химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

сталлы, стенки которых представляют монослои молекул. В стенках труб молекулы уложены по спирали с шагом около 60 А. На основании картины оптической дифракции сделан вывод о том, что наиболе вероятными являются параметры спирали, в которой на период повторения приходится 11 витков и 50 молекул. На профилированных изображениях при включении в фильтрацию ближних рефлексов молекулы выглядят образованными из двух отчетливо различаемых половин, каждая из которых в свою очередь состоит из двух субъединиц. С учетом толщины стенки размеры элементарной ячейки примерно 50X55X75 А, в нее входит одна молекула.

Данные, приведенные по структуре различных глюкозооксидаз, в частности глюкозооксидазы P. vitale Pidopl. et Bilai, определяют ее весьма специфические физико-химические свойства. Так, спектр ее поглощения характеризуется: Хш.х прн 278/280, 380, 460 нм и Хт\„ при 250, 320 и 410 нм. Отношение D3Ht,/Di6o в препаратах 278 кристаллической глюкозооксидазы равно единице. Молекулярная масса фермента, определенная методом светорассеивання, равна 150 000 и константа седиментации — 7,8Xlfr~13 с-1. Молекулярный коэффициент экстинкции кристаллических препаратов глюкозооксидазы при 460 нм равен 2,20-10* М-'-см-1. Изоэлектрическая точка, определенная методом электрофокусирования в ПААГ, находится в области рН 4,7—4,8. Оптимальный рН для действия фермента находится в интервале 5,6—5,8.

Термостабильность глюкозооксидазы сравнительно высокая. Так, 15-минутное прогревание растворов кристаллической глюкозооксидазы при температуре до 50 "С в диапазоне рН от 4,0 до 5,6 не снижает\ктнвность фермента. Прогревание же при этих условиях, но при температуре 56"С вызывает падение активности на 10—12 %. Полная инактивация глюкозооксидазы P. vitale наступает при 15-минутной экспозиции при температуре 70 °С. Глюкозооксидаза P. vitale обладает высокой специфичностью, ее молекулярная активность по отношению к B-D-глюкозе равна 42 000 ед./мл.

Ионы ртути и меди в концентрации соответственно Ю-3 и 10_в снижают активность и термостабильность фермента. Ионы кальция и NH+ в концентрации, превышающей концентрацию ионов ртути на 1—2 порядка, предохраняют фермент от ингибирующего действия этими ионами. В конце 70-х годов было показано, что глюкозооксидаза достаточно хорошо стабилизируется от неблагоприятных внешних воздействий в присутствии ионов кальция.

2.8.3. Получение препаратов глюкозооксидазы

В литературе известны данные о получении препаратов глюкозооксидазы из культур микроорганизмов, выращенных как поверхностным, так и глубинным способами. В последние годы почти исключительно для этих целей используется глубинная культура продуцентов. В нашей стране в качестве продуцентов глюкозооксидазы предполагалось использовать A. niger и P. vitale. Наиболее фундаментальные и глубокие разработки были проведены под руководством М. Ф. Гулого, В. И. Билай, Н. М. Пидпличко Р. Г. Дегтярь их учениками и коллегами. Такие широкие исследовании помогли найтн высокопродуктивный по глюкозооксидазе продуцент Penicillium vitale Pidopl. et Bilai 1312/140, изучить его физиологию, разработать технологию получения кристаллической глюкозооксидазы, создать современное промышленное производство и наладить выпуск в стране высокоактивных и стабильных препаратов глюкозооксидазы.

Питательная среда и условия культивирования. Еще в 70-е годы было установлено, что, изменяя соотношение между концентрацией в среде глюкозы и KNOj, можно подавить у микроорганизма способность к образованию каталазы и в то же время предельно повысить продуктивность культуры по глюкозооксидазе. Например, высокая активность глюкозооксидазы в культуральной жидкости при полном отсутствии каталазы наблюдалась при со279

держании глюкозы в среде 10 % и KN03 0,5—1 %, понижение кон центрации KNO3 от 0,5 до 0,1 % при прочих равных условиях практически приводит к тотальному подавлению способности гриба образовывать глюкозооксидазу. Культуральная жидкость, содержащая только глюкозооксидазу, обладает антибиотической активностью, так как образующаяся в результате окисления глюкозы перекись водорода ие подвергается разложению под действием каталазы. Культура P. vitale Pidop. et Bilai обладает способностью продуцировать заметные количества нивертазы, и потому ее можно культивировать на средах, содержащих сахарозу. При изучении динамики накопления биомассы гриба и глюкозооксидазы иа средах с глюкозой и сахарозой было установлено, что на среде с сахарозой продуцент потребляет только глюкозу. На средах с сахарозой иакоплеине биомассы и глюкозооксидазы протекает в начальный момент выращивания несколько медленнее, чем на среде с глюкозой. По-видимому, это связано с тем, что потребление сахарозы лимитируется синтезом нивертазы, которая начинает на-, капливаться чуть позже, ближе к середине логарифмической фазы роста культуры. Присутствие в питательной среде ионов кальция, марганца, аммония и хлора повышает способность микроорганизма синтезировать глюкозооксидазу. А такие ионы, как цинк, медь, железо и кобальт, почти н

страница 114
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
плитка sagra томск
подарки для секретаря
стол металл и стекло
вр 132-30 цена

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(04.12.2016)