химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

марганца, кобальта. В то же время ряд ионов (Fe2+, PbJ+, Cu2+, Ag+, Ni2+, Al3+, Hg+ и др.) действует отрицательно и их присутствие крайне нежелательно. Наличие электролитов часто позволяет снизить расход осадителя и улучшить структуру осадка.

Температура ферментного раствора и растворителя. При осаждении ферментов следует стремиться, чтобы она была по возможности низкой. Это связано с тем, что смешивание спирта и водного раствора фермента сопровождается выделением тепла; температура смеси повышается на 5—10°С, и, если спирт предварительно не охлажден, происходит инактивация ферментов. При этом наблюдается не только термоинактивация. Повышение температуры в присутствии растворителя способствует

ИЗ

изгибанию структуры фермента (рис. 1.56) — стадия А. Небольшие молекулы органического растворителя проникают в поверхностные трещины, образующиеся спонтанно в результате естественной подвижности структуры, где гидрофобно связываются с внутригло-булярными остатками аминокислот (лейцин, изолейцин, валин, тирозин и др.) — стадия Б. Это неизбежно приводит к нарушению внутримолекулярных гидрофобных взаимодействий фермента (стадия В) и часто к изменению конформации активного центра и потере ферментом каталитической активности, т. е. проявляются все признаки денатурации. При температуре осаждения смеси свыше 10—15°С наблюдаются все признаки инактивации ферментов, причем тем выше, чем чище осаждаемый фермент. Денатурация зависит и от природы растворителя: спирты с длинной цепью обладают большей денатурирующей способностью по сравнению с короткоцепочечными. Для большинства ферментов, получаемых в промышленных условиях, оптимальная температура осаждения равна 3—5"С. Для достижения этой температуры раствор фермента охлаждают до 1—3°С, а растворитель — до ——12°С.

Очень большое значение при осаждении ферментов имеет рН среды. Из одного и того же ферментного раствора при различном значении рН можно получить различное количество осадка с неодинаковой активностью ферментов. Это связано с тем, что наиболее полно ферменты выпадают в изоэлектрической точке, когда создаются наиболее благоприятные условия для агрегирования белковых молекул. Процесс осаждения белков в изоэлектрической точке без применения осаждающих реагентов называется изоэлектрическим осаждением. Использование органических осадителей при рН, близком к изоэлектрической точке, позволяет ускорить осаждение ферментов и использовать растворители более низких концентраций. При отклонении величины рН от изоэлектрической точки выход осадка и особенно активность фермента падают до 30—50 % максимальной величины. Поэтому необходимо строго соблюдать режим поддержания оптимального значения рН в момент осаждения ферментов органическими растворителями.

Концентрация сухого вещества в исходном растворе. Максимальный выход активного фермента в препа114

рат и наиболее стабильная структура осадка получаются при содержании сухого вещества не более 10—12% (рис. 1.57). Из рисунка видно, что при осаждении ферментов наиболее оптимальной является концентрация сухого вещества около 10%, особенно при осаждении протеолитических ферментов. В некоторых случаях, варьируя концентрацию сухого вещества, можно частично фракционировать комплекс ферментов.

Длительность контакта с растворителем. Следует стремиться сократить это время до минимума, чтобы уменьшить инактивацию ферментов. Максимального сокращения продолжительности контакта осадка с растворителем можно достичь в непрерывных осадителях, которые все шире используются в отечественной ферментной промышленности.

Установки для осаждения ферментов. Схема такой установки приведена на рис. 1.58. Установка состоит из сборника ферментного раствора Л смесителя непрерывного Действия 5, контуров непрерывной подачи ферментного раствора и растворителя, сепаратора 6 и системы автоматизации. Смеситель представляет собой вертикальный цилиндрический корпус /, внутри которого расположен шток 2. На штоке установлены распорные втулки 3, чередующиеся с перегородками 4, не доходящими с одной стороны до стенок цилиндра. На боковой верхней части вертикального цилиндра имеются штуцера для подачи ферментного раствора и растворителя. В нижней части цилиндра расположен спускной штуцер для выхода смеси. Движущиеся сверху вниз по сложной траектории жидкости в течение короткого времени полностью смешиваются. Образующийся осадок непрерывно отделяется в сепараторе. При таком способе осаждения продолжительность контакта ферментов и растворителя сокращается в десятки раз, а выход ферментов в осадок повышается на 15—20 %.

Е g

Отделенный на сепараторе осадок может быть высушен в вакуум-сушильном шкафу, на сублимационной сушилке или после

''.•3

?•.•г

Eg

е 5,0

"В го

" »' s яГ is о s to IS

Концентрация сухого Вещества S исходном pacmSope, %

Рис. 1.57. Влияние исходной концентрации сухого вещества в ферментном растворе иа полноту осаждения ферментов:

/ — концентрация спирта 63%: 2 — 72%: 3 — 79 4,: 4 — 82 Ч>

115

растворения в минимально

страница 47
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
оливия роуз остин купить
Рекомендуем компанию Ренесанс - лестницы на второй этаж п образные - оперативно, надежно и доступно!
стул самба gtp
хранилище для вещей в москве дешево

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(11.12.2016)