химический каталог




Введение в микромасштабную высокоэффективную жидкостную хроматографию

Автор M.Гото, К.Джинно, Д.Исии, M.Сайто, M.Сенда и др.

(+); подвижная фаза *етанол; объемная скорость 40 мкл/мин; Детектор УФ, 265 нм.

Пнкн: / - D-бинафтол, 2 - L-бинафтод.

й1К

10 20 30

Время, мим

214

Применение микромасштабной Blvy Ц&менение микромасштабной ВЭЖХ

211

7.4.2. Условия осуществления высокоскоростной ВЭЖХ.

Чтобы осуществить высокоскоростное и высокоэффективное разделение методом ЖХ, следует учесть все факторы, влияющие на продолжительность и эффективность разделения. В число таковых входят размеры колонки (ее длина и внутренний диаметр), объемная скорость подвижной фазы, постоянная времени детектора и виеколоночное размывание хроматографи-ческих полос. Продолжительность анализа зависит прожде всего от размеров колонки и объемной скорости подвижной фазы. Взаимосвязь между этими факторами иллюстрируется рис. 7-56. Как следует из этого рисунка, чтобы время анализа, проводимого методом обычной ВЭЖХ, снизилось в 10 раз, размеры колонки и объемная скорость должны соответствовать заштрихованной области. При этом необходимо учитывать пе-.

ю

»|

Ч

\ 4

Qt

\\

лепад давления на колонке, размеры частиц предполагаемых насадочных материалов, требуемую эффективность разделения и допустимый расход растворителей.

Для высокоскоростной ВЭЖХ необходим детектор с малой постоянной времени, поскольку каждый компонент элюируется чрезвычайно быстро. Рис. 7-57 показывает взаимосвязь между линейной скоростью подвижной фазы и эффективностью разделения при различных постоянных времени детектора. При слишком большой постоянной времени (1,0 с) эффективность разделения при высоких линейных скоростях подвижной фазы, применяемых в высокоскоростной ВЭЖХ, уменьшается. Напротив, при достаточно малой постоянной времени детектора (0,25 с) эффективность заметно не уменьшается даже при больших линейных скоростях подвижной фазы. Из рисунка ясно, что для высокоскоростной ВЭЖХ необходим детектор с постоянной времени, не превышающей 0,25 с. Рис. 7-58 иллюстрирует влияние постоянной времени детектора на разделение пиков на реальной хроматограмме.

Из системы для высокоскоростной ВЭЖХ необходимо также устранить все источники внеколоночиого размывания пиков, поскольку дисперсии полос разделенных компонентов очень малы вследствие малой длины колонки и малых размеров частиц насадки. Рис. 7-59 иллюстрирует влияние внеколож.

ПРИМЕНЕНИЕ МИКППМ,

Применение микромасштабной ВЭЖХ

217

2IS_

Применение микромасштабной ВЭЖХ

Применение микромасштабной ВЭЖХ 219

ори определении методом высокоскоростной ВЭЖХ в сыворотке крови противосудорожных препаратов (рис. 7-63) {39}.

Еще два примера представлены на рнс. 7-64 и 7-65. На первом из них показано определение токоферояацетата в креме для кожи, а на втором - определение содержания изомеров токоферола в препарате витамина Е. В обоих случаях анализ осуществлялся посредством ВЭЖХ (39].

I г з

время, мин

г 3

10 15 20

пя, мин

Рис. 7-60. Сравнение высокоскоростной (а) и обычной (б) ВЭЖХ.

а - колонка 4,6 мм (внутр. диам.) х 50 мм; неподвижная фаза силикагель F-Finepak SIL О мкм); подвижная фаза н-гексаи/изопропанал/уксусная кислота (99/1/0,5); объемная скорость 2.0 мл/мин; детектор флуоресцентный; объем проточной кюветы 6,5 мкл; длина волны возбуждающего излучения 285 им, флуоресцентного излучения 340 нм; постоянная времени детектора 0,2 с.

б - колонка 4,6 мм (внутр. диам.) х 25 см; неподвижная фаза силикагель Finepak SIL (5 мкм); объемная скорость 1,0 мл/мин; постоянная времени детектора 2,0 с; остальные условия опыта те же, что и при высокоскоростной ВЭЖХ. Пики; / - а-токоферол, 2 - ^}-токоферол, 3 - Y -токоферол, 4-6-токоферол.

На рис. 7-61 и 7-62 показаны хроматограммы, полученные при анализе различных коммерческих лекарственных препаратов на колонках, заполненных силика гелем с привитыми окта-децильными группами с размером частиц 5 мкм.

В рассмотренных ранее примерах мы уже указывали на необходимость определения терапевтических концентраций различных лекарственных средств в сыворотке крови. Еще одним таким примером может служить хроматограмма, полученная

Рнс. 7-61. Разделение компонентов лекарственного средства. Колонка 2,1 мм (внутр. диам.) х 10 см; неподвижная фаза Fine SIL Сщ (5 мкм) подвижная фаза ацетонит-рнл/раствор 1 -пентилсульфоната (0,02 моль/л) (50/50); объемная скорость 0,7 мл/мнн; детектор УФ, 215 мм; постоянная времени детектора 0,05 с.

220

Применение миквомасштабной ВЭЖХ

Применение микромасштабной ВЭЖХ.

221

<5Г

О I 2

ВРЕМЯ У&ЕРЖИ&АНИЯ,

JKU/i

Рис. 7-62. Разделение компонентов лекарственного средства. Колонка 4,6 мм (внутр. диам.) х 5 см; неподвижная фаза F-Flnepak SIL Clg (3 мкм); подвижная фаза метанол/ 0,4%-ный раствор дигидрофос-фата калия/0,4 %-ный раствор 1-пентилсулыроната натрия (35/32,5/32,5); объемная скорость 1,0 мл/мин; детектор УФ, 260 нм; постоянная времени детектора 0,05 с. Проба экстракт лекарственного средства (экстра-гент подвижная фаза); объем пробы 2 мкл.

Пики: 1 - гваяколсульфо-нат калия, 2 - ацета

страница 54
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58

Скачать книгу "Введение в микромасштабную высокоэффективную жидкостную хроматографию" (2.4Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
компьютерные курсы для начинающих чайников в москве
купить аппаратуру для 3д кинотеатра
купить унитаз heritage dorchester угловой
стоимость билета на концерт киркорова в москве

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(05.12.2016)