химический каталог




Технология ферментных препаратов

Автор И.М.Грачева

носить в среду до 10—20% опилок, например березовых. Кроме того, внесение рыхлителя позволяет несколько повысить влажность среды — до 62—65 %, что способствует усилению биосинтеза протеиназ. Режим аэрации, температуры и длительность процесса для каждого продуцента устанавливаются экспериментально.

Готовая культура либо высушивается (препарат Пх), либо поступает на последующую очистку. Водный экстракт может быть сконцентрирован (препарат П2х) либо использован для осаждения ферментов растворителями или солями. При осаждении этанолом выход препарата от исходной культуры составляет около 5 % с переходом в осадок до 70—73 % фермента; при осаждении изопропиловым спиртом выход составляет около 2,2—2,5 % с переходом в осадок до 85-—90 % протеиназ, т. е. получаются препараты с меньшим содержанием балласта, но более активные.

Глубинный способ культивирования. В качестве продуцентов протеолитических ферментов при глубинном культивировании в промышленных условиях используют бактерии в основном рода Bacillus, реже — актиномицеты и микроскопические грибы. Способность к образованию протеолитических ферментов отмечается практически у всех известных микроорганизмов, так как роль этих ферментов в регуляции жизненных функций организмов очень велика. Протеолитические ферменты в подавляющем большинстве случаев являются внеклеточными. В самом общем виде гипотетический механизм регуляции биосинтеза внеклеточных протеаз у

Экзопротеазы

А.

Рис 2.48. Гипотетическая модель регуляции биосинтеза внеклеточных протеаз у микроорганизмов (по данным В. А. Иваиица, Н. С. Егорова и др., 1978)

микроорганизмов представлен на рис. 2.48. Авторы этой модели, основываясь иа данных литературы и собственных исследованиях, предполагают, что иРНК-экзопротеазосиитезирующая сцстема безуспешно конкурирует с системами других РНК вследствие низкого сродства специфических факторов инициации или РНК-поли-меразы с участком инициации иа экзобелковом гене. Известно, что синтез РНК контролируется либо соотношением неиагружеиных и амииоацилироваииых тРНК (при этом свободные тРНК являются репрессорами синтеза), либо действием гуаноэиитетрафосфата (ррСрр), который образуется при аминокислотном голодании и подавляет биосинтез РНК- Суть предлагаемой модели заключается в следующем. Присутствие в среде в достаточном количестве всех необходимых аминокислот и других источников углерода, азота и серы позволяет поддерживать внутриклеточный пул микроорганизма иа высоком уровне. При этих условиях клетка осуществляет интенсивный синтез иетранслируемых РНК и иРНК для внутриклеточных белков. В результате содержание свободных факторов иии251

250

циации РНК-полимеразы, которые могут принять участие в синтезе иРНК экзопротеаз, незначительно. Вероятно, этим объясняется низкая частота транскрипции иРНК экзопротеаз и, следовательно, низкий уровень образования внеклеточных протеаз, например, в начале роста культуры на такой сбалансированной среде (левая сторона схемы).

Истощение среды в процессе роста культуры по одному или нескольким субстратам приводит к снижению уровня пула внутриклеточных свободных аминокислот, что значительно снижает синтез РНК. В результате освобождаются РНК-полимераза и факторы инициации транскрипции РНК. Увеличиваются частота инициации иРНК экзопротеаз и соответственно синтез внеклеточных протеолитических ферментов (правая сторона схемы). При наличии в среде белков экзопротеазы расщепляют их до пептидов и аминокислот, которые поступают в клетку, пополняя ее пул. Аминокислоты утилизируются клеткой активно и являются лимитирующим субстратом. Поступающие в клетку аминокислоты могут полностью удовлетворить ее потребности, т. е. снять лимитирование по этому субстрату, что приведет к временному торможению биосинтеза экзопротеаз и т. д. Иными словами, имеет место механизм контроля синтеза экзопротеаз по типу метаболитной репрессии. Можно предположить, что регуляторное воздействие субстратов на биосинтез экзопротеаз проявляется на уровне транскрипции. Известно, что пул иРНК поддерживает синтез протеаз в течение нескольких часов.

Глубинным способом культивируют многие продуценты протеолитических ферментов. Для производства нейтральных и щелочных протеиназ используют спороносные бактерии и актиномицеты, для получения кислых — микроскопические грибы.

Наиболее широко в нашей стране применяются штаммы бактерий, относящиеся к видам Bacillus subtilis и В. mesentericus, на основе которых выпускаются препараты протосубтилин и прото-мезентерин разной степени очистки, предназначенные для самых различных отраслей — от пищевых технологий до использования в моющих средствах и сельском хозяйстве.

Питательные среды и условия культивирования. При конструировании оптимальных питательных сред для каждого продуцента изучаются его физиология, потребность в источниках N, С и других соединениях. Содержание сухого вещества в питательной среде в зависимости от продуцента может изменяться от 6 до 20 %. Питательные вещества могут вноситься в среду сразу или дробно по мер

страница 101
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141

Скачать книгу "Технология ферментных препаратов" (3.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
купить букет невесты для бросания цвет айвори
Установка ТВ-тюнера
курсы по дизайну декорированию
менеджер по туризму курсы цена

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(07.12.2016)