химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

ющая превращение между пиранозными и фуранозны-ми формами; 4) превращение фруктозы в глюкозу с участием глюкозоизомеразы. Это можно записать в виде следующей схемы:

а-В-Глютпиратш * р-В-Глютпиратаа

^ ^ Глюквзтиотроза

а -В-Глюкопирвтза Глюквзвизонервза

ti

a-D-Vpumnomipiuma + р-D-Фриктоааратва

Т.

цесс изомеризации (Е. Ласло и др., 1978). Часть из них носит чисто гипотетический характер: 1) связывание фермента с субстратом, механизм которого пока неизвестен; 2) превращение комфор-мации кресла CI глюкозы в форму скошенной лодки; только эта конформация дает цис-ендиол, способный изомеризоваться; 3) разрыв кольца в глюкозе, который катализируется остатком глутами-новой кислоты активного центра фермента. Одновременно^происходит перенос протона между кислородами карбоксильной группы на стадии образования цыс-ендиола. Эта стадия процесса является лимитирующей, так как скорость дециклизации глюкозы на несколько порядков меньше скорости циклизации; 4) связывание альдегидной группы глюкозы через водородную связь с гуаниди-новой группой остатка аргинина активного центра глюкозоизомеразы и связывание протона второго углеродного атома с TV-атомами имидазольной группы гистидина, входящего в активный центр фермента; 5) образование цыс-ендиола; 6) перенос протона к первому углеродному атому с образованием у второго кетогруп-пы. Обмена протонов с водой, как это наблюдается при неферментативной щелочной изомеризации, не происходит, иными словами, ферментативная изомеризация глюкозы во фруктозу идет по строго внутримолекулярному механизму (рис. 2.55).

Н I

О HjN^

ЛГ—N-Н—С2—ОН—NH

II оМ^СН

I е HI

С—ОН HaNv

«(+)с—ыу

II 6(->СН

СН—N—

NH

СН—N н—сЭ-онС NH

CH—NH

н

OH HN

NH С,—ОН H2Nv

j ^ Глюкоэоизомароза J J Ац* члическоя D-Фруктоза

н

р-В-Фрдитрорамаа

HN

«н I \ У

H-C.—OH

C,=0 H,N

Предположительно, что на активном центре глюкозоизомеразы происходит по крайней мере семь стадий, обусловливающих про290

Рис. 2.55. Предполагаемый механизм изомеризации D-глюкозы в />-фруктозу иа активном центре глюкозоизомеразы (по данным А. М. Егороиа, А. В. Аиаиичева, 1982)

Предположение, что переносчиками протонов в активных центрах кетолизомераз являются имидазольиые группы гистидиновых остатков, подтверждается тем, что гистидии обнаружен в активных центрах глюкозоизомераз. Но в то же время D-ксилозокето-лизомераза (КФ 5.3.1.5), согласно данным Дж. А. Роз (1975), является исключением, так как только она из всех изомеризующих ферментов в каталитическом акте проявляет способность к обмену протонов с водой.

Несмотря иа значительное количество предложенных гипотез, нельзя считать, что механизм изомеризации полиостью объяснен и доказан. Ои постоянно изучается и уточняется. Высказываются предположения о большой роли в каталитическом акте иоиов металлов, особенно Mg2+ и Со2+. Ионами магния и кобальта активируется большинство глюкозоизомераз. Иногда активирующий эффект наблюдается и в присутствии иоиов Мпа+. Степень активации этими ионами зависит от источника получения глюкозоизомеразы и изомеризуемого сахара.

Для некоторых глюкозоизомераз были определены константы Михаэлиса (km) в присутствии иоиов Со2+ и Mg2+ (табл. 2.43).

Таблица 2.43

Сог+

Продуценты глюкозоизомеразы

1,0-10-" 2,0-10—3

3;010-1 1,8-10-» 7,8-10—' 6,7-10-*

5,6-10^» 1,3-10-' 1,8-10-' 3,0.10-» 1,8-10-* 2,2-10-* 8,4-10-»

Actinomyces oliYocinereus

(по данным А. А. Резникова, 1981)

Actinoplanes missouriensis

(по данным С. Бахмаик и др., 1979)

Bacillus coagulans

(по данным Г. Данио, 1971)

Streptomyces albus

(по данным С. Санчес и др., 1975)

Streptomyces species

(по данным Таказакн и др., 1969)

Streptomyces albogriseolus

(по данным А. М. Михайлова и др., 1986)

Streptomyces olivaceus

(по данным М. С. Моснчева и др., 1986)

Как видно из таблицы, глюкозоизомеразы, активируемые ионами Со2+ и Mg2+, обладают значительно более высоким сродством к ионам Со2+, причем величины km, характеризующие это сродство, различаются иа 1—2 порядка. В результате работ, проведенных в последние годы, было установлено, что активирующее действие ионов Mg2+ и Со2+ по своей природе различно. На примере A. olivocinereus было показано, что активирующее действие иоиов Mg2+ относится к иекоикуреитиому типу, при котором глюкоза и иоиы Mg2+ связываются с ферментом независимо друг от друга,

292

м*а+

т

образуя тройной комплекс. Активирование глюкозоизомеразы ионами Со2+ носит сииергический характер. Увеличение концентрации иоиов Со2+ от 0,025 до 0,25 мМ ие влияет иа величину максимальной скорости реакции. Но значение кажущейся km. уменьшается при этом от 0,14 до 0,08 М, что говорит об увеличении сродства фермента к субстрату (по даииым А. В. Аиаиичева и др., 1983).

Присутствие иоиов Со2+ оказывает стабилизирующее действие иа глюкозоизомеразы. Установлено, что кобальт участвует в формировании и поддержании четвертичной структуры фермента и что иа одну молекулу фермента приходится четыре атома коб

страница 120
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
сигнализация а61
купить каркасную кровать 90х200 с ящиками в туле
асикс рокет
концерт робби вильямса в спб 2017

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(27.05.2017)