химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

е влияют или даже в некоторых случаях тормозят синтез фермента, ио стимулируют образование большого количества биомассы.

Выделение ферментов. В Институте биохимии УССР разработана высокоэффективная реальная технология глюкозооксидаз-ных препаратов из культуральной жидкости P. vitale путем ее очистки с помощью ультрафильтрационных и сорбционных методой. Ферментный препарат выпускают в сухом виде. Гомогенные препараты глюкозооксидазы из P. vitale имеют высокую ферментативную и антимикробную активность. Ферментативная активность очищенных препаратов глюкозооксидазы составляет от 150 000 до 200 000 ед./г препарата, а удельная активность — до 350 000 ед./г белка. Следует внести уточнение, что за единицу активности принимается такое количество фермента, которое катализирует окисление 1 мкмоля глюкозы за 1 мни при 30"С в атмосфере кислорода, что сопровождается потреблением 1 мкмоля Оэ, .равного 22,4 мкл, и образованием 1 мкмоля перекиси водорода.

Сухие препараты глюкозооксидазы получают путем высушивания раствора фермента методом сублимации. Препараты глюкозооксидазы достаточно хорошо хранятся при низкой температуре (3—6°С), потеря активности в течение года не превышает 20%. Глюкозооксидаза фасуется в стеклянные флаконы по 100 000 ед. в каждый, которые герметически закрываются.

В общих чертах технология глюкозооксидазных препаратов складывается из нескольких взаимосвязанных процессов. Готовая культуральная жидкость концентрируется, и ее рН доводится до 6,7—7,0. Затем она обрабатывается около 1 ч оксидом алюминия при периодическом перемешивании. На оксид алюминия глюкозо280

оксидаза избирательно сорбируется почти полностью. Сорбент вместе с глюкозооксидазой отделяют и направляют в реактор для поэтапной элюции. Элюция проводится аммоиийфосфатиым буфером из расчета 0,45—0,5 л на 1 кг оксид алюминия. В процессе сорбции и элюции в связи с уменьшением объема обрабатываемой жидкости происходит концентрирование глюкозооксидазы в ферментном растворе в 10—20 раз. Из полученного элюата этанолом (в соотношении 2:1) осаждают глюкозооксидазу, затем осадок вновь растворяют в ледяной дистиллированной воде, центрифугированием отделяют нерастворимый балласт и из иадосадочной жидкости фермент вновь осаждают ацетоном (2: 1). Осадок растворяют в минимальном количестве воды и высушивают методом сублимации. Такие препараты обладают высокой активностью, их выход 80—90 % исходной. Это очень высокий выход, и трудно назвать примеры подобной технологии с таким выходом.

Из высокоочищенного препарата легко получить кристаллы глюкозооксидазы. Кристаллизацию можно вести из водных растворов сульфатом аммония при его содержании 0,52—0,55 от полного насыщения. К водным 2,5—3 %-иым растворам фермента при комнатной температуре добавляют тоикоизмельчеиный порошок сульфата аммония до образования легкой мути. Через 3—5 ч начинает формироваться осадок, а через 2—3 дня кристаллы глюкозооксидазы в виде тонких игл отделяют и перекристаллизовыва-ют (последующие перекристаллизации протекают в 15—20 раз быстрее). Такие высокоочищенные кристаллические препараты могут быть использованы для медицинских целей и в научно-исследовательских работах. Высокоочищеииую глюкозооксидазу можно использовать в пищевой промышленности в качестве антиокислителя для удаления остатков кислорода, что важно для стабилизации ряда пищевых продуктов (жиров и жирсодержащнх продуктов, напитков, мясопродуктов, концентратов и др.); для удаления остатков глюкозы перед высушиванием некоторых продуктов (яиц, мяса и др.).

2.8.4. Механизм действия и свойства каталазы

Каталаза (Н202: HsOj-оксидоредуктаза, КФ 1.11.16) является белком, относящимся к гемииовой группе ферментов. Каталаза широко распространена в природе, она обнаружена у животных, растений и микроорганизмов, за исключением анаэробов.

У большинства животных каталаза обнаружена в печени, эритроцитах и почках. Главная роль каталазы заключается в защите клеток организма от токсического действия перекиси водорода, которая образуется в клетках под действием некоторых флавииовых ферментов, таких, как ксаитииоксидаза, амииооксидаза, оксидазы D- и /.-аминокислот и некоторых других. Каталаза, разрушая перекись водорода, регенерирует кислород, который может быть использован другими ферментами при окислении различных субстратов. Иначе говоря, каталаза может действовать пероксидазиым

281

путем и непосредственно участвовать в обмене ряда доноров водорода. Есть данные, которые позволяют предполагать, что ряд серьезных заболеваний в организме человека связан с понижением уровня каталазы в печени и других органах. Это дает основание рассматривать каталазу как одно из перспективных профилактических лекарственных средств.

Исследованию механизма действия каталазы посвящен целый ряд работ. По мнению многих авторов, каталаза и пероксидаза ускоряют реакции одного типа, но каталаза окисляет саму перекись водорода и не окисляет большинство веществ, на которые действует пероксидаза. Известно несколько теорий, по-разному объясняющих механ

страница 115
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
Выгодное предложение от интернет-магазина KNSneva.ru на dell компьютер - Санкт-Петербург, ул. Рузовская, д.11, тел. (812) 490-61-55.
инвентарь для регби
аренда мерседес для такси в москве
билет на токио хотел в москве

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(27.04.2017)