химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

е потребления из среды лимитирующего компонента. Оптимальный состав среды устанавливается либо путем длительного изучения особенностей биосинтеза ферментов микроорганизмом, либо с использованием математических методов планирования эксперимента.

Способ экспериментального конструирования питательной среды можно продемонстрировать на примере Bacillus subtilis 103 (табл. 2.37, 2.38).

252

Источник азота

рН

6,90

6,90 6,90 6,90 6,90 6,95

• Табл. 2.37-2.40 приводятся по данным К

рН

6,9

6,9 6,9 6,8 7,0 7,0

Источник азота

Таблица 2.40

активность в культуральной жидкости до 1 300 ед. ПС/мл, т. е. почти в 20 раз больше контроля.

Экспериментальный способ оптимизации' сред приемлем, но он очень длителен и ие всегда оправдан, так как для того, чтобы учесть взаимовлияние отдельных компонентов при изменении их соотношения в среде, необходимо исследование многочисленных вариантов. Проще и целесообразнее вести такие исследования иа основе математических методов планирования эксперимента.

Дальнейшая подработка состава питательной среды для В. subtilis 103 позволила существенно сократить длительность культивирования продуцента и еще повысить его продуктивность по про-теиназам (табл. 2.39).

Показатель

IV среда

II среда

III среда

V среда

Таблица 2.39

60

2 60 60 56 44

0,15 0,15 0,15 0,15 0,15

0,05 0,05 0,05 0,05 0,05

0,01 0,01 0,01 0,01 0,01.

1,0 .— — *

— 9,0 3,0 9,0 3,0 9,0 8,0 9,0 8,0

0,2 0,2

— 1,2 1,2 1,2 1,2 - 7,0 - 7,0

67 980 1300 1400 2100

t среда (контроль)

Стадия выделения

100

92

Характеристика стадии

Исходный материал для выделении протеазы

84

Растворение протосубтилииа в воде с рН 7,8 до концентрации сухого вещества 10% Фильтрование

82 44

38 22

Очистка ультрафнльтрацией и концентрирование до содержания белка в концентрате 3,5—4,0 % Обесцвечивание на ДЭАЭ-целлюлозе Хроматография на КМ-целлюлозе

Обессоливаине и концентрирование методом ультрафильтрации Сублимационная сушка концентрата

В „табл. 2.40 представлены основные этапы выделения высоко-очищенной протеииазы из технического препарата ГЗх. Эта схема позволяет получить с высоким выходом (до 22 %) очищенный препарат внеклеточной нейтральной протеииазы из В. subtilis, которая относится к металлопротеиназам.

Дальнейшие исследования протеолитических ферментов этого микроорганизма позволили установить в иих четыре компонента, которые различались между собой по многим физико-химическим характеристикам (табл. 2.4.1), особенно по оптимуму рН. Из табл. 2.41 видно, что протеиназа II обладает широким диапазоном действия в интервале рН от 7,5 до 11, протеиназа IV является сильнощелочной и т. д.

рК

0,9-10-» 4,0-10-»

3,3-10—* 2,0-10—«

5,3; 8,8 5,7; 9,3: 9,8: 12,2

5,3; 7,7 8,5

Таблица 2.41*

Компонент протеиназ Молекулярная масса Иэоэлентрн-ческая точка, р! Оптимальный

рН

1 11 44000 40 000 8,4

8,8 7,0 7,5-11

111 IV 23 000 29 000 9,5 10,1 6.5

11.0

~ ' „ г* Исса А А. Глемжи и др. (19В0).

• По данным В. С. веса, л. л.

Наряду с этим очень ^^^Z^T^^ .^^^..SSS^^^ являются мутантиыми

\

вариантами или культурами, отобранными в процессе длительной естественной селекции. Среди промышленных бактериальных штаммов можно назвать: В. cereus, В. mesentericus, В. lichenifor-mis (продуцент препарата субтилизин Карлсберга), В. amylolique-faciens, В. stearothermophilus, В. subtilis (продуценты промышленных препаратов субтилизин BPN и субтилизин Novo) и некоторые другие.

Среди микроорганизмов — продуцентов протеиназ не менее важное место, чем бактерии, занимают актиномицеты и микроскопические грибы. Актиномицеты образуют внеклеточные протеиназы в значительных количествах, но они сравнительно редко используются в промышленных условиях. Очень многие актиномицеты одновременно с протеиназами образуют большое количество внутриклеточных антибиотиков, поэтому имеется возможность одновременно организовать два производства: антибиотиков — из биомассы продуцента и протеолитических ферментов — из жидкой фазы культуры. По такому принципу начиная с 60-х годов в Японии получают протеиназы на основе производства стрептомицина при промышленном культивировании Streptomyces griseus. Протеазы S. griseus получают из фильтрата глубинной культуры путем избирательной сорбции катионообменными смолами. Про-теаза после элюции и дальнейшей очистки очищается в 22—25 раз и известна на мировом рынке под названием проназы. Проназа является комплексным препаратом, состоящим, по данным различных авторов, из 11—13 протеаз: четырех нейтральных, трех щелочных протеиназ и 3—5 аминопептидаз и карбоксипептидаз. Это стабильный ферментный препарат, обладающий широкой специфичностью и способностью глубоко (на 70—90%) гидролизовать субстрат до аминокислот. Только кератин и фиброин шелка с трудом гидролизуются проназой. Проназа также гидролизует различные пептиды, амиды и эфиры аминокислот. Ока растворима в воде, слабых солевых растворах, водных растворах ацетона и спиртов с концентрацией не выше 50 %

страница 102
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
земляной вал 7 курсы бухучета
котёл ферроли
курсы маникюра и педикюра в москве с дипломом стоимость
откидные стулья в прихожую

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(03.12.2016)