащих различные функциональные группы.

ОН

Носители из производных декстрана используются в виде сшитых эпихлоргидрином или диэпоксидами макропористых полимеров — сефадексов. Сшитые молекулы агарозы выпускаются под названием «сефароза». При использовании этих полисахаридов в качестве носителей при иммобилизации их активируют путем введения в них функциональных групп, которые используются при пришивке фермента. Так, например, разработаны методы введения в агарозу тиоловых групп (S—С; S—О; S—Me).

C\CHzCH—Эпоксидиробанис Ч / "й \J

f-x/rop -2,3'Эпоксипропаном

HS сн,—сн—сн—SH 2 I I он он

Дитиотреитол

(а)—сн2сн(он)снг—S203Naoch2ch(oh)ch2sh . " *

0—ОСН2СН—снг

ct/лыриОом

Силанизация сопровождается образованием связей Si—О—Si и С—О—Si, которые легко гидролизуются водой, поэтому гранулы необходимо обрабатывать глутаровым альдегидом, который путем поперечного сшивания стабилизирует всю систему в целом.

(а)—осн2сн(он)снг— S—S—

132

Ь~. Гуанидиннш метод О

(ц)—О—Г—NH —(СНг)4—NH2 + СН,ОС

(И)—О—С —ш(СН2)4 — N — СГ

NH,

Тиолактивированный гель стабилен при хранении в виде суспензии в дистиллированной воде. Достоинством этого носителя является то, что ииактивированный фермент достаточно легко может быть удален с его поверхности при восстановительном расщеплении дисульфидной связи, т. е. возможна его регенерация. Но использование этого геля имеет серьезное ограничение: иммобилизуемый фермент должен иметь достаточное количество тиоловых групп, и они не должны входить в активный центр.

133

Есть даииые об иммобилизации ферментов методом адсорбции в результате гидрофобных взаимодействий на гексил- и аллилсе-фарозе, причем чем выше концентрация гексильиых заместителей, тем больше степень адсорбции фермента.

Существуют десятки замещенных агарозиых гелей вида

(a)—OCHz—СН—СН2—О—R , ОН

где R может быть самым различным: СНз; Н—dH9; изо-СфНц; —С,Н13; —С7Н|5; (СН2)3—Si(СН3)2—О—Si(СНз)з и т. д. Эти замещения осуществляются по следующей схе

страница 55
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
рижские озера коттеджный поселок
Хорошее предложение в KNS на 700503700 - мегамаркет компьютерной техники.
скамья проспект
как вытянуть порог на автомобиле

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(25.07.2017)