химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

ивность при начале работы на двух субстратах.

Отличительным свойством р-галактозидазы является ее способность к трансглнкознлированию. Фермент может переносить на подходящий акцептор галактознльный остаток, лишенный кислорода. Такими акцепторами могут быть сахара, спирты и другие соединения. Соотношение гидролитической и трансгликознлирующей активностей зависит от источника р-галактозидазы и может быть различным. Известно большое количество данных, характеризующих свойства этого фермента и работу его активного центра. Известно, что активный центр фермента представляет собой систему, в которой очень важна динамическая сеть водородных связей, определяющая его электронно-информационное состояние. Именно эти связи позволяют фиксировать субстрат в конфигурации переходного состояния, образующей фермент-субстратный комплекс. Наиболее изученной р-галактозидазой является фермент, полученный из Е. coli. Предполагают, что активный центр этого фермента состоит нз двух участков, которые отвечают за соединение с галактозой и глюкозой. Остаток галактозы, связываясь, изменяет и конформацию активного центра, что облегчает связывание глюкозы на втором участке. Важно отметить, что протяженность активного центра меньше размера трнсахарнда, поэтому присутствующие в реакционной смеси три-, тетра- и другие более высокомолекулярные олнгосахариды не оказывают влияние на проявление активности по отношению к лактозе или л-ннтрофенил-р-О-галак-топиранозиду. Активный центр р-галактозидазы содержит несколько сорбцнонных участков: участки сорбции глнконов (Л) и агли-конов (fl). Участки Л обладают повышенным сродством к глико-новой части субстрата и могут изменять конформацию субстрата. Эти свойства активного центра обеспечиваются за счет наличия в

. — Р-галактозе протон-донорных (хН) и нухн клеофильных (у) группировок (рис. 2.57).

Щу* у: Высказывается предположение, что га лактозный остаток располагается между

Рис. 2.57. Схема сорбции субстрата в активном центре В-галактозндазы

А В витками белковой спирали фермента. Свободные гидроксильные группы остатка фиксируют углевод между двумя витками белка с помощью водородных связей, а агликои связывается с ферментом неспецнфическими гидрофобными связями. Катализ гидролиза происходит, вероятнее всего, в большей степени за счет нековалентных взаимодействий. Р-Галак-тозидаза в зависимости от источника ее получения может быть тетрамером, состоящим из четырех субъединиц, димером или мономером. Есть данные, например, для Е. coli, что активный центр полностью формируется после образования четвертичной структуры. При этом каждая из субъединнц неактивная, но в то же время есть данные и о том, что димер и даже мономер р-галактозидазы из некоторых штаммов Е. coli активны. Иными словами, организация субъеднничной структуры фермента и его активного центра до конца неясна. В самом первом приближении все р-га-лактозидазы можно подразделить на два типа, которые отличаются по месту локализации в клетке, строению молекул и физико-химическим свойствам (табл. 2.47).

Внутриклеточная 176 000

Внутриклеточная 115000

Внутриклеточная 540 000

Внутриклеточная 420 000— 600 000 Есть Нет

Таблица 2.47

Продуцент фермента

Показатель Е. coli Kluyveromy-ces fragilis Curvularia Inaequalls Alterrtarla tenuis

Локализация

Нет

Да

Нет

Да 4,6 0,16 5,6

35:1

7,2 7,2

37

Нет Есть

Нет

Да

Нет 4,4 0,55 4,5 8:1

3,7—4,5 3,9—5,3

60

60

(27%-ный раствор) Да Есть

Нет Есть

Нет

Нет 4,6 0,21 6,57 35:1

3.8—4,4 3,6—4,8 60-65 60

(30%-ный раствор) Да Есть

Молекулярная масса

Да

Нет

Нет

5,1

1,1 12,5 11:1

6,9—7,1 6,9—7,1 30—35 35—40° (30%-ный раствор) Нет Есть

Наличие субъединнц Гликопротеид Участие в катализе SH-rpynn

карбоксильной группы двухвалентных металлов

Изоэлектрическая точка, pi (по-о-НФГ;, 10-» М

kma (по лактозе), 10—ь М

^mj' *mi

Оптимальный рН

по о-НФГ

Нет Есть

по лактозе Оптимальная температура, °С Термостабнльность*, °С

* Потеря активности происходит за 1 ч инкубирования при данной температуре (по данным А. С. Тихомировой. 1982)

Первый тип — это внутриклеточные р-галактозидазы, имеющие молекулярную массу выше 200 000 и почти всегда субъединичное строение. К ним относятся ферменты Е. coli, которые, как правило, имеют четыре идентичные субъеднинцы. Субъединичное строеСтабильность в растворе Наличие трансглнкознлнрую* щей актнвностн

304

Ц Зек. 232

305

ние этого фермента предполагается у дрожжевых микроорганизмов, но количество субъединиц точно не установлено (от 2 до 10). Большое значение для дрожжевых В-галактозидаз имеют двухвалентные металлы, такие, как Mg, Мп и SH-группы.

Второй тип — это В-галактозидазы, имеющие молекулярную массу ниже 200 000. Их субъединичное строение не доказано. Этот тип фермента может быть внутри клетки, но основное его количество находится вне клетки. В-Галактозидазы второго типа более стабильны, не имеют SH-rpynn в активном центре, их активность не зависит от ионов металла. Эта группа гетерогенн

страница 126
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
ремонт электросамокатов xiaomi в москве
установка рекламных пилонов
матрас орматек kids comfort 70x160 купить
вентилятор крос6-3,55 алматы

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(27.07.2017)