химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

эффект получается при дробном внесении индуктора на определенной стадии развития продуцента, особенно в конце логарифмической фазы роста культуры.

Введение в состав промышленной среды ксилозы экономически невыгодно, так как это дефицитный и дорогой моносахарид. Чаще в качестве источника ксилозы используют ксилозо-и ксилансодержащее сырье: солому, пшеничные и рисовые отруби, кукурузные кочерыжки, зерновую и хлопковую шелуху. Наилучшие результаты получаются при введении в состав среды гидролизатов ксилансодер-жащего сырья, которые содержат значительные количества пентоз (рис. 2.56).

Биосинтез глюкозоизомеразы

294

без введения индуктора возможен только для мутантных штаммов, у которых синтез фермента идет по конститутивному пути.

Источники азота. Продуценты глюкозоизомеразы требовательны к источнику азота, так как он должен способствовать интенсивному накоплению биомассы продуцентом. Продуценты глюкозоизомеразы достаточно хорошо растут на средах как с минеральными (аммонийные соли), так и с органическими источниками азота. В качестве органических источников азота для различных продуцентов рекомендуются соевая мука, кукурузный экстракт, пептон, полипептон, триптон, мясной и дрожжевой экстракты, гидролизаты микробных масс, экстракт из солодовых ростков, казеин. В последнее время рекомендуется использовать как нативные азотсодержащие субстраты, так и их гидролизаты.

Минеральные вещества. По данным многих авторов, для образования глюкозоизомеразы в среде должны содержаться ионы магния в виде соли MgS04-7H20 и кобальта в виде соли СоС12-6Н20. Концентрации этих солей определяются физиологическими особенностями продуцентов и колеблются для магния от 0,025 до 0,05 % и для кобальта от 0,005 до 0,024 %. Для бактериальных продуцентов глюкозоизомераз рекомендуется включить в состав среды MnS04-4H20 в концентрации от 0,02 до 0,05 %. В состав питательных сред для некоторых продуцентов иногда вводятся в небольших количествах соли NaCl, FeS04-7H20, СаСОз, КгНР04. В состав сред прн выращивании актиномицетов достаточно часто вводятся некоторые инертные вещества, такие, как агар, КМ-целлюлоза, инфузорная земля в концентрациях от 0,05 до 4 %, чтобы предотвратить возникновение малопродуктивных шаровидных образований микроорганизмов при глубинном культивировании. Внесение этих и подобных веществ на начальных стадиях роста культуры способствует развитию нитевидного мицелия, улучшаются условия массообмена клетка — жидкая фаза, что приводит к увеличению съема фермента с единицы объема.

Условия культивирования. На биосинтез глюкозоизомеразы оказывают существенное влияние такие условия культивирования, как температура, рН среды, уровень аэрирования и др. Для актиномицетов используется температура от 28 до 45 °С, для бактериальных культур диапазон температур шире — от 28 до 60 °С. Здесь важно отметить, что чем выше оптимальная температура роста культуры, тем термостабильнее синтезируемая глюкозоизомераза. Среды, используемые для выращивания продуцентов глюкозоизомераз, как правило, имеют начальный рН от 6 до 8. В процессе культивирования рН меняется. Эти изменения зависят от продуцента, источника углерода и азота, условий аэрации и перемешивания. Характер изменения рН и необходимость его корректировки в процессе роста культуры устанавливают опытным путем для каждого продуцента.

Количество посевного материала и длительность культивирования определяются видом продуцента. Бактериальные культуры растут быстро, посевной материал получается в 1—2 этапа, и дози296

ровка его небольшая — не более 1 %. Актиномицеты требуют высокой дозы посевного материала — от 10% и выше, поэтому получение производственной культуры состоит нз 3—4 этапов, что несколько усложняет процесс выращивания.

Выделение ферментов. В промышленности производство препаратов глюкозоизомеразы осуществляется двумя способами: 1) выделение фермента из биомассы продуцента путем ее полного разрушения с последующим получением высокоактивных очищенных препаратов глюкозоизомеразы; 2) фиксирование фермента внутри клетки и использование этой биомассы для изомеризации D-глюко-зы в D-фруктозу.

Сложность первого способа получения глюкозоизомеразных препаратов заключается в необходимости тотального разрушения клеточной стенки продуцента, так как фермент локализован вероятнее всего в клеточной стенке. Обычные способы разрушения клеток (растирание с кварцевым песком, глиноземом, обработка органическими растворителями, автолиз с добавлением и без добавления поверхностно-активных веществ, обработка ультразвуком, разрушение методом декомпрессии и др.) не приводят к полному выходу фермента из клетки. Действительно, все эти приемы вызывают нарушение целостности клетки, ее внутреннее содержимое выливается, под микроскопом видно, что гифы светлеют и становятся пустыми, но уровень глюкозоизомеразной активности в бесклеточных гомогенатах возрастает незначительно, хотя и наблюдается нарастание белка в растворе. Резкое увеличение глюкозоизомеразной активности в бесклеточны

страница 122
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
пористый керамический блок
ферропленка novafilm
крокус сити концерт лепса 24 ноября
кровати двуспальные с разными подъемным механизмом

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(24.09.2017)